SOLARBIO ABTS TREE TREP RADICAL SCAVENGing Activity Dosage Kit

Présentation du produit

Attribut	Détails
Équipement d'exploitation	Spectrophotomètre
Numéro de catalogue	BC4770
Taille	50 Tests / 24 Échantillons

Contenu produit:

Veuillez vous assurer que le volume de réactif correspond au volume de solution dans la bouteille avant utilisation. Pour les demandes, Contact aimable Solarbio personnel rapidement.

Nom du réactif	Caractéristiques	Conditions de stockage
Extraire la solution	Liquide, 60 mL × 1	Conserver à 4℃
Réactif I	Liquide, 80 mL × 1	Conserver à 4℃
Réactif II	Poudre × 1	Conserver à 4℃
Réactif III	Liquide, 20 µL × 1	Conserver à 4℃
Réactif IV	Liquide, 1.5 mL × 1	Conserver à -20℃
Réactif V	Poudre × 1	Conserver à 4℃

Préparation de la solution:

1. Réactif II: Avant utilisation, ajouter 3 ml d'eau distillée et dissoudre complètement. Tout réactif inutilisé peut être stocké à -20 ℃ pendant deux semaines.
2. Préparation de la solution de travail réactif III: Placer le liquide dans le tube EP fourni. Préparez la solution de travail en fonction du rapport de réactif III (µL) à l'eau distillée (ml) = 1 µL: 12 ml. Les réactifs inutilisés doivent être stockés à 4 ℃.
3. Préparation de la solution de travail réactive IV: Stocker le réactif IV séparément à -20 ℃. Avant utilisation, Préparez la solution de travail en fonction du numéro de l'échantillon et du rapport de réactif V à réactif I (V: V) = 1:9. Le réactif inutilisé doit être stocké à -20 ℃.
4. Réactif V: Placer la poudre contenant 5 Mg de vitamine C dans le tube EP fourni. Ajouter 2.8 ml de solution d'extrait avant utilisation, et secouer soigneusement pour se dissoudre. Préparer un 10 Solution de vitamine C MMOL / L pour une utilisation comme contrôle positif. Stocker à 4 ℃ pour une semaine.
5. Préparation de la solution de travail ABTS: Avant utilisation, Préparez la solution de travail ABTS en fonction du montant requis pour le test. La proportion de réactif i: Réactif II: Solution de travail réactif III (V:V:V) = 76:5:4. Préparez et stockez dans une pièce sombre à température ambiante. Utiliser à l'intérieur 30 minutes.

Description du produit:

1. Évaluation des capacités antioxydantes: La méthode ABTS est largement utilisée pour évaluer la capacité antioxydante des substances hydrophiles et lipophiles.
2. Formation d'Abts Radical: ABTS s'oxyde pour former un cation bleu-vert stable Abts radical avec des pics d'absorption à 405 nm ou 734 nm.
3. Diminution de l'absorbance: Lorsque la substance testée est ajoutée à la solution radicale ABTS, Le composant antioxydant réagit avec lui, provoquant une diminution de l'absorbance à 405 nm.
4. Piégeage proportionnel: Le changement d'absorbance est directement proportionnel au degré de piégeage des radicaux libres dans une certaine plage.
5. Quantification du récupération: Ce kit mesure la capacité de l'échantillon à récupérer les radicaux en quantifiant la diminution de l'absorbance.

Note: Avant les tests, mener des expériences préliminaires avec 2 à 3 échantillons montrant des différences attendues significatives. Si l'absorbance des échantillons tombe en dehors de la plage de mesure, Envisagez de diluer ou d'augmenter la taille de l'échantillon pour les tests.

Réactifs et équipements requis mais non fournis:

Bain d'eau à température constante, spectrophotomètre, 1 Cuvette en verre ml, centrifugeuse de bureau, mortier / broyeur, coffret de séchage, 30~ Tamis de 50 maille, et eau distillée.

Procédure:

je. Extraction d'échantillon: (Le nombre d'échantillons peut être ajusté en conséquence, et se référer à la littérature pour des proportions spécifiques)

1. Préparation des échantillons de tissus végétaux: Sécher des échantillons frais à 60 ℃ jusqu'à un poids constant, broyer dans un mortier (ou broyeur), et tamis à travers un tamis de 30 ~ 50 maille. Peser approximativement 0.05 g d'échantillons, ajouter 1 ml de solution d'extrait, et incuber dans un bain d'eau de 40 ℃ pour 30 min. Centrifuger à 10000 tr/min pour 10 min à température ambiante, Collectez le surnageant et gardez-le sur la glace pour les tests.
2. Vin rouge, Jus de fruit, et d'autres échantillons de liquide: Prendre 100 μl de solution d'échantillon et ajouter 900 μl de solution d'extrait. Mélange de vortex, centrifugeuse à température ambiante, 10000 tr/min pour 10 min, Collectez le surnageant et gardez-le sur la glace pour les tests.
3. Extraction ou médicament: Préparez une certaine concentration avec la solution d'extrait, tel que 5 mg/ml.

Note: La capacité de divers échantillons à récupérer les radicaux libres Abts peut varier considérablement. Pour assurer la précision, ajuster les échantillons en fonction des résultats préliminaires.

II. Étapes de détermination:

1. Préchauffer le spectrophotomètre pendant plus 30 minutes, Réglez la longueur d'onde sur 405 nm, et zéro avec de l'eau distillée.
2. Préparation d'un contrôle positif: Préparer un 10 Solution de vitamine C MMOL / L avec une solution d'extrait. Pour une relation linéaire, préparer 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, et 0.1 Solutions MG / ML de vitamine C. Pour un contrôle positif avec un taux de dégagement d'environ 90%, préparer des solutions de vitamine C plus grandes que 1.5 mmol / L.
3. Table opérationnelle: Ajouter les réactifs suivants dans une plaque ou un tube EP à 96 puits, respectivement:

Nom du réactif	Tube vierge (B)	Éprouvette (T)	Tube de commande (C)	Tube de contrôle positif (PC)
Surnageant	50	50		50
Solution VC				50
Eau distillée	50		50
Solution de réactif IV	100	100	100	100
Solution de travail abts	850	850	850	850
Réactif I	950

Après un mélange complet, incuber dans l'obscurité pour 6 min à température ambiante. Mesurer l'absorbance à 405 nm. Valeurs d'absorbance d'enregistrement pour le tube vide, tube de commande, tube de contrôle positif, et tube à essai comme ab, CA, APC, Et à respectivement. Le tube vide doit être testé 1-2 fois.

III. Calcul du taux de piégeage des radicaux libres ABTS:

1. Établissement d'une courbe standard: La formule du taux de piégeage des radicaux libres du contrôle positif: ABTS RATIFICATION DES RADIQUES FRAIS DVC% = [(AB-APC) ÷ AB] × 100%
2. Formule de calcul de l'échantillon de taux de piégeage des radicaux libres: Abts taux de piégeage des radicaux libres d% = [UN B – (AT-AC)] ÷ AB] × 100%.

Note:

1. Pour comparer la capacité de récupération de différents échantillons, Il est recommandé d'ajouter le même volume d'échantillons au même lot, ajustement en fonction des résultats pré-expérimentaux. Pendant la comparaison, Ajustez les échantillons en fonction des résultats, Comparaison des taux de dégagement à la même concentration (taux de dilution).
2. Les échantillons doivent être prélevés et testés le même jour.

Exemple expérimental:

Prendre 0.05 g de chili et ajouter 1 ML de solution d'extrait pour homogénéiser. Après centrifugation, Recueillir le surnageant et procéder en fonction des étapes de détermination. Calculez le taux de dégagement: D% = [UN B – (AT-AC)] ÷ AB] × 100% = [1.330-(0.468-0.022)]÷ 1,330 × 100% = 66.466%

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