Набор для анализа активности удаления радикалов Solarbio ABTS Tree

Обзор продукта

Атрибут	Подробности
Операционное оборудование	Спектрофотометр
Номер каталога	BC4770
Размер	50 Тесты / 24 Образцы

Содержание продукта:

Перед использованием убедитесь, что объем реагента соответствует объему раствора во флаконе.. По вопросам, пожалуйста, свяжитесь Соларбио персонал оперативно.

Название реагента	Технические характеристики	Условия хранения
Извлечь раствор	Жидкость, 60 мл × 1	Хранить при 4℃
Реагент I	Жидкость, 80 мл × 1	Хранить при 4℃
Реагент II	Порошок × 1	Хранить при 4℃
Реагент III	Жидкость, 20 мкл × 1	Хранить при 4℃
Реагент IV	Жидкость, 1.5 мл × 1	Хранить при -20℃
Реагент V	Порошок × 1	Хранить при 4℃

Приготовление раствора:

1. Реагент II: Перед использованием, добавлять 3 мл дистиллированной воды и полностью растворить. Любой неиспользованный реагент можно хранить при температуре -20℃ в течение двух недель..
2. Приготовление рабочего раствора реагента III: Поместите жидкость в прилагаемую EP-пробирку.. Приготовьте рабочий раствор в соответствии с соотношением Реагента III. (мкл) в дистиллированную воду (мл) "=" 1 мкл: 12 мл. Неиспользованные реагенты следует хранить при температуре 4 ℃..
3. Приготовление рабочего раствора реагента IV: Храните Реагент IV отдельно при температуре -20℃.. Перед использованием, приготовьте рабочий раствор в соответствии с номером образца и соотношением реагента V и реагента I. (В: В) "=" 1:9. Неиспользованный реагент следует хранить при температуре -20℃..
4. Реагент V: Поместите порошок, содержащий 5 мг витамина С в прилагаемой EP-пробирке. Добавлять 2.8 мл раствора экстракта перед использованием, и тщательно встряхните, чтобы растворить. Подготовить 10 ммоль/л раствора витамина С для использования в качестве положительного контроля.. Хранить при температуре 4℃ в течение одной недели..
5. Приготовление рабочего раствора АБТС: Перед использованием, приготовить рабочий раствор АБТС в необходимом для испытания количестве. Доля Реагента I: Реагент II: Реагент III Рабочий раствор (В:В:В) "=" 76:5:4. Приготовьте и храните в темном помещении при комнатной температуре.. Использовать внутри 30 минуты.

Описание продукта:

1. Оценка антиоксидантной способности: Метод ABTS широко используется для оценки антиоксидантной способности гидрофильных и липофильных веществ..
2. Образование радикала ABTS: ABTS окисляется с образованием стабильного сине-зеленого катион-радикала ABTS с пиками поглощения при 405 нм или 734 нм.
3. Снижение поглощения: При добавлении испытуемого вещества к радикальному раствору АБТС, антиоксидантный компонент вступает с ним в реакцию, вызывая снижение поглощения при 405 нм.
4. Пропорциональная очистка: Изменение поглощения прямо пропорционально степени поглощения свободных радикалов в определенном диапазоне..
5. Количественная оценка очистки: Этот набор измеряет способность образца удалять радикалы ABTS путем количественного определения снижения поглощения..

Примечание: Перед тестированием, провести предварительные эксперименты с 2–3 образцами, показывающими значительные ожидаемые различия.. Если поглощение образца выходит за пределы диапазона измерения, рассмотрите возможность разбавления или увеличения размера выборки для тестирования.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Водяная баня постоянной температуры, спектрофотометр, 1 стеклянная кювета мл, настольная центрифуга, ступка/измельчитель, сушильная камера, 30сито ~50 меш, и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Извлечение образца: (Количество образцов можно соответствующим образом отрегулировать., и обратитесь к литературе за конкретными пропорциями)

1. Подготовка образцов растительных тканей: Свежие образцы сушите при 60 ℃ до постоянного веса., растереть в ступке (или шлифовальная машина), и просеять через сито 30-50 ячеек.. Вес примерно 0.05 г образцов, добавлять 1 мл раствора экстракта, и инкубируйте на водяной бане при температуре 40℃ в течение 30 мин. Центрифуга в 10000 об/мин для 10 мин при комнатной температуре, соберите супернатант и храните его на льду для тестирования.
2. Красное вино, Фруктовый сок, и другие жидкие образцы: Брать 100 мкл раствора образца и добавьте 900 мкл раствора экстракта. Вихревая смесь, центрифуга при комнатной температуре, 10000 об/мин для 10 мин, соберите супернатант и храните его на льду для тестирования.
3. Экстракция или наркотик: Приготовьте раствор экстракта определенной концентрации., такой как 5 мг/мл.

Примечание: Способность различных образцов удалять свободные радикалы ABTS может значительно различаться.. Чтобы обеспечить точность, корректировка образцов по предварительным результатам.

II. Этапы определения:

1. Предварительно нагрейте спектрофотометр более 30 минуты, установите длину волны на 405 нм, и ноль дистиллированной водой.
2. Подготовка положительного контроля: Подготовить 10 ммоль/л раствор витамина С с раствором экстракта. Для линейной зависимости, подготовить 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, и 0.1 растворы витамина С мг/мл. Для положительного контроля со скоростью клиренса около 90%, приготовьте растворы витамина С большего размера, чем 1.5 ммоль/л.
3. Операционный стол: Добавьте следующие реагенты в 96-луночный планшет или EP-пробирку., соответственно:

Название реагента	Пустая трубка (Б)	Пробирка (Т)	Контрольная трубка (С)	Пробирка с положительным контролем (ПК)
Супернатант	50	50		50
Решение для венчурных инвестиций				50
Дистиллированная вода	50		50
Реагент IV Раствор	100	100	100	100
Рабочее решение АБТС	850	850	850	850
Реагент I	950

После тщательного перемешивания, инкубировать в темноте для 6 мин при комнатной температуре. Измерьте поглощение при 405 нм. Запишите значения поглощения для пустой пробирки., контрольная трубка, пробирка с положительным контролем, и пробирка как AB, переменного тока, БТР, и АТ соответственно. Пустую пробирку необходимо протестировать. 1-2 раз.

III. Расчет скорости удаления свободных радикалов ABTS:

1. Установление стандартной кривой: Формула скорости удаления свободных радикалов положительного контроля: Скорость удаления свободных радикалов ABTS DVC% = [(АБ-АПК) ÷ АБ] × 100%
2. Формула расчета скорости удаления свободных радикалов образцом: Скорость удаления свободных радикалов ABTS D% = [АБ — (АТ-АС)] ÷ АБ] × 100%.

Примечание:

1. Сравнить очищающую способность различных образцов., рекомендуется добавлять в одну партию одинаковый объем образцов, корректировка в соответствии с предэкспериментальными результатами. Во время сравнения, корректировать образцы в соответствии с результатами, сравнение скорости клиренса при одной и той же концентрации (коэффициент разбавления).
2. Пробы должны быть взяты и протестированы в тот же день..

Экспериментальный пример:

Брать 0.05 г перца чили и добавьте 1 мл раствора экстракта для гомогенизации. После центрифугирования, соберите супернатант и действуйте в соответствии с этапами определения. Рассчитать процент оформления: Д% = [АБ — (АТ-АС)] ÷AB] × 100% "=" [1.330-(0.468-0.022)]÷ 1,330×100% = 66.466%

сопутствующие товары:

• BC4750/BC4755: Набор для анализа способности улавливать свободные радикалы DPPH
• BC1310/BC1315: Общая антиоксидантная способность (Т-АОС) Набор для анализа
• BC1320/BC1325: Набор для анализа способности улавливать гидроксильные радикалы