БСА-белок Набор для анализа

Кот: ПК0020

Размер: 500Т (Считыватель микропланшетов) / 50Т (Спектрофотометр)

Хранилище: Стандарт белка BSA хранится при температуре 4 ℃ в течение 3 месяцы， или при -20℃ для 1 год, другие реагенты храните при комнатной температуре в течение 1 год

Компоненты:

	500Т (50Т)	Хранилище
БСА Реагент	100мл	РТ
С реагентом	3мл	РТ
Разбавление PBS	30мл	РТ
Стандарт БСА(5мг/мл БСА)	1мл	-20℃

Описание продукта:

• Принцип набора для анализа белка BCA:
  • На основе восстановления Cu^2+ до Cu^+ белками..
  • BCA образует пурпурно-синий комплекс с Cu^+ в щелочных условиях..
  • Поглощение определяется при длине волны 562 нм..
  • Количественное определение белка проводится путем сравнения поглощения со стандартной кривой..
• Совместимость с моющими средствами:
  • Обычные моющие средства, такие как Паспорт безопасности, Тритон Х-100, и Tween не влияют на результаты теста.
• Чувствительность к определенным агентам:
  • Под воздействием хелатирующих агентов (ЭДТА, ЕГТА), восстановители (DTT, меркаптоэтанол), и липиды.
• Высокие требования к фону:
  • В случаях высокого фона из-за разбавления пробы или лизата, рассмотрите возможность использования набора для анализа белка Bradford..

Протокол

А. МикропланшетЧитатель

1. Рабочее решение BCA

Разбавить 1 объем реагента Cu с 50 объемы реагента BCA (1:50). Если выпадут осадки, он исчезнет после смешивания. Рабочий реагент BCA можно хранить при комнатной температуре в течение 24 часы.

2. Стандартное рабочее решение BSA

Развести 10 мкл БСА (5мг/мл) с PBS до 100 мкл (0.5мг/мл). Добавлять 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20мкл стандартного рабочего раствора БСА (0.5мг/мл) к 96 луночные пластины, добавьте PBS до 20 мкл.

3. Правильно разбавьте образец. Лучше сделать несколько градиентов, такой как 2, 4, и 8 разбавление. Добавьте 20 мкл образца в 96-луночную лунку.

Примечание: Чтобы избежать ошибок на этапах работы, сделать точку отбора проб расположенной в 1/2 как можно дальше за стандартной линией, так как пипетка допускает большую погрешность при взятии небольшого количества пробы, и точка перед стандартной линией может быть не очень точной.

4. Реакция БСА

Добавьте 200 мкл рабочего раствора BCA в 96 луночные пластины, и инкубируйте при 37℃ в течение 15-30 минут.. Мера

поглощение при 562 нм, и нарисуйте стандартную кривую для расчета содержания белка в образце.. Избегайте влияния испарения воды на результаты испытаний при использовании инкубатора..

Б. Спектрофотометр

1. Рабочее решение BCA

Разбавить 1 объем реагента Cu с 50 объемы реагента BCA (1:50). Если выпадут осадки, он исчезнет после смешивания. Рабочий реагент BCA можно хранить при комнатной температуре в течение 24 часы.

2. Стандартное рабочее решение BSA

Развести 100 мкл БСА (5мг/мл) с PBS до тех пор, пока 1 мл (0.5мг/мл).

3. Подготовьте восемь (или больше) 5центрифужные пробирки мл, и добавьте реагенты следующим образом:

Центрифужные пробирки Нет.	1	2	3	4	5	6	7 (образец 1)	8 (образец 2)	9 (образец 3)
Стандартное рабочее решение BSA	0	40мкл	80мкл	120мкл	160мкл	200мкл	200мкл	200мкл	200мкл
ПБС	200мкл	160мкл	120мкл	80мкл	40мкл	0	0	0	0
Рабочее решение BCA	2мл	2мл	2мл	2мл	2мл	2мл	2мл	2мл	2мл

Примечание

Инкубировать в 37 ℃ в течение 15-30 минут. Измерьте поглощение при 562 нм., и нарисуйте стандартную кривую для расчета содержания белка в образце.. Избегайте влияния испарения воды на результаты испытаний при использовании инкубатора..

1. Реагент Cu и разбавление PBS можно хранить при температуре 2–8 ℃, если реагент не используется в течение длительного времени.. Когда реагент BCA кристаллизуется и выпадает в осадок при низких температурах, его можно инкубировать при 37 ℃ для полного растворения, не влияя на его использование..
2. Если в пробе содержится много мешающих веществ, пожалуйста, используйте BCA Protein AssayKit (ПК0020).
3. Для вашей безопасности и здоровья, пожалуйста, наденьте перчатки и марлевую маску

Сопутствующие товары

PC0001 Стандартный раствор белка (5мг/мл БСА) PC0021 Реагент BCA

PC0030 Набор для анализа белка Лоури PC0010 Набор для анализа белка Брэдфорд R0010 Буфер RIPA(высокий)

R0050 Набор для экстракции ядерного белка P1200 Набор геля SDS-PAGE

T1070 Трис-глициновый рабочий буфер,5×

PR1600 Предварительно окрашенный белковый маркер(14.4кД-97,4кД) P1015 Буфер загрузки SDS-PAGE,4×(с DTT) D1060 Буфер переноса WB,10×

PE0010 ECL Субстрат для вестерн-блоттинга