โซลาร์บิโอ มาลอนไดอัลดีไฮด์ (ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ) ชุดทดสอบเนื้อหา

มาลอนไดอัลดีไฮด์ (ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ) ชุดทดสอบเนื้อหา

บันทึก: มีความจำเป็นต้องคาดการณ์ 2-3 ตัวอย่างที่แตกต่างกันมากก่อนการพิจารณาอย่างเป็นทางการ. อุปกรณ์การดำเนินงาน: สเปกโตรโฟโตมิเตอร์.

หมายเลขแมว: BC0020

ขนาด: 50ที/48ส

ส่วนประกอบ:

บันทึก: โซลูชันการทำงานสำหรับการตรวจจับ MDA นั้นละลายได้ยาก, ซึ่งสามารถให้ความร้อนได้ที่ 70 ℃ และสั่นสะเทือนอย่างรุนแรงเพื่อส่งเสริมการละลาย. หรือโดยการรักษาด้วยอัลตราโซนิกเพื่อส่งเสริมการละลาย.

รายละเอียดสินค้า:

• ลิพิดเปอร์ออกไซด์เกิดขึ้นจากปฏิกิริยาระหว่างอนุมูลอิสระกับกรดไขมันไม่อิ่มตัว, ในที่สุดก็กลายเป็นสารประกอบ เช่น มาลอนไดอัลดีไฮด์ (ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ). ระดับของการเกิดออกซิเดชันของไขมันทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้, ซึ่งสามารถประเมินได้โดยการวัดระดับ MDA.
• ภายใต้สภาวะที่เป็นกรดและอุณหภูมิสูง, สารประกอบสีน้ำตาลแดง, 3,5,5-เมทิลซัลฟาเมทอกซาโซล-2,4-สองคีโตนสามตัว, ถูกสังเคราะห์ผ่านปฏิกิริยาควบแน่นระหว่าง MDA และกรดไทโอบาร์บิทูริก (จะแจ้งภายหลัง). สารประกอบนี้แสดงการดูดซึมสูงสุดที่ 532 นาโนเมตร. การประเมินการเกิดออกซิเดชันของไขมันเกี่ยวข้องกับการวิเคราะห์สี. อย่างไรก็ตาม, การมีน้ำตาลที่ละลายน้ำได้อาจรบกวนกระบวนการตรวจจับได้. ปฏิกิริยาของน้ำตาลที่ละลายน้ำได้กับ TBA ทำให้เกิดปฏิกิริยาสีโดยมีความยาวคลื่นในการดูดกลืนที่ 450 นาโนเมตรและ 532 นาโนเมตร. ในชุดตรวจนี้, ปริมาณ MDA ถูกกำหนดโดยความแปรปรวนในการดูดกลืนแสงที่ 532 นาโนเมตร, 450 นาโนเมตร, และ 600 นาโนเมตร.
• เนื่องจากการมีอยู่ของซูโครสในเนื้อเยื่อพืชและกลูโคสในเนื้อเยื่อของสัตว์, ชุดนี้ประกอบด้วยสูตรคำนวณสองสูตรที่ออกแบบมาสำหรับซูโครสและกลูโคสโดยเฉพาะ. สูตรเหล่านี้เหมาะสำหรับการประเมินไขมัน.

รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:

สเปกโตรโฟโตมิเตอร์, อ่างอาบน้ำ, เครื่องหมุนเหวี่ยงบนโต๊ะ, ปิเปตโอน,1 คิวเวตต์แก้วขนาดมล, ปูน/โฮโมจีไนเซอร์, น้ำแข็งและน้ำกลั่น.

ขั้นตอน:

ฉัน. การจัดเตรียมตัวอย่าง:

แบคทีเรียหรือเซลล์:

รวบรวมแบคทีเรียหรือเซลล์ลงในหลอดหมุนเหวี่ยง. 5 สามารถผสมแบคทีเรียหรือเซลล์นับล้านได้ 1 มิลลิลิตรของรีเอเจนต์การสกัด. ใช้อัลตราโซนิกเพื่อแยกแบคทีเรียและเซลล์ (วางบนน้ำแข็ง, กำลังอัลตราโซนิก 200W, เวลาล้ำเสียง 3 วินาที, ช่วงเวลา 10 วินาที, ทำซ้ำเพื่อ 30 ครั้ง). เครื่องปั่นแยกที่ 8000 ×กรัม สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ℃ เพื่อขจัดวัสดุที่ไม่ละลายน้ำ, และนำส่วนเหนือตะกอนบนน้ำแข็งก่อนทำการทดสอบ.

เนื้อเยื่อ:

0.1 สามารถผสมเนื้อเยื่อกรัมได้ 1 รีเอเจนต์สำหรับการสกัด มล. และถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยสมบูรณ์บนอ่างน้ำแข็ง. จากนั้นปั่นแยกที่ 8000 ×กรัม สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ℃ เพื่อขจัดวัสดุที่ไม่ละลายน้ำ, และนำส่วนเหนือตะกอนไปบนน้ำแข็งก่อนทำการทดสอบ.

เซรั่ม:

ตรวจจับ

ครั้งที่สอง. การกำหนด ขั้นตอน:

1. เปิดเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ให้ร้อนนานกว่า 30 นาที, ตั้งค่าศูนย์ด้วยการกลั่น
2. เพิ่มรีเอเจนต์ตามรายการต่อไปนี้:

ส่วนผสมจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 100°C เป็นเวลา 60 นาที (ปิดสนิทเพื่อป้องกันการสูญเสียความชื้น), ระบายความร้อนด้วยน้ำแข็ง, และปั่นเหวี่ยงที่ 10000 ×กรัม สำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องเพื่อขจัดวัสดุที่ไม่ละลายน้ำ. เอาส่วนเหนือตะกอนเข้าไป 1 คิวเวตต์แก้วขนาดมล, และวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตร, 532 นาโนเมตรและ 600 นาโนเมตร.

∆A450=A450(ต)-A450(บี), ∆A532=A532(ต)-A532(บี), ∆A600 =A600(ต)-A600(บี). หลอดเปล่าต้องทดสอบครั้งหรือสองครั้ง.

สาม. การคำนวณ:

1. เนื้อเยื่อ, แบคทีเรียหรือเซลล์เพาะเลี้ยง

• ความเข้มข้นของโปรตีน:

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (โปรโตซัว nmol/mg)-(6.45×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)×วีอาร์วี۞(ซีพีอาร์×เทียบกับ)

=5×(6.45×(∆A532-∆A600)-1.29×∆A450)__ซีพีอาร์

• น้ำหนักตัวอย่าง:

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (น้ำหนักนาโนโมล/กรัม)-( 6.45×(∆A532-∆A600)- 1.29×∆A450)×วีอาร์วี۞(W × Vs ۞ Vsv)

=5×(6.45×(∆A532-∆A600)- 1.29×∆A450)۞W

• เซลลาเมาท์:

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (นาโนโมล/104เซลล์)-( 6.45 ×(∆A532-∆A600)- 1.29×A∆450)×วีอาร์วี۞(400×Vs۞Vsv)

=0.01×(6.45×(∆A532-∆A600)- 1.29×∆A450)

• เซรั่ม:

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (นาโนโมล/มล)-(6.45×(∆A532 - ∆A600)-1.29×∆A450)×Vrv۞Vs

=5×(6.45×(∆A532 - ∆A600)-1.29×∆A450)

2. เนื้อเยื่อพืช:

• น้ำหนักตัวอย่าง

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (น้ำหนักนาโนโมล/กรัม)- (6.45×(∆A532-∆A600)-0.56×∆A450)×วีอาร์วี۞(W × Vs ۞ Vsv)

=5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)- 0.56×∆A450)۞W

• ความเข้มข้นของโปรตีน:

ภาคตะวันออกเฉียงเหนือ (โปรโตซัว nmol/mg)-( 6.45 ×(∆A532-∆A600)- 0.56×∆A450)×วีอาร์วี۞(ซีพีอาร์×เทียบกับ)

=5×(6.45 ×(∆A532-∆A600)- 0.56×∆A450)__ซีพีอาร์

เชือก: ปริมาตรปฏิกิริยาทั้งหมด, 1 มล; เทียบกับ: ปริมาณตัวอย่าง, 0.2 มล;

เทียบกับ: ปริมาณการสกัด, 1 มล;

ซีพีอาร์: ตัวอย่างความเข้มข้นของโปรตีน, มก./มล; ว: น้ำหนักตัวอย่าง, ก;

400: จำนวนแบคทีเรียและเซลล์ทั้งหมด, 5 ล้าน.

บันทึก:

หากพบว่าค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างต่ำเกินไป, สามารถปรับเวลาอาบน้ำเดือดได้จาก 60 นาทีถึง 90 นาทีหรือนานกว่านั้น. การตรวจจับ MDA ในการทดลองเดียวกันจะต้องขยายออกไปในเวลาเดียวกันเพื่อหลีกเลี่ยงข้อผิดพลาด.

อ้างอิง

• สปิตซ์ ดี.อาร์, โอเบอร์ลีย์ แอล ดับเบิลยู. การทดสอบฤทธิ์ของซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตสในเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม[เจ]. ชีวเคมีวิเคราะห์,1989
• มาซายาสุ เอ็ม, ฮิโรชิ วาย. วิธีตรวจวิเคราะห์กิจกรรมซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตสแบบง่ายสำหรับการใช้งานทางคลินิก[เจ]. คลินิกเคมี

สินค้าที่เกี่ยวข้อง:

BC3590/BC3595 ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) ชุดทดสอบเนื้อหา

BC1090/BC1095 แซนทีนออกซิเดส (XOD) ชุดทดสอบกิจกรรม

BC0690/BC0695 กลูโคสออกซิเดส (พระเจ้า) ชุดทดสอบกิจกรรม BC1270/BC1275 ชุดทดสอบปริมาณโปรตีนคาร์บอนิล BC1280/BC1285 ไดเอมีนออกซิเดส (ดีเอโอ) ชุดทดสอบกิจกรรม BC1290/BC1295 ชุดทดสอบปริมาณไอออนของซูเปอร์ออกไซด์

ลูกค้า’ บทวิจารณ์ผลิตภัณฑ์ Solarbio สำหรับการอ้างอิง