ภาพรวมผลิตภัณฑ์:
ไดไทโอไทรทอล (ดีทีที) เป็นรีเอเจนต์ที่ใช้ในการลดพันธะโปรตีน S-S. ในการวิจัยทางชีวเคมี, มันเป็นตัวแทนป้องกัน thiol, เฉพาะเจาะจง เอนไซม์ สารยับยั้ง, และใช้ในการวัดกิจกรรมของเอนไซม์. นอกจากนี้ยังใช้ในการเตรียม SDS-PAGE บัฟเฟอร์ตัวอย่าง.
การตระเตรียม:
ละลาย 3.09G DTT ในสารละลายโซเดียมอะซิเตต 20ml 0.01mol/L (Ph5.2), กรองและฆ่าเชื้อ, จากนั้นลงไปในขวด 1 มล. และเก็บที่ -20 ℃.
หมายเลข CAS:
รูปร่าง:
เข็มสีขาวหรือเม็ดสีขาว
ความบริสุทธิ์:
≥99%
เงื่อนไขการจัดเก็บ Dithiothreitol:
2-8℃
อายุการเก็บรักษา:
สี่ปี
dithiothreitol คืออะไร (ดีทีที)?
ไดไทโอไทรทอล (ดีทีที) เป็นโมเลกุลขนาดเล็กที่สามารถลดสารเคมีด้วยสูตรเคมี C4H10OS2.
มันเป็นโมเลกุลเชิงเส้นในสถานะที่ลดลงและกลายเป็นโครงสร้างวงแหวนหกสมาชิกที่มีพันธะซัลไฟด์หลังจากออกซิเดชั่น.
ชื่อ dithiothreitol มาจาก erythritol (น้ำตาลสี่คาร์บอน). ไอโซเมอร์ของ DTT คือ dithioerythritol (ดีทีอี), ซึ่งเป็น C3-Epimer ของ DTT.
สิ่งที่ควร คุณรู้เกี่ยวกับ ไดไทโอไทรทอล พื้นที่จัดเก็บ?
เงื่อนไขการจัดเก็บทั่วไปสำหรับผง DTT ควรเก็บไว้ที่ -20 ℃. 1สามารถเก็บโซลูชัน M DTT ได้ที่ -20 ℃มากกว่ามากกว่า 2 ปี.
DTT ค่อนข้างไม่เสถียรเนื่องจากการเกิดออกซิเดชันง่ายทางอากาศ, อย่างไรก็ตาม, อายุการเก็บรักษาสามารถขยายได้โดยการแช่แข็งหรือจัดการภายใต้ก๊าซเฉื่อย.
เนื่องจากนิวเคลียสของซัลเฟอร์โปรตอนต่ำจึงต่ำกว่า, พลังการลดที่มีประสิทธิภาพของ DTT ยังลดลงเมื่อลดค่า pH; ทริส(2-carboxyethyl)ฟอสฟอรัส HCL (TCEP Hydrochloride) สามารถใช้เป็นทางเลือกแทน DTT ภายใต้เงื่อนไข pH ต่ำ, และมันก็มีเสถียรภาพมากกว่า DTT.
อะไรคือ แอปพลิเคชัน ของ DTT?
- มันถูกใช้เป็นตัวแทนลดและ deprotection สำหรับ DNA thiolated. อะตอมซัลเฟอร์เทอร์มินัลเทอร์มินัล thiolated มีแนวโน้มที่จะสร้าง dimers ในสารละลาย, โดยเฉพาะอย่างยิ่งในที่ที่มีออกซิเจน. การลดขนาดนี้ช่วยลดประสิทธิภาพของการทดลองปฏิกิริยาการมีเพศสัมพันธ์อย่างมาก (เช่นการตรึง DNA ในไบโอเซนเซอร์). การเพิ่ม DTT ลงในสารละลาย DNA และลบออกหลังจากช่วงเวลาของการทำปฏิกิริยาสามารถลดการลดขนาดของ DNA.
- ใช้เพื่อลดพันธะซัลไฟด์ในโปรตีน. สามารถใช้เพื่อป้องกันการก่อตัวของพันธะซัลไฟด์ intramolecular หรือ intermolecular ระหว่าง cysteine ตกค้างในโปรตีน. อย่างไรก็ตาม, DTT โดยทั่วไปไม่สามารถลดพันธะซัลไฟด์ที่ฝังอยู่ในโครงสร้างโปรตีน (ไม่สามารถเข้าถึงตัวทำละลายได้). การลดลงของพันธบัตรซัลไฟด์ดังกล่าวมักจะต้องมีการสูญเสียโปรตีน (การให้ความร้อนที่อุณหภูมิสูงหรือเพิ่ม denaturants เช่น 6m กัวนิดีน ไฮโดรคลอไรด์, 8m urea, หรือ 1% เอกสารความปลอดภัย).
ในทางกลับกัน, ความลึกของการฝังสามารถกำหนดได้ตามความแตกต่างของอัตราการลดพันธบัตรซัลไฟด์ในการปรากฏตัวของ DTT.
ทำไม ดีทีที เป็นคนที่แข็งแกร่ง การลดลง ตัวแทน?
DTT เป็นตัวแทนลดที่แข็งแกร่งมาก, และพลังงานที่ลดลงนั้นส่วนใหญ่เกิดจากความเสถียรของโครงสร้างของวงแหวนหกสมาชิกที่ถูกออกซิไดซ์ (มีพันธบัตรซัลไฟด์).
ที่ pH 7, ศักยภาพรีดอกซ์ของมันคือ -0.33 โวลต์.
ในหมู่พวกเขา, สถานะกลางที่เกิดขึ้นในปฏิกิริยาไม่เสถียรมาก, เพราะกลุ่ม thiol ที่สองใน DTT มีแนวโน้มที่จะรวมกับอะตอมกำมะถันออกซิไดซ์, ดังนั้นสถานะระดับกลางจะเปลี่ยนเป็นโครงสร้างออกซิไดซ์แบบวงจรของ DTT ได้อย่างรวดเร็ว, จึงเสร็จสิ้นการลดพันธบัตรซัลไฟด์.
ความสามารถในการลด DTT ได้รับผลกระทบจากค่า pH และทำงานเฉพาะเมื่อค่า pH มากกว่ามากกว่า 7. นี่เป็นเพราะมีเพียงไอออน thiolate deprotonated (-s-) เป็นปฏิกิริยา, ในขณะที่ thiol (-SH) ไม่มีปฏิกิริยา; PKA ของ Mercaptan มักจะเกี่ยวกับ 8.3.
อันตรายของ DTT ต่อร่างกายมนุษย์คืออะไร?
ไดไทโอไทรทอล (ดีทีที) เป็นโมเลกุลขนาดเล็กอินทรีย์ลดสารที่ปล่อยกลิ่นที่ไม่พึงประสงค์. อาจเป็นอันตรายต่อสุขภาพหากสูดดม, กลืน, หรือดูดซึมผ่านผิวหนัง. การสัมผัสกับ DTT อาจทำให้เกิดปัญหาสุขภาพหลายประการ, รวมทั้ง:
- การระคายเคืองผิวหนังและดวงตา: DTT สามารถระคายเคืองผิวและดวงตาเมื่อสัมผัส. อาการอาจรวมถึงรอยแดง, ที่มีอาการคัน, การเผา, และการรดน้ำตา.
- การระคายเคืองระบบทางเดินหายใจ: การสูดดมฝุ่น DTT หรือหมอกอาจทำให้ระคายเคืองระบบทางเดินหายใจ, ทำให้เกิดอาการไอ, จาม, หายใจถี่, และหายใจดังเสียงฮืด ๆ.
- การทำให้ไวต่อผิวหนัง: การสัมผัสกับ DTT เป็นเวลานานหรือซ้ำ ๆ อาจนำไปสู่การแพ้ผิวหนัง, ที่ซึ่งผิวจะไวต่อ DTT, ทำให้เกิดอาการแพ้เมื่อสัมผัสเพิ่มเติม. สิ่งนี้สามารถปรากฏเป็นผื่น, แผลพุพอง, หรือบวม.
ข้อควรระวังด้านความปลอดภัย:
-
- สวมถุงมือและการป้องกันดวงตาเมื่อจัดการ DTT, โดยเฉพาะอย่างยิ่งในรูปแบบที่เป็นของแข็งหรือมีความเข้มข้นสูง.
- ทำงานในฮูดควันที่มีการระบายอากาศอย่างดีเพื่อหลีกเลี่ยงการสูดดม.
- หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนังและดวงตา.
- ล้างมือให้สะอาดหลังจากจัดการ DTT.
- กำจัดขยะ DTT ตามกฎระเบียบในท้องถิ่น.
บทสรุป
DTT เป็นเครื่องมือที่มีค่าในการวิจัยทางชีวภาพ, แต่เป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องจัดการด้วยความระมัดระวังเพื่อหลีกเลี่ยงอันตรายต่อสุขภาพที่อาจเกิดขึ้น. โดยทำตามข้อควรระวังด้านความปลอดภัยที่แนะนำ, คุณสามารถลดความเสี่ยงที่เกี่ยวข้องกับการใช้ DTT.
