Polysaccharide and Polyphenol Plant Total RNA (プラス) Small Quantity Extraction Kit

1. 試薬キットのコンポーネント

仕様	50T	100T
猫. いいえ.	SN0305AD	SN0306AD
RNA抽出カラム (セット)	50 (セット)	100 (セット)
DNAクリーンアップカラム (セット)	50 (セット)	100 (セット)
RNA抽出 バッファI	30 ミリリットル	2×30 ミリリットル
阻害剤除去バッファー	30 ミリリットル	2×30 ミリリットル
洗浄バッファー 1	15 ミリリットル	2×15 ミリリットル
溶出バッファー	20 ミリリットル	20 ミリリットル
取扱説明書	1	1

 

2. ストレージ

この試薬キットは、室温で保管できます (15-25℃) 乾燥した環境では安定しています 12 月.

3. 試薬キットを使用するための指示

3.1 このキットは分子生物学の研究目的を目的としており、疾患の診断や治療に使用すべきではありません.

3.2 キットの一部のコンポーネントには刺激物が含まれています; 必要な予防策を講じることをお勧めします (保護服やゴーグルを着用するなど).

3.3 このキットを使用するには、高速遠心分離機などの追加の機器が必要です, 水浴 (メタルバス), 渦ミキサー, 無水エタノール, 液体窒素, クロロホルム, 滅菌脱イオン水, およびEPチューブ.

4. 試薬キットの紹介

This RNA purification kit provides a fast and efficient method for purifying polysaccharide and polyphenol plant total RNA, suitable for most polysaccharide and polyphenol-rich plant tissues. 一般的に, plant tissues rich in polysaccharides and polyphenols contain a high level of secondary phenolic metabolites and polysaccharides, significantly affecting RNA extraction efficiency. This kit can effectively remove polysaccharides and polyphenols, as well as efficiently eliminate DNA contamination from samples. 実験がDNAに敏感である場合, it is recommended to use primers spanning introns for downstream experiments.

The RNA Fast Purification Kit can extract total RNA from plant tissues (核RNAおよび細胞質RNAを含む) 内で 1 時間. 抽出されたRNAは、RTに直接使用できます-PCR, ノーザンブロット, 等. 精製プロセス全体では、フェノールクロロホルムなどの有毒試薬は必要ありません, making this RNA purification kit suitable for various other sample types.

5. 実験原則と手順

6. 抽出プロセス

実験を開始する前の注意事項:

あ. Before using 洗浄バッファー 1, add the specified amount of absolute ethanol according to the label on the reagent bottle, and check the box on the label to indicate that absolute ethanol has been added.

B. The Elution Buffer is a 0.1X TEソリューション 最小限のEDTAを含む. EDTAがその後の実験に影響を与える場合, it is recommended to replace the Elution Buffer with sterile deionized water.

1. サンプル処理:

あ. マテリアルコレクションとストレージ:

If fresh materials cannot be used immediately, place them in liquid nitrogen and store them at -80°C.

B. 可能な場合はいつでも, collect fresh materials, as they contain fewer polysaccharides and polyphenols.

2. ほぼ粉砕します 100 新鮮なサンプルのmgまたはそれ以上 20 液体窒素を使用した乾燥材料のmg.

3. 追加 600μl RNA Extraction Buffer I, ensuring there are no blocky tissues in the ground sample. Blocky tissues are difficult to lyse and can reduce RNA yield.

4. ボルテックス 30 秒.

5. 溶解物の遠心 5 数分 12,000 RPM.

(注記: Polysaccharide plant materials may produce a lot of sticky substances at this step, which can shear RNA in subsequent steps. したがって, remove these substances during this step.)

6. Transfer the supernatant obtained in the previous step to a DNA Clear Purification Column, で遠心分離する 12,000 の回転数 30 秒, ろ液を集めます (注記: RNAは濾液に存在します).
7. 追加 250絶対エタノールのμL, ピペッティングでミックスします. 少量の降水量がある場合, 後続の実験には影響しません. RNA精製カラムに液体を追加します, で遠心分離する 12,000 の回転数 30 秒, and discard the flow-through.
8. 追加 700μl Inhibitor Removal Buffer RNA精製カラムに, で遠心分離する 12,000 の回転数 30 秒, and discard the flow-through.
9. 追加 700μl Wash Buffer 1 RNA精製カラムに, で遠心分離する 12,000 の回転数 30 秒, and discard the flow-through.
10. 追加 500μl Wash Buffer 1 RNA精製カラムに, で遠心分離する 12,000 の回転数 3 分, and discard the flow-through.
11. RNA精製カラムを新しい1.5ml遠心分離機に配置します, 室温で膜を空気乾燥させます 2 分.

(注記: Confirm the addition of ethanol to Wash Buffer 1. The presence of ethanol significantly affects subsequent experiments. したがって, membrane drying is crucial. 遠心分離後, 溶出前にエタノールがないことを確認してください. 廃棄物とコレクションチューブを捨てます. After using Wash Buffer 1, RNA精製カラムの膜はわずかな色のみを持つ必要があります. Carefully remove the RNA purification column after centrifugation, ensuring it does not touch the collection tube to avoid ethanol contamination.)

12. 滴下 50-100μl Elution Buffer 膜に, で遠心分離する 12,000 の回転数 1 分, RNA溶液を収集します.

(注記: Eluting RNA with 50μl Elution Buffer can increase RNA concentration but decrease total RNA yield.)