DNA polimerasi Hot-Start Sanshibio Taq

Taq DNA polimerasi Hot-Start

oggetto numero：EH001 Specificazione：500U/1000U/5000U Storage: Conservare a -20 ° C.

Introduzione al prodotto：

This product is an antibody-blocked hot-start enzyme that suppresses non-specific amplification caused by primer misannealing or primer dimer formation at low temperatures. It is suitable for Hot Start PCR. Since the antibody is inactivated during the initial DNA denaturation step of the PCR reaction, there is no need for special deactivation treatment; it can be used under standard PCR conditions. The PCR product amplified using this product has an ‘A’ base added to the 3′ end, making it directly clonable into a T-Vector. It can also be cloned into blunt-end vectors after end polishing and phosphorylation.

Contenuto del prodotto：

Magazzinaggio:

Conservare a -20 ° C., with a shelf life of at least 12 mesi.

Definizione dell'attività:

Usando il DNA dello sperma Mahi-Mahi attivato come modello/primer, L'attività è definita come 1 unità (U) di materiale insolubile acido incorporato, Assumendo 10 nmol di nucleotidi all'interno 30 minuti a 74 ° C..

Controllo di qualità:

Questo prodotto ha subito test di qualità ed è privo di attività di endonucleasi di deossiribonucleasi, Attività di esonucleasi di deossiribonucleasi, e contaminazione da ribonucleasi. Il contenuto residuo del DNA genomico ospite è di seguito 10 copie.

Usi del prodotto:

Hot Start PCR; DNA sequence determination.

Istruzioni per l'uso:

• Allow the required reagents to equilibrate at room temperature until fully dissolved. Mescolare delicatamente bene (Non vortice), and use after brief centrifugation to prevent excessive bubble formation and avoid repeated freeze-thaw cycles. If frequently used, Conservare a 4 ° C.. Prepare the PCR reaction mixture according to the following components (Preparare la miscela di reazione su una scatola di ghiaccio):

Recommended Reaction System:

Nota: Le quantità di ciascun componente nel sistema di reazione possono essere regolate in base ai requisiti effettivi.

• Generalmente, Un metodo in due fasi può essere utilizzato per la reazione; Se l'amplificazione in due fasi non è soddisfacente, È possibile utilizzare un metodo in tre fasi per impostare il programma di reazione PCR.

Nota: Le condizioni di reazione possono essere regolate e ottimizzate in base ai requisiti effettivi.

• Dopo che la reazione è completa, analizzare i risultati sperimentali. Per metodi di analisi dettagliati, Fare riferimento al manuale operativo dello strumento di amplificazione PCR.

Precauzioni:

1. Please choose an appropriate annealing (estensione) temperatura in base al design del primer. Tipicamente, Il valore TM dei primer è progettato per essere di circa 60 ° C. Per primer con temperature di ricottura più basse o per amplificare frammenti lunghi che superano 200 p.b, Si consiglia un metodo in tre fasi. The extension time can be adjusted based on the length of the PCR product, GC content, and other factors. The extension time per kb of product is closely related to template complexity. Simple templates use 20 secondi, normal templates use 30 secondi, and complex templates use 1 minuto.
2. The PCR reaction conditions should be set differently based on factors such as template, primer, length of the PCR product, and GC content. The final concentration of commonly used primers can be adjusted within the range of 0.2-1.0 μm. The DNA template concentration can also be adjusted based on its concentration. For complex templates or high GC content, consider extending the denaturation/annealing or extension times, and increasing denaturation/annealing temperature.
3. Usa aree e pipetti dedicati prima e dopo l'amplificazione, indossare guanti, e cambiarli frequentemente. Dopo l'amplificazione della PCR, Non aprire direttamente i tubi di reazione. Mettili a 4 ° C o -20 ° C per raffreddare sufficientemente prima di aprirsi per ridurre al minimo il rischio di contaminazione del prodotto PCR nell'ambiente sperimentale.