조직 총 인 함량 분석 키트
메모: 테스트 전에 예측을 위해 2~3개의 서로 다른 샘플을 채취합니다..
탐지 장비: 분광 광도계 /마이크로 플레이트 리더
고양이 번호: BC2855
크기: 100T/96S
구성요소:
시약 I: 20 밀리리터×1. 4℃에서 보관 (강한 부식성, 강한 산화). 시약 Ⅱ: 7 밀리리터×1. 4℃에서 보관.
시약 III: 가루×2. 4 ℃에서 저장하고 빛으로부터 보호됩니다. 작업 솔루션: 완전히 용해 5 증류수 1mL, 그런 다음 추가 2.5 리젠트 II의 ML, 잘 섞다.
기준: 1 밀리리터×1, 1 MMOL/L 무기 인 표준. 4℃에서 보관.
제품 설명:
인의 형태에는 무기 인 및 유기 인이 포함됩니다.. 무기 인은 주로 인산 라디칼을 말합니다, 많은 종류의 신진 대사에 관여합니다, 에너지 대사를 포함하여, 핵산 대사, 단백질 인산화, 탈 인산화, 등등. 총 인 및 무기 인의 함량을 측정함으로써, 작물에서 인의 이용률을 이해할 수 있습니다., 합리적인 수정의 기초가 제공 될 수 있습니다.
소화 후, 총 인은 무기 인으로 전환되었다. Molybdenum Blue 방법은 무기 인의 함량을 결정하는 고전적인 방법입니다.. 특정 조건 하에서, 특징적인 흡수 피크가있는 물질로부터의 몰리브덴 청색 및 포스페이트 660 nm. 광 흡수를 측정함으로써 660 nm, 무기 인 함량을 계산할 수 있습니다, 그런 다음 조직의 총 인 함량을 계산할 수 있습니다..
필요한 자료
원심분리기, 분광 광도계/마이크로플레이트 리더, 욕조, 마이크로 유리 큐벳/96웰 평면 바닥 플레이트, 이송 피펫, 증류수, 농축 황산.
절차:
나. 샘플 추출:
0.11ml의 농축 황산을 갖는 샘플의 G (수분 손실을 방지하기 위해 단단히 덮으십시오) 끓는 수조에 넣으십시오 10 분. 용액이 검은 색 또는 갈색 일 때, 꺼내십시오. 냉각 후 200μL의 시약 I을 첨가하십시오, 잘 섞다. 계속 끓는다 (단단히 덮으십시오) 용액이 투명해질 때까지, 그런 다음 실온으로 식 힙니다, 3.8ml의 증류수를 넣고 잘 섞는다. 원심 분리, 10000RPM 및 실내 온도 10 분, 상청액은 테스트에 사용됩니다.
II. 결정 절차:
- 분광 광도계/ 마이크로 플레이트 리더를 예열하십시오 30 분, 파장을 조정하다 660 nm, 증류수로 0을 설정하다.
- 수조 온도를 40 ℃로 설정하십시오.
- 다음 목록으로 시약을 추가하세요.:
시약명 (μL) | 빈 튜브 (AB) | 표준 튜브 (에) | 시험관 (처럼) |
기준 | 10 | ||
상청액 | 10 | ||
증류수 | 100 | 90 | 90 |
시약 III | 100 | 100 | 100 |
잘 섞다, 40℃ 수조 10 분, 흡수를 감지하십시오 660 실온에서 냉각 후 NM 10 분. AB로 기록하십시오, 각각과.
계산:
총 인산염 (MMOL/G 신선한 무게)=[C×(에- AB)¶(처럼 – AB)]× V ÷ w
= 0.005 ×(에 – AB)¶(처럼 – AB)¼W
씨: 표준 농도, 1mmol/L; V: 상청액 부피, 5 ML = 0.005 l; 여: 샘플 중량, g.
메모:
1. 리게트 III는 사용하기 전에 준비해야하며 같은 날에만 사용해야합니다..
2결정하기 전에, 1–2 샘플은 사전 테스트에 사용되어야합니다. 흡수 값이 더 큰 경우 1.5, 증류수는 해당 희석에 사용되어야합니다.
실험예:
- 추출 절차에 따라 0.1g 신장을 섭취하십시오, 원심력으로 가져 가서 청소하십시오, 그런 다음 측정 절차를 따르십시오. 사용 96 계산할 잘 플레이트: at = 0.191, ab = 0.051, as = 0.282. 샘플 질량에 따라 총 인 함량을 계산하십시오.
총 인 함량 (mmol/g 질량) = 0.005 × (a-ab) ¶ (AS-AB) ÷ W = 0.005 ×(0.191-0.051) ¶ (0.282-0.051) ÷ 0.1 = 0.030 mmol/g 질량.
- 추출 절차에 따라 0.1g 비장을 섭취하십시오, 원심력으로 청소를합니다, 그런 다음 측정 절차를 따르십시오. 사용 96 계산할 잘 플레이트: at = 0.197, ab = 0.051, as = 0.282, 샘플 질량에 따라 총 인 함량을 계산하십시오.
총 인 함량 (mmol/g 질량) = 0.005 ×(a-ab) ¶(AS-AB)¼W= 0.005 × (0.197-0.051) ¶ (0.282- 0.051) ÷ 0.1 = 0.032 mmol/g 질량.
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기술 사양:
검출 한계: 0.0338 mmol/l 선형 범위: 0.625-8 mmol/L
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