Ikhtisar Produk:
Dithiothreitol (DTT) adalah reagen yang digunakan untuk mengurangi ikatan protein S-s. Dalam penelitian biokimia, itu adalah agen pelindung tiol, spesifik enzim inhibitor, dan digunakan untuk mengukur aktivitas enzim. Itu juga digunakan dalam persiapan SDS-PAGE sampel buffer.
Persiapan:
Larutkan 3,09g DTT dalam larutan 20ml 0,01mol/L natrium asetat (Ph5.2), filter dan sterilisasi, Kemudian alikuot menjadi botol 1ml dan simpan di -20 ℃.
Nomor CAS:
Penampilan:
Jarum putih atau granular putih
Kemurnian:
≥99%
Kondisi penyimpanan Dithiothreitol:
2-8℃
Umur simpan:
Empat tahun
Apa itu Dithiothreitol (DTT)?
Dithiothreitol (DTT) adalah molekul kecil organik yang dapat mengurangi agen dengan formula kimia C4H10O2S2.
Ini adalah molekul linier dalam keadaan tereduksi dan menjadi struktur cincin beranggota enam yang mengandung ikatan disulfida setelah oksidasi.
Nama Dithiothreitol berasal dari eritritol (gula empat karbon). Isomer DTT adalah Dithioerythritol (DTE), yang merupakan C3-Epimer dari DTT.
Apa yang seharusnya Anda tahu tentang Dithiothreitol penyimpanan?
Kondisi penyimpanan umum untuk bubuk DTT harus disimpan di -20 ℃. 1Solusi M DTT dapat disimpan di -20 ℃ untuk lebih dari 2 bertahun-tahun.
DTT relatif tidak stabil karena oksidasi mudah melalui udara, Namun, umur simpannya dapat diperpanjang dengan membekukan atau menangani di bawah gas lembam.
Karena nukleofilisitas belerang terprotonasi lebih rendah, Kekuatan pengurangan DTT yang efektif juga berkurang dengan penurunan pH; Tris(2-carboxyethyl)hcl fosfin (TCEP hidroklorida) dapat digunakan sebagai alternatif untuk DTT dalam kondisi pH rendah, dan itu juga lebih stabil dari DTT.
Apa itu aplikasi dari dtt?
- Ini digunakan sebagai agen pereduksi dan deproteksi untuk DNA tiolasi. Atom sulfur terminal DNA tiolasi cenderung membentuk dimer dalam larutan, terutama di hadapan oksigen. Dimerisasi ini sangat mengurangi efisiensi percobaan reaksi kopling tertentu (seperti imobilisasi DNA dalam biosensor). Menambahkan DTT ke solusi DNA dan menghapusnya setelah periode reaksi dapat mengurangi dimerisasi DNA.
- Ini digunakan untuk mengurangi ikatan disulfida dalam protein. Ini dapat digunakan untuk mencegah pembentukan ikatan disulfida intramolekul atau antarmolekul antara residu sistein dalam protein. Namun, DTT umumnya tidak dapat mengurangi ikatan disulfida yang tertanam dalam struktur protein (tidak dapat diakses untuk pelarut). Pengurangan ikatan disulfida tersebut biasanya membutuhkan denaturasi protein (pemanasan pada suhu tinggi atau menambahkan denaturants seperti 6m guanidin hidroklorida, 8M urea, atau 1% SDS).
Sebaliknya, Kedalaman embedding dapat ditentukan berdasarkan perbedaan dalam laju pengurangan ikatan disulfida dengan adanya DTT.
Mengapa DTT adalah yang kuat mengurangi agen?
DTT adalah agen pereduksi yang sangat kuat, dan kekuatan pereduksi sebagian besar disebabkan oleh stabilitas konformasi cincin beranggotakan enam yang teroksidasi (mengandung ikatan disulfida).
Di ph 7, Potensi redoksnya adalah -0.33 Volt.
Di antara mereka, Keadaan perantara yang terbentuk dalam reaksi sangat tidak stabil, Karena kelompok tiol kedua pada DTT cenderung bergabung dengan atom sulfur teroksidasi, Jadi keadaan menengah dengan cepat berubah menjadi struktur siklik teroksidasi dari DTT, dengan demikian menyelesaikan pengurangan ikatan disulfida.
Kemampuan pereduksi DTT dipengaruhi oleh pH dan hanya bekerja ketika pH lebih besar dari 7. Ini karena hanya anion tiolat yang terdeprotonasi (-S-) reaktif, sementara tiol (-Sh) tidak reaktif; PKA Mercaptan biasanya tentang 8.3.
Apa bahaya DTT pada tubuh manusia?
Dithiothreitol (DTT) adalah zat pereduksi organik molekul kecil yang memancarkan bau yang tidak menyenangkan. Ini bisa berbahaya bagi kesehatan jika dihirup, tertelan, atau diserap melalui kulit. Paparan DTT dapat menyebabkan beberapa masalah kesehatan, termasuk:
- Iritasi kulit dan mata: DTT dapat mengiritasi kulit dan mata pada kontak. Gejala mungkin termasuk kemerahan, gatal, pembakaran, dan menyiram mata.
- Iritasi pernapasan: Menghirup debu atau kabut DTT dapat mengiritasi saluran pernapasan, menyebabkan batuk, bersin, sesak napas, dan mengi.
- Sensitisasi kulit: Paparan DTT yang berkepanjangan atau berulang dapat menyebabkan sensitisasi kulit, dimana kulit menjadi hipersensitif terhadap DTT, menyebabkan reaksi alergi pada kontak lebih lanjut. Ini bisa terwujud sebagai ruam, lepuh, atau pembengkakan.
Tindakan pencegahan keselamatan:
-
- Kenakan sarung tangan dan pelindung mata saat menangani DTT, terutama dalam bentuk padat atau konsentrasi tinggi.
- Bekerja di kap asap berventilasi baik untuk menghindari inhalasi.
- Hindari kontak dengan kulit dan mata.
- Cuci tangan secara menyeluruh setelah menangani DTT.
- Membuang limbah DTT sesuai dengan peraturan lokal.
Kesimpulan
DTT adalah alat yang berharga dalam penelitian biologis, tetapi penting untuk menanganinya dengan hati -hati untuk menghindari potensi bahaya kesehatan. Dengan mengikuti tindakan pencegahan keselamatan yang disarankan, Anda dapat meminimalkan risiko yang terkait dengan penggunaan DTT.
