Solarbio Общая антиоксидантная способность (Т-АОС) Набор для анализа

Общая антиоксидантная способность (Т-АОС) Набор для анализа

Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования..

Операционное оборудование: Спектрофотометр

Кот нет: BC1310

Размер：50Т/48С

Компоненты:

Экстракт раствора: Жидкость 50 мл×1. Хранение при 4℃, предварительный охлаждение перед использованием.

Реагент I: Жидкость 35 мл×1. Хранение при 4℃.

Реагент II: Жидкость 20 мл×1. Хранение в 4 ℃ в тени.

Реагент III: Жидкость 5 мл×1. Хранение в 4 ℃ в тени.

Стандартный: Порошок×1, 10 мг FESO4 · 7H2O. Рабочее решение: добавлять 0.9 мл дистиллированной воды и 20 мкл концентрированной серной кислоты (H2SO4) в формы 40 ММСМОЛ/МЛ Стандартный раствор FESO4. Раствор смеси (Подготовьтесь, когда будет использовано решение): Реагент I : Реагент II: Реагент III = 7:1:1, инкубировать при 37 ℃ перед использованием.

Описание продукта:

Этот комплект используется для обнаружения общих антиоксидантных уровней антиоксидантов и антиоксидантных ферментов в образцах. В основном используется при изучении биологического, Медицинские и фармацевтические исследования для обнаружения общей антиоксидантной способности антиоксидантных растворов.

В кислотной среде, Fe3+ -tptz сводится к синим Fe2+ -tptz. Цветовая реакция отражает общую антиоксидантную способность.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Спектрофотометр, Постоянная температурная водяная ванна, Низкая температура центрифуга, 1 ML Стеклянная кювета и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Базовые приготовления:

1. сыворотка, плазма, слюна, или образцы мочи

Плазма (антикоагуляция с гепарином или цитратом натрия, Избегайте использования EDTA), центрифуга в 5000 rpm/min для 10 мин, Возьмите супернатант для тестирования. Возьмите сыворотку, Образцы слюны или мочи для прямого определения. Также, Вы можете хранить по -80 ℃ и обнаружить в пределах 30 дни.

2. Клетки или ткань образец

Брать 1-2 миллион клеток или 0.1 г ткани, добавлять 1.0 мл раствора экстракта. Используйте гомогенат или ультразвук, чтобы полностью разбить клетки и высвобождать антиоксидант, центрифуга в 10000 r/min и 4 ℃ для 5 мин, Возьмите супернатант для тестирования. Измерьте концентрацию белка, если это необходимо.

II. Процедура определения:

1. Разбавить 40 мкмоль/мл стандартного раствора FESO4 для 0.1, 0.05, 0.025, 0.0125, 0.00625, 0.003125 мкмоль/мл, брать 500 мкл стандартного раствора (дистиллированная вода для пустого контроля), добавить в 500 мкл реагента II. Тщательно перемешать 10 мин, обнаружить поглощение в 593 нм, Рассчитайте ΔA = as-ab. (КАК: Стандартная трубка решения, АБ: пустая управляющая трубка.) Конечная концентрация Fe2+ является 0.05、0.025、0.0125、0.00625、

0.003125、0.00156 мкмоль/мл.

2. Разогрейте спектрофотометр 30 мин, отрегулировать длину волны, чтобы 593 NM и установить ноль с дистиллированным
3. Добавьте реагенты из следующего списка:

III. Расчет:

1. Создать стандартную кривую

Возьмите конечную концентрацию Fe2+ как ось X, △ A как ось Y., Создайте стандартную кривую, Получить уравнение линейной регрессии y = kx+ b, Возьмите ΔA’ в уравнение, чтобы получить x (мкмоль/мл).

2. Определение единицы измерения: Образец антиоксидантной способности указывается стандартной концентрацией ионов жидкости, необходимой для того же изменения поглощения(ΔА).

А. Белок концентрация:

Общая антиоксидантная способность (мкмоль/мг прот) = x × vrv ÷ (Против × cpr) = 34 × x ÷ cpr

Б. Образец масса

Общая антиоксидантная способность (мкмоль/г вес) = x × vrv ÷ (VS ÷ vsv × w) = 34 × x ÷ w

С. Клетка количество

Общая антиоксидантная способность (мкмоль/104cell) = x × vrv ÷ (Против × vsv ÷ n) = 34 × x ÷ n

Д. Решение объем

Общая антиоксидантная способность (мкмоль/мл) = x × vrv ÷ vs = 34 × x

Веревка: Общий объем реакции, 1.02 мл; Против: объем пробы, 0.03 мл;

Всв: объем добычи, 1 мл; Вт: Выборочный вес, г;

КПР: концентрация белка в образце, мг/мл;

н: Количество ячейки, единица на основе 104 (десять тысяч).

Примечание:

1. Реагент II раздражен человеческим телом, Пожалуйста, носите лабораторную одежду и латекс
2. Образцы не должны выглядеть голубыми в кислое состояние, или это будет помеховать примером результата
3. Моющее средство, такое как твина, Тритон, NP-40 и редактовы, такие как DTT, Mercapto этанол не должен быть добавлен в
4. Если значение поглощения, определяемое образцом, выходит за рамки стандартного диапазона кривой, образец должен быть разбавлен или сконцентрирован должным образом перед
5. Комплект должен быть магазин AT2-8 ℃.

Примеры:

1. Добавить 0,1 г, трилистник в 1 мл раствора экстракта и тщательно измельчите на льду, Возьмите супернатант, Следуйте процедуре определения для работы, с 96-луночными пластинками для расчета: ΔA = а(Т)-А(Б)= 0,909-0,148 = 0,761, Стандартная кривая: y = 21,056x-0.0087, Рассчитайте x = 0,037, в соответствии с массой образца для расчета общей антиоксидантной способности (мкмоль/г масса) = 34 × x ÷ w = 34 × 0,037 ÷ 0,1 = 12,85 мкмоль/г массы.

Рекомендации：

[1] Пеллегрини н, Серафини м, Сальваторе с, и другие. Общая антиоксидантная способность специй, сухофрукты, ореховой,

импульсы, зерновые, и сладости, потребляемые в Италии, оцениваемые тремя различными анализами in vitro[Дж]. Молекулярное питание & Продовольственные исследования, 2006, 50(11): 1030-1038.

сопутствующие товары:

BC1320/BC1325 Гидроксиловый радикал

BC1330/BC1335

BC1340/BC1345 Общий фенол растения (Тк)Набор для анализа

BC1350/BC1355 Plant Proanthocyanidins Kit