Атрибут | Подробности |
---|---|
Кот | G1285 |
Размер | 6 х 50 мл / 6 х 100 мл |
Хранилище | 2-8°С, избегайте света, Годен до 6 месяцы |
Компоненты комплекта
Реагент | Объем | Хранилище |
---|---|---|
Реагент(А): Раствор для окрашивания альциановым синим | 50мл | 100мл |
Реагент(Б): окислитель | 50мл | 100мл |
Реагент(С): Реагент Шиффа | 50мл | 100мл |
Реагент(Д): Раствор гематоксилина | 50мл | 100мл |
Реагент(Э): Кислотный раствор для дифференциации | 50мл | 100мл |
Реагент(Ф): Решение Скотта Воронения | 50мл | 100мл |
Введение
Окрашивание гликогеном является традиционным методом окрашивания патологий.. Впервые использован Макманусом в 1946, Технология PAS отображает муцин и другие полисахариды. Этот метод используется для визуализации гликогена и других полисахаридов.. Окрашивающий раствор может также содержать нейтральные клейкие вещества и некоторые кислые вещества..
Комбинация Alcian Blue и технологии PAS идентифицирует нейтральный и кислый муцин в одном и том же срезе ткани.. Этот метод обычно используется для обнаружения муцинов.. Отрицательный результат окрашивания ясно указывает на отсутствие муцина.. Обычно, срезы сначала окрашивают стандартным альциановым синим. (рН 2.5) с последующей технологией PAS. Альциановый синий окрашивает муцин слюны., гиомуцин, и протеогликановый синий. Технология PAS позволяет окрашивать нейтральный муцин в глубокий красный или красно-фиолетовый цвет и одновременно окрашивать ткани и клетки, содержащие как нейтральный, так и кислый муцин, в различные оттенки фиолетового цвета., благодаря сочетанию и реакции альцианового синего и реагента Шиффа..
Самостоятельно предоставляемые материалы
Дистиллированная вода, Серия этанола
Протокол (только для справки)
- Депарафин в дистиллированную воду, затем промойте в дистиллированной воде для 2 минуты.
- Окрасить раствором для окрашивания альциановым синим. 10-20 минуты.
- Промыть в дистиллированной воде три раза за каждый раз. 1-2 минуты.
- Обработать оксидантом 5 минуты. Промойте водопроводной водой, а затем дважды ополосните дистиллированной водой..
- Замочите в реагенте Шиффа и окрасьте. 10-20 минуты. Затем промойте проточной водой в течение 10 минуты.
- Окраска раствором гематоксилина для 1-2 минуты, затем промойте водой.
- Дифференцировать с помощью кислотного дифференцировочного раствора для 2-5 секунды, затем промойте водой.
- Синий с раствором Scott Blueing для 3 минут и промойте водой в течение 3 минуты.
- Обезвоживание серией этанола, прозрачный с ксилолом, и заклеить смолой.
Результат
- Гликоген, нейтральные муцины, и различные гликопротеины: Пурпурно-красный
- Кислые муцины (сульфатированные и карбоксилированные): Синий
- Протеогликаны, гиалуроновая кислота: Синий
Примечание: Клетки или ткани, содержащие нейтральные и кислые муцины, могут быть окрашены в разные оттенки от сине-фиолетового до фиолетового..
Примечание
- Обеспечьте чистую депарафинизацию участков, чтобы не повлиять на эффект окрашивания..
- Время окисления окислителя не должно быть слишком продолжительным.; оптимальная температура 18-22°С..
- Реагенты А, Б, и C следует хранить герметично при температуре 4°C., избегать чрезмерного солнечного света и воздействия воздуха. Перед использованием, позвольте им достичь комнатной температуры в темноте.
- Кислый раствор для дифференциации следует часто заменять., и время дифференциации корректируется в зависимости от толщины среза, тип ткани, и возраст решения. Крайне важно промывать достаточное количество водопроводной воды после дифференциации..
- Время действия оксиданта и реагента Шиффа имеет решающее значение и зависит от толщины среза и типа ткани..
- При повторном окрашивании раствором гематоксилина, выполните легкое окрашивание, чтобы не замаскировать цвет альцианового синего.. Цель состоит в том, чтобы предотвратить перекрытие цвета альцианового синего окраской цитоплазмы или муцина..
- Последовательность окрашивания Alcian Blue-PAS может повлиять на конечный результат.. Когда окрашивание PAS предшествует окрашиванию альциановым синим, нейтральный муцин и гликоген могут быть окрашены в фиолетовый цвет.. Наоборот, Альциановый синий может окрасить эти вещества в пурпурно-красный цвет перед окрашиванием PAS..
- Для безопасности и здоровья, надеть экспериментальную одежду и одноразовые перчатки.
Отзывы
Отзывов пока нет.