Sanshibio 2× Зонд для кПЦР Смесь

2× Зондовая смесь для кПЦР

предмет номер：EH002 Спецификация：1mL Storage: Хранить при -20°C.

Внедрение продукции：

This product is a specialized reagent for Real-Time qPCR using the probe method. It contains an antibody-blocked hot-start enzyme that effectively suppresses non-specific amplification caused by primer misannealing or primer dimer formation at low temperatures, thereby enhancing the specificity of the amplification reaction. This product exhibits high amplification efficiency and detection sensitivity, allowing for the generation of a robust standard curve across a broad quantification range, Включение точного количественного определения. Более того, it is compatible with various fluorescence quantitative ПЦР instruments, including those from Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad, Roche, and other domestic brands.

Содержание продукта：

Примечание：ROX Reference Dye can be obtained separately or through the manufacturer to correct inter-well fluorescence signal discrepancies in certain company’s Real-Time PCR amplifiers. ROX Reference Dye I is suitable for ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT and Step One Plus Real-Time PCR Systems, и т. д.. ROX Reference Dye II is suitable for 7500 Real-Time PCR System, 7500 Fast Real-Time PCR System, Stratagene Mx3000P, Mx3005P, and Mx4000, и т. д.. The final concentration of ROX Reference Dye I and II is 1×. Real-time fluorescence quantitative PCR amplifiers such as LightCycler, Thermal Cycler Dice Real Time System II, and Smart Cycler System do not require the use of ROX Reference Dye.

Хранилище:

Хранить при -20°C., с минимальным сроком годности 12 месяцы.

Определение деятельности:

Использование активированной ДНК спермы махи-махи в качестве шаблона/праймера, деятельность определяется как 1 единица (ты) кислотно-нерастворимого материала, включенного, Занимаясь 10 нмоль нуклеотидов внутри 30 минуты при 74 ° C..

Контроль качества:

Этот продукт подвергся качественному тестированию и не свободен от дезоксирибонуклеазы эндонуклеазной активности, Дезоксирибонуклеаза экзонуклеазная активность, и загрязнение рибонуклеазой. Остаточное содержание геномной ДНК хозяина ниже 10 копии.

Продукт использует:

Real-time fluorescence quantitative singleplex or multiplex (2-4 каналы) кПЦР (probe method) amplification of DNA or cDNA; absolute quantification qPCR.

Инструкции по использованию:

• Equilibrate the required reagents at room temperature until fully dissolved, gently mix well (Не вихрь), use after a brief centrifugation to prevent excessive bubble formation, and avoid repeated freeze-thaw cycles. If used frequently, Хранить при 4 ° C.. Prepare the PCR reaction mixture according to the components listed below (Приготовьте реакционную смесь на ледяной коробке):

Примечание：Количество каждого компонента в реакционной системе может быть скорректировано в соответствии с фактическими требованиями. Users need to decide whether to add ROX Reference Dye based on the actual model being used.

• В общем, Двухэтапный метод может быть использован для реакции; Если двухэтапное усиление не является удовлетворительной, Трехэтапный метод может использоваться для настройки программы реакции ПЦР.

Примечание: Условия реакции могут быть скорректированы и оптимизированы в соответствии с фактическими требованиями.

• После завершения реакции, Проанализировать экспериментальные результаты. Для получения подробных методов анализа, См. Руководство по эксплуатации управления ПЦР.

Меры предосторожности:

1. The concentration of the primers used can be adjusted within the range of 0.2-1.0 мкМ, and the DNA template can be appropriately adjusted based on its concentration.
2. Choose an appropriate annealing (расширение) температура на основе конструкции праймера. Обычно, Значение TM праймеров предназначено так, чтобы быть около 60 ° C. Для праймеров с более низкой температурой отжига или для усиления длинных фрагментов 200 б.п., Рекомендуется трехэтапный метод.
3. The concentration of the probe used can be optimized within the range of 0.1-0.4 мкМ. Conduct experiments with gradient concentrations to find the optimal combination of primers and probes. The use of probes depends on the Real Time PCR instrument, probe type, and fluorescent label type. Refer to the instrument manual or specific requirements for each fluorescent probe for adjustments.
4. Используйте выделенные области и пипетры до и после усиления, Носите перчатки, и менять их часто. После ПЦР-амплификации, Не открывайте реакционные трубки напрямую. Поместите их при 4 ° C или -20 ° C, чтобы охладить достаточно перед открытием, чтобы минимизировать риск загрязнения продукта ПЦР в экспериментальной среде.