Polysaccharide and Polyphenol Plant Total RNA (Плюс) Small Quantity Extraction Kit

1. Компоненты набора реагентов

Технические характеристики	50Т	100Т
Кот. Нет.	SN0305AD	SN0306AD
Колонки для экстракции РНК (набор)	50 (набор)	100 (набор)
Колонки для очистки ДНК (набор)	50 (набор)	100 (набор)
Экстракция РНК Буфер I	30 мл	2×30 мл
Буфер удаления ингибитора	30 мл	2×30 мл
Промывной буфер 1	15 мл	2×15 мл
Элюирующий буфер	20 мл	20 мл
Инструкция по эксплуатации	1	1

 

2. Хранилище

This reagent kit can be stored at room temperature (15-25℃) в сухой среде и устойчиво для 12 месяцы.

3. Инструкции по использованию набора реагентов

3.1 Этот набор предназначен для исследовательских целей в области молекулярной биологии и не должен использоваться для диагностики или лечения заболеваний..

3.2 Некоторые компоненты набора содержат раздражители.; желательно принять необходимые меры предосторожности (например, носить защитную одежду и очки).

3.3 Для использования этого комплекта требуется дополнительное оборудование, такое как высокоскоростная центрифуга., водяная баня (металлическая ванна), вихревой смеситель, безводный этанол, жидкий азот, хлороформ, стерильная деионизированная вода, и EP трубки.

4. Знакомство с набором реагентов

This RNA purification kit provides a fast and efficient method for purifying polysaccharide and polyphenol plant total RNA, suitable for most polysaccharide and polyphenol-rich plant tissues. In general, plant tissues rich in polysaccharides and polyphenols contain a high level of secondary phenolic metabolites and polysaccharides, significantly affecting RNA extraction efficiency. This kit can effectively remove polysaccharides and polyphenols, as well as efficiently eliminate DNA contamination from samples. If the experiment is sensitive to DNA, it is recommended to use primers spanning introns for downstream experiments.

The RNA Fast Purification Kit can extract total RNA from plant tissues (включая ядерную РНК и цитоплазматическую РНК) в пределах 1 час. Экстрагированную РНК можно напрямую использовать для RT.-ПЦР, Нозерн-блоттинг, и т. д.. Весь процесс очистки не требует использования токсичных реагентов типа фенол-хлороформа., making this RNA purification kit suitable for various other sample types.

5. Экспериментальные принципы и процедуры

6. Процесс экстракции

Меры предосторожности перед началом эксперимента:

А. Before using Промывной буфер 1, add the specified amount of absolute ethanol according to the label on the reagent bottle, и установите флажок на этикетке, чтобы указать, что абсолютный этанол был добавлен.

Б. The Elution Buffer is a 0.1х ТЕ решение содержащий минимальное количество ЭДТА. Если ЭДТА повлияет на последующие эксперименты, рекомендуется заменить элюционный буфер стерильной деионизированной водой..

1. Образец обработки:

А. Сбор и хранение материалов:

Если свежие материалы нельзя использовать немедленно, Поместите их в жидкий азот и храните их при -80 ° C.

Б. Whenever possible, collect fresh materials, as they contain fewer polysaccharides and polyphenols.

2. Grind approximately 100 mg of fresh samples or not more than 20 мг сухого материала с использованием жидкого азота.

3. Добавлять 600мкл буфера для экстракции РНК I, ensuring there are no blocky tissues in the ground sample. Blocky tissues are difficult to lyse and can reduce RNA yield.

4. Вортекс для 30 секунды.

5. Центрифугируйте лизат для 5 минут в 12,000 об/мин.

(Примечание: Polysaccharide plant materials may produce a lot of sticky substances at this step, which can shear RNA in subsequent steps. Поэтому, remove these substances during this step.)

6. Transfer the supernatant obtained in the previous step to a DNA Clear Purification Column, центрифуга в 12,000 об/мин для 30 секунды, and collect the filtrate (Примечание: РНК присутствует в фильтрате).
7. Добавлять 250мкл абсолютного этанола, Смешайте с помощью пипетки. If there is a small amount of precipitation, это не влияет на последующие эксперименты. Add the liquid to the RNA purification column, центрифуга в 12,000 об/мин для 30 секунды, and discard the flow-through.
8. Добавлять 700мкл буфера для удаления ингибитора к колонке очистки РНК, центрифуга в 12,000 об/мин для 30 секунды, and discard the flow-through.
9. Добавлять 700мкл промывочного буфера 1 к колонке очистки РНК, центрифуга в 12,000 об/мин для 30 секунды, and discard the flow-through.
10. Добавлять 500мкл промывочного буфера 1 к колонке очистки РНК, центрифуга в 12,000 об/мин для 3 минуты, and discard the flow-through.
11. Place the RNA purification column into a new 1.5ml centrifuge tube, air-dry the membrane at room temperature for 2 минуты.

(Примечание: Подтвердите добавление этанола в промывочный буфер 1. The presence of ethanol significantly affects subsequent experiments. Поэтому, membrane drying is crucial. После центрифугирования, ensure the absence of ethanol before elution. Выбросьте отходы и пробирку для сбора.. После использования буфера для стирки 1, Мембрана на колонке очистки РНК должна иметь только небольшой цвет. Осторожно удалить колонку очищения РНК после центрифугирования, Обеспечение того, чтобы он не касался трубки сбора, чтобы избежать загрязнения этанолом.)

12. Капать 50-100мкл элюирующего буфера на мембрану, центрифуга в 12,000 об/мин для 1 минута, and collect the RNA solution.

(Примечание: Eluting RNA with 50μl Elution Buffer can increase RNA concentration but decrease total RNA yield.)