Щелочная фосфатаза тканей и крови Solarbio (ПСР/АЛП) Набор для анализа активности

Щелочная фосфатаза тканей и крови (ПСР/АЛП) Набор для анализа активности

Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования..

Операционное оборудование: Спектрофотометр

Номер каталога: BC2140

Размер: 50Т/24С

Компоненты:

Экстракционный реагент: Жидкость 30 мл×1 флакон, хранение при 4℃.

Реагент 1: Жидкость 10 мл×1 флакон, хранить при температуре 4 ℃ и защищать от света.

Реагент 2: Жидкость 10 мл×1 флакон, хранить при температуре 4 ℃ и защищать от света.

Реагент 3: Жидкость 30 мл×1 флакон, хранить при температуре 4 ℃ и защищать от света. Его нельзя использовать, если он станет сине-зеленым..

Стандартный: Жидкость 1 мл×1 флакон, 10 мкмоль/мл стандартный раствор фенола, хранение при 4℃. Разбавить дистиллированной водой до 2.5 мкмоль/мл перед применением.

Описание продукта:

AKP/ALP — цинксодержащая гликопротеаза., которые гидролизуют различные природные и синтетические моноэфиры фосфолипидов в щелочной среде.. ПСР / ЩФ широко распространены в органах человека., преимущественно в печени.

В щелочном состоянии, AKP/ALP катализирует гидролиз динатрийфенилфосфата до фенола., а фенол реагирует с 4-аминоантипирином и феррицианидом калия с образованием производного красного хинона., по которому можно определить поглощение при 510 нм. Активность AKP/ALP можно рассчитать путем измерения скорости увеличения поглощения при 510 нм.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Спектрофотометр, настольная центрифуга, трансфертер, 1 стеклянная кювета мл, лед и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Фермент подготовка:

Добавлять 1 мл Реагент для экстракции 0.1 г ткань, тщательно измельчить. Центрифуга при 4 ℃, 10000 об/мин для 10 минуты. Возьмите супернатант на льду для анализа.. Образец крови можно обнаружить напрямую. Разбавьте реагентом для экстракции, если концентрация высока..

II. Определение процедура:

1. Предварительно разогрейте спектрофотометр для 30 минуты, отрегулировать длину волны, чтобы 510 нм, обнулить счетчик дистиллированной
2. Добавьте реагенты в 1.5 Кювета мл, как показано ниже:

Название реагента (мкл)	Пробирка А3	Контрольная трубка А4	Пустой тюбик А2	Стандартная трубка А1
Дистиллированная вода			20
Стандартное решение				20
Супернатант	20
Реагент 1	200	200	200	200
Реагент 2	200	200	200	200
Тщательно перемешать, оставаться при температуре 37℃ 15 минуты.
Реагент 3	600	600	600	600
Супернатант		20
Тщательно перемешать, обнаружить поглощение на 510 нм, записать как А1, А2, А3, А4.

III. Расчет деятельности ПСР/АЛП:

• Концентрация белка:

Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество ферментов, катализирующих образование 1 мкмоль фенола в реакционной системе в минуту при 37 ℃ на каждый мг белка.

ПСР/АЛП (Ед/мг прот) "="[С×(А3-А4)÷(А1-А2)×Вс]÷(Cpr×Vs)÷Т=0,167×(А3-А4)÷(А1-А2)÷Cpr

• Вес образца:

Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество ферментов, катализирующих образование 1 мкмоль фенола в реакционной системе в минуту при 37 ℃ на каждый г образца.

ПСР/АЛП (Е/г веса) "="[С×(А3-А4)÷(А1-А2)×Вс]÷(Вт÷Ve×Vs)÷Т=0,167×(А3-А4)÷(А1-А2)÷Вт

• Кровь:

Определение единицы измерения: Одна единица ферментативной активности определяется как количество ферментов, катализирующих образование 1 мкмоль фенола в реакционной системе в минуту при 37℃ на каждый мл сыворотки.

ПСР/АЛП (Ед/мл) "="[С×(А3-А4)÷(А1-А2)×Вс]÷Vs÷T=0,167×(А3-А4)÷(А1-А2)

С: Стандартная концентрация, 2.5 мкмоль/мл;

Веревка: Общий объем реакции, 1020 мкл=1,02 мл; Против: Объем супернатанта, 0.02 мл;

ве: Объем экстракции, 1 мл; Вт: Вес образца, г;

Т: Время реакции, 15 минуты;

КПР: Концентрация белка образца, мг/мл.

Примечание:

1. Реагент 1, Реагент 2 и реагент 3 должен быть защищен от
2. Реагент 3 нельзя использовать, если он изменился на сине-зеленый.
3. После добавления реагента быстро тщательно перемешайте. 3 чтобы избежать неполноты

Экспериментальный пример:

1. Возьмите 0,1 г поджелудочной железы мыши и добавьте 1 мл раствора экстракта для гомогената. После взятия супернатанта, действовать в соответствии с этапами определения. Вычислить АТ = 0.324, АС = 0.037, АБ = 0.022, КАК = 0.677. Рассчитайте активность фермента по массе образца.: Активность фермента AKP/ALP (Ед/г массы) = 0,167×(АТ-АС)÷(АС-АБ) ÷ Вт =0,167×(0.324-0.037)÷(0.677-0.022)÷0,1=0,732 Ед/г
2. После приема кроличьей сыворотки, операция выполняется в соответствии с этапами определения, а активность фермента рассчитывают следующим образом: АТ = 0.190, АС = 0.015, АБ = 0.022, КАК = 0.677. По объему крови, активность фермента рассчитывают следующим образом: Активность фермента AKP/ALP (Ед/мл) = 0,167×(АТ-АС) ÷ (АС-АБ) =0,167×(0.190-0.015)÷(0.677-0.022)=0,0446Ед/мл.

сопутствующие товары：

BC2020/BC2025 Ацетилхолинэстераза(боль) Набор для анализа активности

BC2130/BC2135 Кислая фосфатаза(АШП) Набор для анализа активности

BC0840/BC0845 Карбоксилэстераза(CarE) Набор для анализа активности