Solarbio BCA 蛋白質檢測試劑盒

建設局 (二辛可寧酸) 蛋白質檢測試劑盒是一種廣泛使用的定量樣本中蛋白質濃度的方法. 該測定依賴銅的比色檢測(二) 鹼性條件下被蛋白質還原的離子. 產生的紫色的強度與蛋白質濃度成正比, 允許精確量化.

這是有關如何使用的一般指南 BCA蛋白 檢測試劑盒:

所需材料:

1. BCA 蛋白檢測試劑盒
2. 蛋白質樣品 (標準溶液或未知樣品)
3. 微孔板或比色皿
4. 微量移液管和吸頭
5. 酶標儀或分光光度計
6. 蒸餾水

程式:

1. 蛋白質標準品的製備:
   • 製備一系列已知濃度的蛋白質標準品. 這些標準品將用於建立定量標準曲線.
2. 樣品的製備:
   • 將蛋白質樣本稀釋至標準範圍內的濃度. 重要的是讓樣品處於檢測的線性範圍內以進行準確的定量.
3. BCA工作試劑的製備:
   • 混合 BCA 試劑 A (二辛可寧酸溶液) 和 BCA 試劑 B (銅(二) 硫酸鹽溶液) 在一個 50:1 比率. 確保充分混合.
4. 孵:
   • 將 BCA 工作試劑加入您的標準品和樣本中, 然後將反應混合物在適當的溫度下孵育 (一般為37°C) 為了 30 分分鐘. 在這段時間, 樣本中的蛋白質會減少銅離子, 形成紫色複合物.
5. 測量:
   • 孵化後, 測量每個孔在大約波長的吸光度 562 nm 使用酶標儀或分光光度計. 吸光度與蛋白質濃度成正比.
6. 標準曲線的製作:
   • 根據已知濃度繪製標準品的吸光度值以建立標準曲線. 此曲線將用於確定未知樣本的蛋白質濃度.
7. 未知樣品的定量:
   • 測量未知樣品的吸光度並使用標準曲線確定其蛋白質濃度.
8. 數據分析:
   • 根據標準曲線計算蛋白質濃度. 大多數酶標儀都有可以自動執行此過程的軟體.
9. 結果:
   • 以適當的單位報告樣本的蛋白質濃度 (例如, 毫克/毫升) 基於 BCA 測定.

請務必遵循 BCA 蛋白質檢測試劑盒製造商提供的具體說明, 因為不同試劑盒的具體方案可能有所不同. 另外, 確保所有試劑均妥善儲存, 並且在建議的條件下進行測定以獲得準確可靠的結果.

BCA蛋白檢測試劑盒是基於蛋白質將Cu2+還原為Cu+以及BCA在鹼性條件下與Cu1+形成紫藍色複合物的原理, 然後在562nm處檢測吸光度並與標準曲線比較來定量蛋白質.