Kit de dosage de protéines Solarbio BCA 50T

Le BCA (Acide bicinchoninique) Le kit d'essai protéique est une méthode colorimétrique largement utilisée pour la quantification des concentrations de protéines dans un échantillon. Ce test repose sur la réduction des ions Cu ^ 2 + à Cu ^ 1 + par des protéines dans des conditions alcalines, formant un complexe de couleur violet avec de l'acide bicinchoninique. L'intensité de la couleur est directement proportionnelle à la concentration de protéines, permettant une quantification précise.

Voici un guide étape par étape sur la façon d'utiliser un Protéine BCA Kit d'analyse:

Matériaux requis:

1. Kit d'analyse de protéines BCA
2. Normes protéiques (L'albumine sérique bovine est couramment utilisée)
3. Échantillon contenant des concentrations de protéines inconnues
4. Microplaque ou cuvettes
5. Micropipettes et conseils
6. Lecteur de microplaques ou spectrophotomètre
7. Eau distillée

Procédure:

1. Préparation des normes protéiques:
   • Préparer une série de normes protéiques avec des concentrations connues. Ces normes seront utilisées pour créer une courbe standard pour la quantification. Les concentrations courantes sont 0, 0.125, 0.25, 0.5, 0.75, et 1.0 mg/ml.
2. Préparation de l'échantillon:
   • Diluer votre échantillon de protéines à une concentration appropriée dans la plage linéaire du test. Si nécessaire, Vous devrez peut-être effectuer une dilution préliminaire pour vous assurer que l'échantillon relève de la courbe standard.
3. Préparation du réactif de travail BCA:
   • Mélanger le réactif BCA A et le réactif BCA B dans un 50:1 rapport (généralement fourni dans le kit). Assurer un mélange complet.
4. Ajout de normes et d'échantillon:
   • Pipette Aliquotes des normes protéiques et l'échantillon en puits séparés d'une microplaque. Chaque norme et échantillon doit être exécuté en double ou en triple.
5. Ajout de réactif de travail BCA:
   • Ajoutez un volume approprié du réactif de travail BCA à chaque norme et échantillons de puits contenant. Bien mélanger.
6. Incubation:
   • Incuber la microplaque à une température appropriée (généralement 37 ° C) pour 30 minutes pour laisser la réaction de couleur se produire.
7. La mesure:
   • Mesurer l'absorbance de chaque puits à 562 nm à l'aide d'un lecteur de microplaques ou d'un spectrophotomètre.
8. Création d'une courbe standard:
   • Tracer les valeurs d'absorbance des normes contre leurs concentrations connues pour créer une courbe standard.
9. Quantification de l'échantillon:
   • Utilisez la courbe standard pour déterminer la concentration en protéines de votre échantillon en fonction de son absorbance.
10. Analyse des données:
    • Calculez la concentration de protéine dans l'échantillon en fonction de la courbe standard. La plupart des lecteurs de microplaques ont des logiciels qui peuvent aider dans cette analyse.

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