Растительная дегидрогеназа Solarbio (ПДГА) Набор для анализа активности

Растительная дегидрогеназа (ПДГА) Набор для анализа активности

Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования..

Операционное оборудование: Устройство считывания микропланшетов/спектрофотометр

Кот нет: BC3125

Размер:100Т/48С

Компоненты:

Реагент I: Порошок×2. Хранение при 4℃. Растворите одну бутылку порошка в воде, чтобы приготовить 50 мл перед использованием, приготовьте раствор, когда он будет использоваться. Хранить при температуре 4 ℃ и защищать от света после приготовления..

Реагент II: Жидкость 100 мл×2. Хранение при 4℃.

Реагент III: Этилацетат, требуется, но не предусмотрено.

Описание продукта:

Активность растительной дегидрогеназы (ПДГА) во многом отражает активное состояние организма, что может напрямую указывать на способность биологических клеток разрушать свой матрикс.

Акцептор водорода хлорид 2,3,5-трифенилтетразолия. (ТТС) генерирует красный трифенилформазон (ТФФ) после получения водорода при клеточном дыхании. TFF имеет характерный пик поглощения при 485 нм, Активность PDHA можно определить количественно путем измерения оптической плотности при 485 нм.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Устройство для чтения микропланшетов или спектрофотометр, водяная баня, настольная центрифуга, водяная баня, пипетка, микро-стеклянная кювета/96-луночный планшет с плоским дном (материал, не содержащий полистирола/полипропилена), ступка/гомогенизатор, этилацетат (экспресс-доставка не допускается), лед и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Сложный добыча:

Собирать 0.1 г ткани, стирать 3 или 4 раз с двойной паровой водой, промокните насухо фильтровальной бумагой и отложите в сторону.

II. Определение процедура:

• Предварительный нагрев спектрофотометра/считывателя микропланшетов для 30 минуты, отрегулировать длину волны, чтобы 485 нм, установить ноль этилацетатом.
• Добавьте следующие реагенты в 5 мл EP пробирки:

III. Расчет:

А. микро стеклянная кювета (световой путь кюветы, 1 см)

Определение единицы измерения: Одна единица активности фермента определяется как количество фермента, увеличивающее поглощение каждого 0.01 за час каждый мг тканевого белка в реакционной системе.

Деятельность ПДГА(Фу) =ΔA÷0,01÷T÷W=33×ΔA÷W

Б. 96 колодезная пластина (световой путь кюветы, 0.6 см)

Определение единицы измерения: За единицу ферментативной активности понимают количество 1 мг ткани увеличивает поглощение каждого 0.005 за час в реакционной системе.

Деятельность ПДГА(Фу) =ΔA÷0,005÷T÷W=66,7×ΔA÷W

Т: Время реакции (час), 3 часы; Вт: Вес образца, г.

Примечание

1. После подготовки, Реагент, который следует хранить при температуре 4 ℃., беречь от света и использовать в течение одной недели. Если он станет красным, его нельзя использовать.
2. Реагент III летуч и токсичен.. Для вашего здоровья, пожалуйста, наденьте лабораторную одежду, маски, и латексные перчатки.
3. Ледяная баня для остановки реакции сразу после завершения темновой реакции.. Выбросьте фильтрат., максимально промокните пробу фильтровальной бумагой.
4. Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования.. Разбавьте супернатант, если поглощение выше., умножьте разбавление в формуле.
5. Если тестировать с 96 колодезная плоскодонная тарелка, полистирол, или полипропиленовый материал 96 колодезную тарелку с плоским дном использовать не рекомендуется.

Экспериментальный пример:

1. Взвесьте 1 г листьев алоэ., промыть бидистиллированной водой 3–4 раза., впитать воду фильтровальной бумагой, действовать в соответствии с этапами определения, измерить и рассчитать с помощью 96 колодезная пластина, ΔА=АТ-АС= 0.244-0.146 "=" 0.098, рассчитать активность фермента.

Дегидрогеназная активность (Ед/г массы) = 66,7×ΔА÷Вт = 6.5366 Ед/г массы.

сопутствующие товары：

BC2030/BC2035 Изоцитратлиаза (ICL) Набор для анализа активности

BC3170/BC3175 Ацетокиназа (ПОДТВЕРЖДЕНИЕ) Набор для анализа активности

Набор для анализа активности гликолевой оксидазы BC2010/BC2015