Sanshibio 2× Taq PCR Master Mix（con colorante）1mL

2× taq PCR Mix Master （con tinte）

Artículo No： E002 Especificación：1ML de almacenamiento: Conservar a -20°C

Introducción del producto：

La mezcla maestra de 2x Taq PCR (con tinte) es una solución premezclada al doble de la concentración de la ADN polimerasa, Búfer de PCR, mezcla dntp, e indicadores. Al usar este producto, Simplemente agregue la plantilla y los cebadores a la solución premezclada, y complete el volumen con DDH2O para la reacción de PCR. Esto simplifica los pasos operativos y reduce el riesgo de contaminación durante los procedimientos de PCR. Además, La solución premezcla contiene los reactivos de tinte necesarios para la electroforesis en gel, habilitando la electroforesis en gel directo después de la PCR. Este producto ofrece alta sensibilidad, fuerte especificidad, y una amplia gama lineal, Permitir una cuantificación más precisa de los genes objetivo. Los productos de PCR amplificados con este producto tienen una base agregada en los 3′ fin, facilitar la clonación en t vectores.

Contenido del producto：

Almacenamiento:

Conservar a -20°C, con una vida útil mínima de 12 meses.

Control de calidad:

Este producto ha sufrido pruebas de calidad y está libre de actividad de endonucleasa, actividad de exonucleasa, y contaminación por ribonucleasa. El ADN genómico del huésped residual está debajo 10 copias.

Uso de productos:

Amplificación de ADN utilizando el método de PCR; Determinación de la secuencia de ADN.

Instrucciones de uso:

• Permita todas las soluciones de reacción de PCR requeridas para equilibrarse a la temperatura ambiente hasta que se disuelva completamente. Mezcle bien las soluciones y configure el sistema de reacción de PCR en hielo.
• Se recomienda configurar el sistema de reacción de PCR en un baño de hielo o en un enfriador, Siguiendo el sistema de reacción recomendado como referencia.
• Pipeta a fondo y mezcle el sistema de reacción preparado con una pipeta, Selle los tubos de PCR con tapas, etiquetarlos apropiadamente, y centrifugarse brevemente a temperatura ambiente.
• Coloque los tubos de PCR preparados en el máquina de PCR, Establecer las condiciones de reacción, e iniciar la reacción de PCR.

Sistema de reacción recomendado:

Condiciones de reacción:

En circunstancias normales, Se puede usar un método de dos pasos para la reacción. Si la amplificación de dos pasos no es satisfactoria, Se puede emplear un método de tres pasos para configurar el programa de reacción de PCR. Teniendo en cuenta la incertidumbre de la abundancia de genes objetivo en las plantillas de ADNc, Se recomienda usar 35-38 ciclos para la amplificación inicial y ajuste el número de ciclos en función de los resultados de la amplificación.

Nota: Las condiciones de reacción se pueden ajustar y optimizar de acuerdo con los requisitos reales.

Precauciones:

1. El tiempo de extensión se puede ajustar según factores como la longitud y el contenido de GC del producto PCR. El tiempo de extensión por kb del producto está estrechamente relacionado con la complejidad de la plantilla: Las plantillas simples requieren 20 segundos, Las plantillas típicas requieren 30 segundos, y las plantillas complejas requieren 1 minuto.
2. La configuración de la reacción de PCR debe adaptarse a diferentes condiciones, como la plantilla., cebadores, Longitud del producto PCR, y contenido de GC. La concentración final de cebadores generalmente cae dentro del rango de 0.2-1.0 μm. La concentración de la plantilla de ADN se puede ajustar en consecuencia. Para plantillas complejas o alto contenido de GC, Se recomienda prolongar los tiempos de denaturación/desnaturalización o extensión y aumentar las temperaturas de desnaturalización/recocido.
3. Use áreas y pipetas designados antes y después de la amplificación, usar guantes, y cámbalos con frecuencia. Después de completar la reacción de PCR, No abra los tubos de reacción inmediatamente. Permita que se enfríen lo suficiente a 4 ° C o -20 ° C antes de abrir para minimizar el riesgo de contaminación del producto de PCR al entorno de laboratorio.

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