ДНК-полимераза Sanshibio Taq с горячим стартом

ДНК-полимераза Taq с горячим стартом

предмет номер：EH001 Спецификация：500U/1000U/5000U Хранение: Хранить при -20°C.

Внедрение продукции：

Этот продукт представляет собой фермент горячего запуска с антителом, который подавляет неспецифическую амплификацию, вызванную праймером, проведенными мишенькой или образованием димера праймера при низких температурах.. Подходит для горячего старта ПЦР. Поскольку антитело инактивируется во время начальной стадии ДНК денатурации реакции ПЦР, Нет необходимости в специальной дезактивационной лечении; Его можно использовать в стандартных условиях ПЦР. Продукт ПЦР, усиленный с использованием этого продукта’ база добавлена ​​в 3′ конец, Сделать его прямо клонировать в Т-вектор. Он также может быть клонирован в тупые векторы после конечной полировки и фосфорилирования.

Содержание продукта：

Хранилище:

Хранить при -20°C., с сроком годности по крайней мере 12 месяцы.

Определение деятельности:

Использование активированной ДНК спермы махи-махи в качестве шаблона/праймера, деятельность определяется как 1 единица (ты) кислотно-нерастворимого материала, включенного, Занимаясь 10 нмоль нуклеотидов внутри 30 минуты при 74 ° C..

Контроль качества:

Этот продукт подвергся качественному тестированию и не свободен от дезоксирибонуклеазы эндонуклеазной активности, Дезоксирибонуклеаза экзонуклеазная активность, и загрязнение рибонуклеазой. Остаточное содержание геномной ДНК хозяина ниже 10 копии.

Продукт использует:

Горячий старт ПЦР; Определение последовательности ДНК.

Инструкции по использованию:

• Позвольте необходимым реагентам уравновешивать при комнатной температуре до полного растворения. Аккуратно хорошо перемешайте (Не вихрь), и использовать после короткого центрифугирования, чтобы предотвратить чрезмерное образование пузырьков и избежать повторных циклов замораживания-оттаивания. Если часто используются, Хранить при 4 ° C.. Подготовьте реакционную смесь ПЦР в соответствии со следующими компонентами (Приготовьте реакционную смесь на ледяной коробке):

Рекомендуемая система реакции:

Примечание: Количество каждого компонента в реакционной системе может быть скорректировано в соответствии с фактическими требованиями.

• В общем, Двухэтапный метод может быть использован для реакции; Если двухэтапное усиление не является удовлетворительной, Трехэтапный метод может использоваться для настройки программы реакции ПЦР.

Примечание: Условия реакции могут быть скорректированы и оптимизированы в соответствии с фактическими требованиями.

• После завершения реакции, Проанализировать экспериментальные результаты. Для получения подробных методов анализа, См. Руководство по эксплуатации управления ПЦР.

Меры предосторожности:

1. Пожалуйста, выберите соответствующий отжиг (расширение) температура на основе конструкции праймера. Обычно, Значение TM праймеров предназначено так, чтобы быть около 60 ° C. Для праймеров с более низкой температурой отжига или для усиления длинных фрагментов 200 б.п., Рекомендуется трехэтапный метод. Время расширения может быть отрегулировано на основе длины продукта ПЦР, Содержание GC, и другие факторы. Время расширения на КБ продукта тесно связано со сложностью шаблона. Простые шаблоны используют 20 секунды, Обычные шаблоны используют 30 секунды, и сложные шаблоны используют 1 минута.
2. Условия реакции ПЦР должны быть установлены по -разному на основе таких факторов, как шаблон, праймеры, Длина продукта ПЦР, и контент GC. Конечная концентрация обычно используемых праймеров может быть скорректирована в диапазоне 0.2-1.0 мкМ. Концентрация шаблона ДНК также может быть скорректирована на основе его концентрации. Для сложных шаблонов или высокого содержания GC, Рассмотрите возможность продления денатурации/отжига или времени расширения, и повышение температуры денатурации/отжига.
3. Используйте выделенные области и пипетры до и после усиления, Носите перчатки, и менять их часто. После ПЦР-амплификации, Не открывайте реакционные трубки напрямую. Поместите их при 4 ° C или -20 ° C, чтобы охладить достаточно перед открытием, чтобы минимизировать риск загрязнения продукта ПЦР в экспериментальной среде.