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乙型肝炎病毒核酸檢測試劑盒 (PCR-螢光探針法) 用於研究

原價是: $258.00.目前的價格是: $240.00.

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  • 製造商: 中國領導品牌
  • 船運: 直接從工廠加急聯邦快遞發貨
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  • 支付方式: 安全的 PayPal 或信用卡.

描述

產品名稱乙型肝炎病毒核酸檢測試劑盒 (聚合酶鍊式反應-螢光探針法)

包裝規格48 測試/套件

有可能的使用

  • 該試劑盒用於B型肝炎病毒的定量測定 (B型肝炎病毒) 核酸 (脫氧核糖核酸) 血清或血漿樣本中.
  • 它適用於需要檢測乙型肝炎病毒感染的患者以及接受乙型肝炎抗病毒治療的患者.
  • 旨在透過追蹤患者血液中的 HBV DNA 水平來監測抗病毒治療的反應並評估治療效果.
  • 然而, 此測試不應僅作為患者病情的指標.
  • 它必須與臨床表現和其他實驗室檢查一起使用,以評估患者的整體狀況.
  • 此試劑盒不適用於 HBV 血液篩檢目的.

測試原理

  • 本試劑盒採用構象磁珠在標準 PCR 擴增管中裂解純化病毒核酸.
  • 然後將PCR擴增試劑直接加入同一管中, 讓珠子直接參與螢光定量PCR反應.
  • 使用 TaqMan 探針技術, 其中5’→3′ Taq DNA 聚合酶的核酸外切酶活性在 PCR 過程中降解 TaqMan 探針.
  • 這種降解將螢光報告基團與猝滅基團分開, 產生螢光訊號.
  • 即時螢光PCR檢測系統即時擷取此訊號, 能夠定量測定樣本中的病毒含量.
  • 含有滅活乙型肝炎病毒的臨床血清樣本用作試劑盒的校正品和品質控管.
  • 此試劑盒透過檢測內標來監測樣本中的 PCR 抑制劑, 降低假陰性的風險.

成分

乙型肝炎病毒核酸檢測試劑盒 (PCR-螢光探針法) 用於研究
他會是
數位
產品構成 主要成分尺寸和數量
DLB核酸萃取試劑使用磁珠裂解 HBV 產物)氫氧化鈉, 特尼斯基地, 特拉通X-00.共形磁珠 5.5毫升× 1 瓶子
數位寬頻B型肝炎病毒沖洗液氯化鉀, 海衛一 X-100 15.0毫升×升瓶
1PCR擴增陽離子試劑HBV PCR反應溶液引子, 探針, 去氧核糖核苷三磷酸, 鎂離子PCR1.10毫升× 2 管
2乙肝病毒酶混合物DNA聚合酶與尿嘧啶糖基化酶 110微升x 1 管子
3校準
產品
乙型肝炎病毒校正品①(10-3.0)×10*IUVml恆定值 HBV 陽性血清樣本
(失活的)
0.35 毫升× 1 管子
4B型肝炎病毒校正品②(1.0-3.0)×l0IUVml恆定值 HBV 陽性血清樣本
(失活的)
0.35 毫升 x I 管
5HBV 校準品 ③(1.0-3.0)×10*IU/ml恆定值 HBV 陽性血清樣本
(失活的)
0.35 毫升 x 公升管
6HBV 校準品 ④(1.0-3.0)×10 I/ml恆定值 HBV 陽性血清樣本 (失活的)0.35 毫升× 1 管子
7品質控制產品乙型肝炎病毒強陽性C(10-5.0110)×10 I/mlBV陽性混合血清樣本 (失活的)0.35 毫升 x 公升管
8HBV 關鍵陽性品質控制 (10-100)國際單位BV陽性混合血清樣本 (失活的)0.35 毫升 x I 管
9HBV 陰性品質控制HBV 陰性混合血清檢體 (失活的)0.35 毫升 x I 管
10
標籤
乙肝病毒內部標籤內標核酸模板60µl x l 管

筆記: A. 校準品的參數存在批間差異 強陽性 QC 和臨界陽性 QC 的固定值 (均在上述範圍內). 詳情, 請參閱套件隨附的說明書.

  1. 請勿混合不同套件批次的組件!
  2. 帶上您的測試物品: 0.2ml PCR反應管, 離心機, 各種尺寸的移液管和吸頭, 和 磁力架, 並使用我們推薦的磁性支架.

儲存條件和有效期限

  • 核酸萃取試劑盒, 常溫運輸,2-8°C保存.
  • PCR擴增試劑盒, 運輸時不得高於 10 ℃, 儲存於 -20 ℃ ± 5 °C 避光, 避免
  • 反覆凍融 (不多於 3 次).
  • 到期日: 該套件的有效期限為 12 月, 請在有效期限內使用. 生產日期和有效期限詳情請參閱標籤.

適用的 儀器

與 LightCycler® 搭配使用 480, SLA-96P, MX3005P, 和ABI7500實時螢光PCR儀.

樣品請求

  1. 適用樣品類型: 血清或血漿
  2. 樣本採集: 此試劑盒適用於血清或血漿樣本.

血清樣本: 5 使用無菌注射器從受試者採集ml靜脈血,並在室溫下置於無菌離心管中不超過 6 小時並自行沉澱, 或直接1600g離心 5 分鐘和上清液 (注意不要吸出紅血球) 轉移至無菌離心管中.

血漿樣本: 2 毫升或 5 使用無菌注射器從受試者採集 ml 靜脈血, 注入含有 EDTA 抗凝血劑的無菌收集管中, 混合的, 並在室溫下放置不超過 6 小時讓樣品自行沉澱, 或直接1600g離心 5 分鐘分離血漿並轉移至無菌離心管中.

  1. 貯存: 待測樣本經過上述處理後即可立即用於檢測, 如不及時應冷凍保存於-20℃以下,避免反覆凍融.
  1. 運輸: 樣品應使用裝有冰塊的泡棉箱或冰壺運輸, 處於冷凍密封狀態.

測試方法

(我) 試劑準備 (試劑準備區)

HBV裂解物的製備:

  1. 充分混合 HBV 裂解物 (DLB) 含有磁珠的.
  2. 取出各種試劑成分並使其平衡至室溫, 避光.
  3. 將 HBV 裂解液和 HBV 內標物以以下比例混合 100 微升/人 + 1.0 微升/人, 並充分混合.
  4. 立即將混合物分裝至 PCR 擴增管中 (0.2 毫升單管, 0.2 毫升八位管, 或 96 孔 PCR 板) 在 100 微升/孔, 確保 HBV 裂解物位於管底.

PCR 擴增試劑製備:

  • 配置時間: 將核酸萃取管放入磁力架後進行試劑製備.
  • 準備: 根據待測試樣品, 準備 HBV 陰性品質控制, HBV 關鍵陽性品質控制, HBV強陽性品管, 和 HBV 校準品.
  • 對於①至④的數量, 取相應量的HBV PCR反應液和HBV酵素混合物, 並根據混合 (HBV PCR反應液 43.0 微升/人 + 乙肝病毒酶混合物 (2.0 微升/人)), 充分混合形成 PCR-Mix 以便立即使用.

(二) 核酸純化 (樣品處理區)

  1. 添加 100 µl 待測樣本或 HBV 陰性質控, HBV 關鍵陽性品質控制, HBV強陽性品管, 將 HBV 校準品 ① 至 ④ 加入已分配 HBV 裂解物的 PCR 管中; 透過吹氣輕輕混合 3 到 5 次; 置於室溫下 5 到 10 分分鐘.
  2. 將 PCR 管轉移到磁力架上, 為____離開 2-3 分分鐘, 並使用移液管或負壓裝置吸出上清液, 注意不要去除磁珠.
  3. 將 PCR 管放在磁力架上, 添加 250 µl HBV 沖洗液 (數位寬頻) 到每口井, 為____離開 2 分鐘並使用移液管或負壓裝置吸出上清液, 注意不要留下任何殘留物.

擴增試劑添加 (樣品處理區)

  • 添加 45.0 μl PCR-Mix 加入到每個孔中.
  • 蓋上管子並將其倒置.
  • 輕輕彈開珠子,確保 PCR-Mix 與珠子充分混合.
  • 立即水平離心管.
  • 將PCR管轉移至檢測區域.
  • 將其置於螢光PCR儀上進行檢測.

PCR擴增 (檢測區域)

將 PCR 反應管放入擴大機中, 設定 HBV 陰性對照, HBV強陽性對照, HBV 關鍵陽性對照, HBV校準品①至④及待測樣品依相應順序排列, 並設定樣品名稱和校準品濃度.

擴增程序設定.

以SLAN-96P為例 (LightCycler® 480, SLA-96P 和 Mx3005P, ABI7500 具有相同的設置. 設定完成後, 儲存檔案並運行反應程序

取得結果

  1. 擴增曲線說明: 擴增曲線一般呈S形.
  2. 基線設定: 根據實驗情況而定, 應選擇螢光背景值穩定的切片作為基線設定範圍.
  3. 閾值設定: 剛好超過陰性質控擴增曲線的最高點.
  4. 結果分析: 設定基線和閾值線後, 結果可以分析.

選擇FAM通道取得待測樣品的結果和品質控制; 選擇 HEX 或 VIC 通道以獲得內標結果. (筆記: 詳細設定請參考不同儀器的說明書。)

參考值

該試劑盒的檢測下限和定量極限為 5 國際單位/毫升, 透過研究測試確定,目標Ct參考值≤40,內標Ct參考值≤40.

實驗有效性的判斷

  1. 校準品均為陽性且具有線性相關係數|r|≥0.980.
  2. 陰性質量對照應不可檢測,且內標 Ct 值 ≤ 40.
  3. 強陽性對照具有 Ct 值 <25 和量化範圍 (1.0-5.0) X 105 國際單位/毫升 臨界陽性對照具有 Ct 值 <38 和量化範圍 (10- 100) 國際單位/毫升. 同一實驗中必須滿足上述要求, 否則, 測試結果被視為無效,必須重新測試.

測試結果的解釋

  1. 如果樣本結果是 5-2.0 X 109 IU/ml,擴增曲線呈S形, 而樣品Ct值≤40,內標Ct值≤40, 判定結果有效,可直接報告正值及對應的濃度值.
  2. 如果樣本結果是 >2.0 X 109 IU/ml,擴增曲線呈S形, 例子 Ct值≤40, 內標Ct值≤40, 可直接報告為 HBV DNA >2.0 X 109 國際單位/毫升. 如果需要精確量化, 樣品可以稀釋至以下 2.0 X 109 IU/ml 並重新測試
  3. 如果樣本結果是 HBV DNA <5國際單位/毫升, 樣品Ct值≤40,內標Ct值≤40, 結果報告為 HBV DNA 濃度低於試劑盒檢測下限; 如果內標異常 (CT >40 或沒有值), 樣品結果無效,應查找原因並排除,重新取樣 (如果重複測試結果仍然無效, 請聯絡我們). (如果重複測試結果仍然無效, 請聯絡我們).

附加資訊

重量0.65 公斤
尺寸

50時間

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