Набор для анализа гликогена

Примечание: Перед тестированием возьмите два или три разных образца для прогнозирования..

Операционное оборудование: Спектрофотометр/ считыватель микропланшета

Номер каталога: BC0345

Размер:100Т/96С

Компоненты:

Извлечение реагента: 100мл×1, хранение при 4℃.

Регент I: Порошок×1, хранение при 4 ℃ .10 мг глюкозы, добавлять 1 мл дистиллированной воды, чтобы растворить его перед использованием. Разбавлено дистиллированной водой 0.1 мг/мл раствора глюкозы для резервного режима, готов к использованию. 0.1 МГ/мл стандартного раствора глюкозы, хранение при 4℃.

Регент ⅱ: Порошок×1, хранение при 4℃.

Рабочее решение: Залить 6 мл дистиллированной воды в реагент ⅱ и медленно залить 24 мл концентрированной серной кислоты. Растворяйте и смешивайте тщательно перед использованием. Неиспользованные реагенты действительны в 4 ° C в течение одной недели.

Описание продукта

Гликоген - это высокомолекулярный полисахарид, состоящий из единиц глюкозы. Это одна из основных форм хранения сахара. Он в основном хранится в печени и мышцах в качестве энергии резервного копирования, и называется гликогеном печени и мышечным гликогеном, соответственно. Гликоген может регулировать концентрацию глюкозы в крови. Гликоген может быть синтезирован в печени, когда повышается глюкоза в крови. Когда сахар в крови уменьшается, Гликоген печени разбивается на глюкозу, чтобы добавить сахар в крови. Поэтому, Гликоген печени важен для поддержания относительного баланса сахара в крови. Мышечный гликоген является формой хранения гликогена в мышцах. Когда во время напряженных упражнений потребляется много сахара в крови, мышечный гликоген не может быть разбит непосредственно на уровень сахара в крови. Сначала он должен быть разбит, чтобы произвести молочную кислоту, который распространяется в печень с кровью, и трансформируется в гликоген печени через гликоген глюкозу.

Принцип определения: метод антрона. Гликоген экстрагируется сильным щелочным экстрактом, и содержание гликогена измеряется с использованием метода антрона в сильно кислых условиях.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки.

СПектрофотометр/ считыватель микропланшета, настольная центрифуга, пипетка для переноса, Микростексовая кювета/96-луночная тарелка, раствор, концентрированная серная кислота (H2SO4) и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Извлечение образца:

1. Клетки или бактерии: Собирать 5-10 миллион бактерий или клетки в центрифужную трубку, Откажитесь от супернатанта после центрифугирования; Добавить 0,75 мл реагента экстракции в ультразвуковые бактерии или клетки (власть 20% или 200 Вт, Ультразвуковые 3с, 10S интервал, повторить 30 раз) ); Переносить в 10 мл трубку, кипятить в кипящей водяной бане в течение 20 минут (плотно закрыть, чтобы предотвратить потерю воды), Встряхнуть трубку каждый 5 мин, чтобы полностью смешивать; Уберите трубку и охлаждают, Поберите до 5 мл с дистиллированной водой и перемешайте. Центрифуга в 8000 г и 25 ℃ в течение 10 минут, Возьмите супернатант для тестирования.

2. Салфетка: Весом 0,1 ~ 0,2 г образца и положите его в 10 ML Tube, добавлять 0.75 мл раствора экстракции, кипятить в ванне с кипящей водой для 20 мин (плотно закрыть, чтобы предотвратить потерю воды), Встряхнуть пробирку каждый 5 мин, чтобы полностью смешивать. После всей ткани растворяется, выньте трубку и остыть, Тогда восполнит 5 мл с дистиллированной водой. Центрифуга в 8000 г и 25 ℃ для 10 мин, Возьмите супернатант для тестирования.

II. Определение процедура:

1. Разогреть сПектрофотометр/ считыватель микропланшета для 30 мин, отрегулировать длину волны, чтобы 620 нм, установить ноль с дистиллированным
2. Таблица отбора проб (Добавить следующих регентов в Eptube)

Регент(мкл)	Пустая трубка (А1)	Стандартная трубка (А2)	Пробирка (А3)
Образец			60
Регент I		60
дистиллированная вода	60
Регент ⅱ	240	240	240

Хорошо перемешать, поместить в кипящую водяную ванну для 10 минуты (плотно закрыть, чтобы предотвратить потерю воды), прохладный, и возьми 200 мкл в микроэлементную кювету/96-луночную пластину для чтения поглощения пустой трубки, стандартная трубка, и измерительная трубка в 620 нм, и записать их как A1, А2, и A3. Пустая трубка и стандартная трубка должны быть протестированы только один раз.

III. Расчет:

1. Вес образца

Сорбит (мг/г свежий вес) "="(CS × V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W × V1 ÷ v2)÷ 1.11

= 0,450 ×(A3-A1)A2-A1)÷Вт

2. Концентрация белка

Сорбит (мг/мг прот) "=" (CS × V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1 × cpr) ÷ 1.11

= 0,09 ×(A3-A1) A2-A1) ÷Cpr

3. Количество бактерий или клеток:

Сорбит (мг/104 ячейка) = (CS × V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(Количество бактерий или клеток × v1 ÷ v2) ÷ 1.11

= 0,450 ×(A3-A1)A2-A1)÷ Количество бактерий или клеток

1.11: Постоянно, что содержание глюкозы преобразовано в содержание гликогена, То есть, Цвет 111 мкг глюкозы с антроновым реагентом эквивалентен рисунке 100 мкг гликогена с антроновым реагентом.

Cs: концентрация стандарта, 0.1 мг/мл v1: объем пробы, 0.06 мл;

V2: Общий объем выборки, 5 мл;

КПР: концентрация белка в образце, мг/мл; Вт: Вес образца, г

Количество бактерий или клеток: 104 как устройство, десять тысяч

Примечание:

Если А больше, чем 1.4, Разбавьте образец дистиллированной водой и умножьте его на соответствующий коэффициент разбавления в формуле расчета.

сопутствующие товары

BC2450/BC2455

BC2540/BC2545 Целлюлаза(Калькуляция) Набор для анализа активности

BC0330/BC0335

BC2510/BC2515 Комплект анализа активности Трегалазы

BC2520/BC2525 SorbitoL Content Sat набор для анализа контента

BC2530/BC2535 сорбитолдегидрогеназа(СДХ) Набор для анализа активности

BC0230/BC0235 РЕЗУМЕНТА САРКА(Рупий) Набор для анализа содержания

BC2490/BC2495 КОМПЛЕКС АНПИСИ

Техническая спецификация:

Предел обнаружения: 0.002 мг/мл

Линейный диапазон: 0.003125-0.25 мг/мл