Sanshibio 2× SYBR Campuran qPCR Hijau

Nomor Barang： EH003 Spesifikasi：1mL Penyimpanan: Simpan pada suhu -20°C

Perkenalan produk：

• Reagen khusus untuk Real-Time PCR memanfaatkan SYBR Metode fluoresensi berbasis pewarna hijau I.
• Mengandung enzim hot-start yang diblokir antibodi untuk menekan amplifikasi nonspesifik yang disebabkan oleh dimerisasi primer atau anil primer nonspesifik dalam kondisi suhu rendah.
• Meningkatkan kekhususan reaksi amplifikasi.
• Menampilkan efisiensi amplifikasi yang tinggi, spesifisitas dan sensitivitas deteksi yang kuat, stabilitas yang baik, dan penggunaan operasional yang mudah.
• Menghasilkan kurva standar yang kuat dalam rentang kuantitatif yang luas, memungkinkan kuantifikasi yang akurat.
• Kompatibel dengan berbagai instrumen PCR kuantitatif fluoresensi, termasuk yang dari Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad, Roche, dan merek dalam negeri lainnya.

Isi produk：

Catatan：

• Pewarna Referensi ROX mengoreksi kesalahan sinyal fluoresensi antar sumur pada instrumen amplifikasi PCR Waktu Nyata tertentu.
• ROX Referensi Pewarna I cocok untuk ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT dan Sistem PCR Waktu Nyata Step One Plus.
• ROX Referensi Pewarna II kompatibel dengan 7500 Sistem PCR Waktu Nyata, 7500 Sistem PCR Waktu Nyata yang Cepat, Stratagene Mx3000P, Mx3005P, dan Mx4000.
• Pewarna Referensi ROX I dan II harus digunakan pada konsentrasi akhir 1× dalam reaksi.
• Instrumen seperti LightCycler, Sistem Waktu Nyata Dadu Pengendara Sepeda Termal II, dan Sistem Smart Cycler tidak memerlukan penggunaan Pewarna Referensi ROX.

Penyimpanan:

Simpan pada suhu -20°C, dengan umur simpan minimum 12 bulan.

Definisi Aktivitas:

Menggunakan DNA sperma mahi-mahi teraktivasi sebagai cetakan/primer, kegiatan tersebut didefinisikan sebagai 1 satuan (kamu) dari bahan yang tidak larut dalam asam dimasukkan, dengan mengambil 10 nmol nukleotida di dalamnya 30 menit pada suhu 74°C.

Kontrol Kualitas:

Produk ini telah menjalani pengujian kualitas dan bebas dari aktivitas deoksiribonuklease endonuklease, aktivitas eksonuklease deoksiribonuklease, dan kontaminasi ribonuklease. Konten sisa DNA genom inang ada di bawah 10 salinan.

Kegunaan Produk:

QPCR Kuantitatif fluoresensi waktu nyata (Metode Pewarna) memperkuat DNA atau cDNA; qPCR Kuantitatif Mutlak; qPCR Kuantitatif Relatif.

Petunjuk Penggunaan:

• Biarkan reagen yang diperlukan mencapai keseimbangan pada suhu kamar sampai larut sepenuhnya, aduk rata dengan lembut (jangan pusaran), gunakan setelah sentrifugasi singkat untuk menghindari pembentukan gelembung berlebihan dan siklus beku-cair yang berulang. Jika sering digunakan, simpan pada suhu 4°C. Siapkan campuran reaksi PCR sesuai dengan komponen yang ditekan (siapkan campuran reaksi pada kotak es):

Catatan：Jumlah masing-masing komponen dapat disesuaikan dengan kebutuhan sebenarnya. Penambahan Pewarna Referensi ROX harus ditentukan oleh pengguna berdasarkan model spesifik yang digunakan.

• Umumnya, metode dua langkah dapat digunakan untuk reaksi. Jika amplifikasi tidak memuaskan dengan metode dua langkah, metode tiga langkah dapat digunakan untuk menyiapkan program reaksi PCR.

Catatan： Kondisi reaksi dapat disesuaikan dan dioptimalkan sesuai dengan kebutuhan sebenarnya. Program kurva leleh harus dipilih dan disesuaikan berdasarkan program instrumen amplifikasi yang digunakan.

• Setelah reaksi selesai, menganalisis hasil kurva amplifikasi dan kurva leleh. Lihat panduan pengguna instrumen PCR Real-Time untuk metode analisis terperinci.

Tindakan pencegahan:

1. Silakan pilih anil yang sesuai (perpanjangan) suhu berdasarkan desain primer, dengan primer Tm biasanya sekitar 60°C. Untuk primer dengan suhu anil yang lebih rendah, metode tiga langkah direkomendasikan. Konsentrasi akhir primer yang digunakan dapat diatur dalam kisaran 0,2-1,0μM. Konsentrasi cetakan DNA dapat disesuaikan dengan konsentrasinya.
2. Pewarna SYBR Green I adalah pewarna non-spesifik yang memancarkan fluoresensi saat berikatan dengan DNA beruntai ganda (dsDNA). Namun, itu mudah terdegradasi di bawah cahaya yang kuat. Karena itu, saat merancang primer, penting untuk menghindari pembentukan dimer primer sebanyak mungkin. Selama penggunaan, paparan cahaya kuat dalam waktu lama harus dihindari untuk meningkatkan akurasi hasil, kepekaan, dan kekhususan.
3. Peningkatan konsentrasi ion magnesium dapat mengurangi efek penghambatan SYBR Green I terhadap reaksi PCR. Saat mengoptimalkan reaksi PCR fluoresensi menggunakan produk ini, disarankan untuk sedikit meningkatkan konsentrasi ion magnesium (0.5-3.0mM lebih tinggi dari reaksi PCR standar).
4. Gunakan area dan pipet khusus sebelum dan sesudah amplifikasi, memakai sarung tangan, dan sering-seringlah mengubahnya. Setelah selesai reaksi PCR, jangan membuka tabung reaksi untuk meminimalkan kontaminasi lingkungan pengujian dengan produk PCR.