Sanshibio 2× Taq PCR Master Mix (avec colorant) 1 ml

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Description

2× Taq RAP Master Mix(with dye)

Numéro d'articleE002 Spécification:1mL Storage: Stocker à -20 ° C

Présentation du produit

The 2x Taq PCR Master Mix (avec du colorant) is a premixed solution at twice the concentration of DNA Polymerase, Tampon PCR, dNTP Mix, and indicators. Lorsque vous utilisez ce produit, Ajoutez simplement le modèle et les amorces à la solution prémélangée, et complétez le volume avec DDH2O pour la réaction de PCR. Cela simplifie les étapes opérationnelles et réduit le risque de contamination pendant les procédures de PCR. En plus, the premixed solution contains the necessary dye reagents for gel electrophoresis, enabling direct gel electrophoresis after PCR. Ce produit offre une sensibilité élevée, spécificité forte, et une large gamme linéaire, permettant une quantification plus précise des gènes cibles. Les produits PCR amplifiés à l'aide de ce produit ont ajouté une base au 3′ fin, faciliter le clonage dans les vecteurs t.

Contenu du produit:

Composants E002
2× Taq PCR Master Mix(with dye) 1ml

Stockage:

Stocker à -20 ° C, avec une durée de conservation minimale de 12 mois.

Contrôle de qualité:

Ce produit a subi des tests de qualité et est exempt d'activité d'endonucléase, activité exonucléase, et contamination de la ribonucléase. L'ADN génomique hôte résiduel est ci-dessous 10 copies.

Utilisation des produits:

Amplification de l'ADN en utilisant la méthode PCR; Détermination de la séquence d'ADN.

Instructions d'utilisation:

  • Permettez à toutes les solutions de réaction de PCR nécessaires à équilibrer à température ambiante jusqu'à ce qu'elle soit complètement dissoute. Mélanger soigneusement les solutions et configurer le système de réaction de PCR sur la glace.
  • It is recommended to set up the PCR reaction system on an ice bath or in a cooler, Suivant le système de réaction recommandé pour référence.
  • Pipette soigneusement et mélanger le système de réaction préparé à l'aide d'une pipette, sceller les tubes PCR avec des bouchons, les qualifier de manière appropriée, et centrifugez brièvement à température ambiante.
  • Placer les tubes PCR préparés dans le Appareil PCR, Réglez les conditions de réaction, et initier la réaction de PCR.

Système de réaction recommandé:

Réactifs 25µl Volume du système Concentration finale
2× Taq PCR Master Mix(with dye) 12.5µL
Apprêt je (10µm) 0.5-2.5µL 0.2-1.0µM
Amorce II (10µm) 0.5-2.5µL 0.2-1.0µM
ADN de modèle 1μl selon les besoins -
DDH2O Jusqu'à 25 μl -

Conditions de réaction:

Under normal circumstances, Une méthode en deux étapes peut être utilisée pour la réaction. If the two-step amplification is not satisfactory, Une méthode en trois étapes peut être utilisée pour configurer le programme de réaction de PCR. Considering the uncertainty of target gene abundance in cDNA templates, il est recommandé d'utiliser 35-38 cycles pour l'amplification initiale et ajuster le nombre de cycles en fonction des résultats de l'amplification.

Méthode / étapes Délai de temps Cycles
95℃ (Pré-dénaturation) 2-5min 1
95℃ (Dénaturation) 10seconde 28-40Cycles

(Modèle de plasmide ou génomique:28-35cycles;

modèle d'ADNc:30-40cycles)

55℃ -60 ℃ (Recuit) 30seconde
72℃ (Extension) 1min / 1-3ko
72℃ (Prolongation finale) 5-10min 1
4℃ / 16 ℃ (Hold) -

Note: Les conditions de réaction peuvent être ajustées et optimisées en fonction des exigences réelles.

Précautions:

  1. Le temps d'extension peut être ajusté en fonction de facteurs tels que la longueur et le contenu GC du produit PCR. Le temps d'extension par KB du produit est étroitement lié à la complexité du modèle: Les modèles simples nécessitent 20 secondes, Les modèles typiques nécessitent 30 secondes, et les modèles complexes nécessitent 1 minute.
  2. La configuration de la réaction de PCR doit être adaptée à différentes conditions telles que le modèle, amorces, durée du produit PCR, et le contenu GC. La concentration finale d'amorces se situe généralement dans la plage de 0,2 à 1,0 μm. La concentration de matrice d'ADN peut être ajustée en conséquence. Pour des modèles complexes ou un contenu GC élevé, Il est recommandé de prolonger les temps de pré-dénaturation / dénaturation ou d'extension et d'augmenter les températures de dénaturation / recuit.
  3. Utilisez des zones et des pipettes désignées avant et après l'amplification, porter des gants, et les changer fréquemment. Après avoir terminé la réaction de PCR, N'ouvrez pas immédiatement les tubes de réaction. Permettez-leur de refroidir suffisamment à 4 ° C ou -20 ° C avant l'ouverture pour minimiser le risque de contamination des produits de PCR à l'environnement de laboratoire.

*Pour OEM, Veuillez contacter avec notre vendeur

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