2× TAQ PCR 마스터 믹스 (염료 포함)
제품 번호: E002 사양:1ML 스토리지: -20°C에서 보관
제품소개:
2X TAQ PCR 마스터 믹스 (염료로) DNA 폴리머 라제의 두 배 농도에서 사전 혼합 용액입니다., PCR 버퍼, DNTP 믹스, 그리고 지표. 이 제품을 사용할 때, 프리믹 한 솔루션에 템플릿과 프라이머를 추가하기 만하면, PCR 반응에 대한 DDH2O로 부피를 완료하십시오.. 이것은 작동 단계를 단순화하고 PCR 절차 중 오염 위험을 줄입니다.. 추가적으로, 사전 혼합 용액에는 겔 전기 영동에 필요한 염료 시약이 포함되어 있습니다., PCR 후 직접 겔 전기 영동 활성화. 이 제품은 높은 감도를 제공합니다, 강한 특이성, 그리고 넓은 선형 범위, 표적 유전자의보다 정확한 정량을 허용합니다. 이 제품을 사용하여 증폭 된 PCR 제품에는 3에베이스가 추가되었습니다.′ 끝, t 벡터로의 클로닝을 촉진합니다.
상품 내용:
구성요소 | E002 |
2× TAQ PCR 마스터 믹스 (염료 포함 릿) | 1밀리리터 |
저장:
-20°C에서 보관, 최소 유효 기간이 있습니다 12 개월.
품질 관리:
이 제품은 품질 테스트를 거쳤으며 엔도 뉴 클레아 제 활동이 없습니다., 엑소 뉴 클레아 제 활성, 리보 뉴 클레아 제 오염. 잔류 숙주 게놈 DNA는 다음과 같습니다 10 사본.
제품 사용:
PCR 방법을 사용한 DNA의 증폭; DNA 서열 결정.
사용 지침:
- 필요한 모든 PCR 반응 솔루션을 완전히 용해 될 때까지 실온으로 평형화하도록 허용. 용액을 철저히 섞고 ICE에 PCR 반응 시스템을 설정하십시오..
- 얼음 욕조 또는 냉각기에 PCR 반응 시스템을 설정하는 것이 좋습니다., 참조를 위해 권장 반응 시스템을 따릅니다.
- 피펫을 사용하여 준비된 반응 시스템을 철저히 피펫으로 섞습니다., 캡으로 PCR 튜브를 밀봉하십시오, 적절하게 레이블을 지정하십시오, 실온에서 간단히 원심 분리.
- 준비된 PCR 튜브를 PCR 기계, 반응 조건을 설정하십시오, PCR 반응을 시작합니다.
권장 반응 시스템:
시약 | 25µL 시스템 볼륨 | 최종 농도 |
2× TAQ PCR 마스터 믹스 (염료 포함 릿) | 12.5μL | 1× |
프라이머 i (10µm) | 0.5-2.5μL | 0.2-1.0μm |
프라이머 II (10µm) | 0.5-2.5μL | 0.2-1.0μm |
템플릿 DNA | 1필요에 따라 μl | - |
DDH2영형 | 최대 25μl | - |
반응 조건:
정상적인 상황에서, 반응에 2 단계 방법을 사용할 수 있습니다. 2 단계 증폭이 만족스럽지 않은 경우, PCR 반응 프로그램을 설정하기 위해 3 단계 방법을 사용할 수 있습니다.. cDNA 템플릿에서 표적 유전자 풍부의 불확실성 고려, 사용하는 것이 좋습니다 35-38 초기 증폭에 대한 사이클 및 증폭 결과에 따라 사이클 수를 조정합니다..
방법/단계 | 시간 설정 | 사이클 |
95℃ (사전 결연) | 2-5분 | 1 |
95℃ (변성) | 10비서 | 28-40사이클
(플라스미드 또는 게놈 템플릿:28-35사이클; cDNA 템플릿:30-40사이클) |
55℃ -60 0 (가열 냉각) | 30비서 | |
72℃ (확대) | 1분 / 1-3kb | |
72℃ (최종 확장) | 5-10분 | 1 |
4℃/16 × (Hold) | ∞ | - |
메모: 실제 요구 사항에 따라 반응 조건을 조정하고 최적화 할 수 있습니다..
지침:
- 연장 시간은 PCR 제품의 길이 및 GC 함량과 같은 요소에 따라 조정할 수 있습니다.. 제품의 KB 당 연장 시간은 템플릿의 복잡성과 밀접한 관련이 있습니다.: 간단한 템플릿이 필요합니다 20 초, 일반적인 템플릿이 필요합니다 30 초, 복잡한 템플릿이 필요합니다 1 분.
- PCR 반응의 설정은 템플릿과 같은 다른 조건에 맞게 조정되어야합니다., 프라이머, PCR 제품의 길이, 및 GC 컨텐츠. 프라이머의 최종 농도는 일반적으로 0.2-1.0μm 범위 내에 있습니다.. DNA 주형 농도는 그에 따라 조정될 수 있습니다. 복잡한 템플릿 또는 높은 GC 컨텐츠의 경우, 사전-감염/변성 또는 연장 시간을 연장하고 변성/어닐링 온도를 증가시키는 것이 좋습니다..
- 증폭 전후에 지정된 영역과 피펫을 사용하십시오, 장갑을 착용하십시오, 그리고 자주 바꾸십시오. PCR 반응을 완료 한 후, 반응 튜브를 즉시 열지 마십시오. 실험실 환경에 대한 PCR 제품 오염 위험을 최소화하기 위해 열기 전에 4 ° C 또는 -20 ° C에서 충분히 식히도록하십시오..
*OEM의 경우, 영업 사원에게 문의하십시오
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