太陽組織総リン含有量アッセイキット

組織総リン含有量アッセイキット

注記: テスト前に予測のために 2 つまたは 3 つの異なるサンプルを取得します.

検出器: 分光光度計 /マイクロプレートリーダー

カタログ番号: BC2855

サイズ: 100T/96S

コンポーネント:

試薬I: 20 mL×1. 4℃で保存 (強い腐食性, 強い酸化). 試薬Ⅱ: 7 mL×1. 4℃で保存.

試薬Ⅲ: パウダー×2. 4°での保管と光から保護されています. 実用的なソリューション: で完全に溶解しました 5 蒸留水 mL, それから追加します 2.5 リージェントIIのml, よく混ぜます.

標準: 1 mL×1, 1 mmol/l無機リン標準. 4℃で保存.

製品説明:

リンの形には、無機リンと有機リンが含まれます. 無機リンは、主にリン酸ラジカルを指します, これは多くの種類の代謝に関与しています, エネルギー代謝を含む, 核酸代謝, タンパク質リン酸化, 脱リン酸化, 等々. 総リンと無機リンの含有量を測定することにより, 作物のリンの利用率を理解することができます, そして、合理的な受精の基礎を提供することができます.

消化後, 総リンは無機リンに変換されました. モリブデンブルー法は、無機リンの含有量を決定するための古典的な方法です. 特定の条件下で, 特徴的な吸収ピークを持つ物質からのモリブデンブルーとリン酸塩 660 nm. の光吸収を測定することにより 660 nm, 無機リン含有量を計算できます, そして、組織内の総リン含有量を計算できます.

必要な材料

遠心, 分光光度計/マイクロプレートリーダー, 水浴, マイクロガラスキュベット/96ウェル平底プレート, 移送ピペット, 蒸留水, 濃硫酸.

手順:

私. サンプル抽出:

0.11mlの濃縮硫酸を含むサンプルのg (水分の損失を防ぐためにしっかりと覆います) 沸騰したお湯を入れてください 10 分. 溶液が黒または茶色の場合, 取り出してください. 冷却後に200μlの試薬Iを加えます, よく混ぜます. 沸騰し続けます (しっかりと覆います) 溶液が透明になるまで, その後、室温まで冷却します, 3.8mlの蒸留水を加え、よく混ぜます. で遠心分離, 10000RPMと室温 10 分, 上清は試験に使用されます.

Ⅱ. 決定手順:

1. 分光光度計/マイクロプレートリーダーを予熱します 30 分, 波長を調整して 660 nm, 蒸留水でゼロを設定する.
2. 水浴の温度を40℃に設定します.
3. 次のリストを使用して試薬を追加します:

試薬名 (μL)	ブランクチューブ (AB)	標準チューブ (で)	試験管 (として)
標準		10
上清			10
蒸留水	100	90	90
試薬Ⅲ	100	100	100

よく混ぜます, 40℃水浴のため 10 分, で吸収性を検出します 660 室温で冷却した後のNM 10 分. ABとして記録します, それぞれと.

計算:

総リン酸塩 (mmol/gフレッシュウェイト)=[c×(で- AB)÷(として – AB)]×v÷w

= 0.005×(で – AB)÷(として – AB)÷W

C: 標準濃度, 1mmol / l; V: 上清ボリューム, 5 ml = 0.005 l; W: サンプル重量, g.

注記:

1Reagent IIIは使用する前に準備し、同じ日にのみ使用する必要があります.

2seytion決定の前に, 1-2サンプルは、事前テストに使用するものとします. 吸収値がより大きい場合 1.5, 蒸留水は、対応する希釈に使用するものとします.

実験例:

1. 抽出手順に従って0.1gの腎臓を服用します, 遠心的にそれを取り上げてきれいにします, 次に、測定手順に従います. 使用 96 計算するためのウェルプレート: at = 0.191, ab = 0.051, as = 0.282. サンプル質量に従って総リン含有量を計算する

総リン含有量 (mmol/g質量) = 0.005 × (a-ab) ÷ (as-ab) ÷w = 0.005×(0.191-0.051) ÷ (0.282-0.051) ÷0.1 = 0.030 mmol/g質量.

2. 抽出手順に従って0.1gの脾臓を服用します, 遠心的に掃除をします, 次に、測定手順に従います. 使用 96 計算するためのウェルプレート: at = 0.197, ab = 0.051, as = 0.282, サンプル質量に従って総リン含有量を計算する

総リン含有量 (mmol/g質量) = 0.005×(a-ab) ÷(as-ab)÷W= 0.005 × (0.197-0.051) ÷ (0.282- 0.051) ÷0.1 = 0.032 mmol/g質量.

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技術仕様:

検出限界: 0.0338 mmol/l線形範囲: 0.625-8 mmol / l