組織總磷含量測定試劑盒
筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測.
檢測儀器: 分光光度計 /微板讀取器
目錄號: BC2855
尺寸: 100T/96S
成分:
試劑一: 20 毫升×1. 4℃保存 (強烈的腐蝕性, 強氧化). 試劑Ⅱ: 7 毫升×1. 4℃保存.
試劑三: 粉末×2. 儲存在4℃並免受光線保護. 工作溶液: 完全溶解 5 毫升蒸餾水, 然後加 2.5 攝政II的毫升, 攪拌均勻.
標準: 1 毫升×1, 1 MMOL/L無機磷標準. 4℃保存.
產品描述:
磷的形式包括無機磷和有機磷. 無機磷主要是指磷酸根部, 參與多種新陳代謝, 包括能量代謝, 核酸代謝, 蛋白質磷酸化, 去磷酸化, 等等. 通過測量總磷和無機磷的含量, 可以理解農作物中磷的利用率, 並且可以提供理性施肥的基礎.
消化後, 總磷轉化為無機磷. 鉬藍方法是一種經典方法，用於確定無機磷的含量. 在某些條件下, 來自具有特徵吸收峰的物質的鉬和磷酸鹽 660 奈米. 通過測量吸收的光吸收 660 奈米, 可以計算無機磷含量, 然後可以計算組織中的總磷含量.
所需的材料
離心機, 分光光度計/酶標儀, 水浴, 微型玻璃比色皿/96孔平底板, 移液管, 蒸餾水, 濃硫酸.
程式:
我. 樣品萃取:
0.1g，用1ml濃硫酸的樣品 (緊緊覆蓋以防止水分流失) 放入沸水浴中 10 分分鐘. 當解決方案為黑色或棕色時, 取出. 冷卻後加入200μl試劑I, 攪拌均勻. 繼續沸騰 (緊緊蓋住) 直到溶液透明, 然後冷卻到室溫, 加入3.8毫升蒸餾水並充分混合. 離心在, 10000RPM和室溫 10 分分鐘, 上清液用於測試.
二. 測定程序:
- 預熱分光光度計/微板讀取器 30 分分鐘, 調整波長至 660 奈米, 用蒸餾水調零.
- 將水浴的溫度設置為40℃.
- 加入如下清單的試劑:
| 試劑名稱 (微升) | 空白管 (AB) | 標準管 (在) | 試管 (作為) |
| 標準 | 10 | ||
| 上清液 | 10 | ||
| 蒸餾水 | 100 | 90 | 90 |
| 試劑三 | 100 | 100 | 100 |
攪拌均勻, 40℃水浴 10 分分鐘, 檢測吸光度 660 在室溫下冷卻後的NM 10 分分鐘. 記錄為ab, 分別在.
計算:
總磷酸鹽 (MMOL/G新鮮重量)=[C×(在- AB)÷(作為 – AB)]×v÷w
= 0.005×(在 – AB)÷(作為 – AB)÷W
C: 標準濃度, 1mmol / l; V: 上清液, 5 ML = 0.005 L; 瓦: 樣品重量, G.
筆記:
1reagent III應在使用前準備，並且僅在同一天使用.
2在決心之前, 1–2樣品應用於預測試. 如果吸收值大於 1.5, 蒸餾水應用於相應的稀釋.
實驗範例:
- 根據提取程序服用0.1G腎臟, 離心拿起並清潔, 然後遵循測量程序. 使用 96 板塊計算: at = 0.191, AB = 0.051, as = 0.282. 根據樣品質量計算總磷含量
總磷含量 (mmol/g質量) = 0.005 × (a-ab) ÷ (AS-AB) ÷w = 0.005×(0.191-0.051) ÷ (0.282-0.051) ÷0.1 = 0.030 mmol/g質量.
- 根據提取程序服用0.1克脾臟, 離心進行清潔, 然後遵循測量程序. 使用 96 板塊計算: at = 0.197, AB = 0.051, as = 0.282, 根據樣品質量計算總磷含量
總磷含量 (mmol/g質量) = 0.005×(a-ab) ÷(AS-AB)÷W= 0.005 × (0.197-0.051) ÷ (0.282- 0.051) ÷0.1 = 0.032 mmol/g質量.
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技術規格:
檢測極限: 0.0338 MMOL/L線性範圍: 0.625-8 mmol / l
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