SolarBio Этиловый эфир тетраметилродамина(ТМРЕ)

Тетраметилрходамин этиловый эфир (ТМРЕ) Является ли флуоресцентный краситель, используемый для визуализации и количественной оценки потенциала митохондриальной мембраны в живых клетках. Он принадлежит к семейству родаминовых красителей и часто используется в различных клеточных анализах для изучения здоровья митохондрий и функций. TMRE накапливается в активном, Поляризованные митохондрии, Излучающая красная флуоресценция, что делает его ценным инструментом для оценки изменений потенциала митохондриальной мембраны.

Ключевые особенности TMRE:

1. Мембранный потенциальный индикатор:
   • TMRE чувствителен к изменениям в потенциале митохондриальной мембраны. Он накапливается в активном, Поляризованные митохондрии, Излучающая красная флуоресценция.
2. Клеточная проницаемость:
   • TMRE является проницательным для клеток и может использоваться в экспериментах с визуализацией живых клеток.

Как использовать TMRE:

1. Подготовка раствора TMRE Stock:
   • Подготовьте запасы TMRE, растворяя его в соответствующем растворителе (обычно ДМСО) Чтобы достичь желаемой концентрации. Типичные рабочие концентрации могут варьироваться от 10 к 200 н.м..
2. Приготовление клеток:
   • Культуральные клетки, представляющие интерес к соответствующей среде роста и условия. Убедитесь, что клетки прилипают или могут быть легко приостановлены для визуализации.
3. Загрузка TMRE:
   • Добавить раствор TMRE в среду для культивирования клеток или буфер при желаемой концентрации. Инкубировать клетки с TMRE в течение определенного периода, обычно 15-30 минуты, позволяя красителю накапливаться в митохондриях.
4. Мойка (если нужно):
   • После инкубационного периода, промыть клетки буфером, чтобы удалить избыток TMRE из культуральной среды.
5. Микроскопия и визуализация:
   • Выполнить визуализацию живых клеток с использованием флуоресцентного микроскопа, оснащенного соответствующими наборами фильтров для красной флуоресценции. Волновать TMRE в 550-580 NM и обнаружение излучаемой флуоресценции примерно при 590-620 нм.
6. Митохондриальная оценка здоровья:
   • Проанализировать интенсивность флуоресценции TMRE в митохондриях. Более высокая флуоресценция указывает на активную и поляризованную митохондрии, в то время как снижение может указывать на деполяризацию митохондриальной мембраны.
7. Управление и калибровка:
   • Включите соответствующие элементы управления, такие как клетки, обработанные митохондриальными неучителями или деполяризующими агентами, Чтобы калибровать ответы и подтвердить результаты.
8. Количественная оценка:
   • Используйте программное обеспечение для анализа изображений для количественной оценки интенсивности флуоресценции TMRE. Это может быть выполнено на одноклеточном уровне или для всего поля зрения.
9. Интерпретация данных:
   • Интерпретировать результаты в контексте ваших экспериментальных целей. Изменения в флуоресценции TMRE могут дать представление о митохондриальной функции, здоровье, и ответы на различные стимулы.