Набор для анализа активности удаления радикалов Solarbio ABTS Tree

Обзор продукта

Содержание продукта:

Перед использованием убедитесь, что объем реагента соответствует объему раствора во флаконе.. По вопросам, пожалуйста, свяжитесь Соларбио персонал оперативно.

Приготовление раствора:

1. Реагент II: Перед использованием, добавлять 3 мл дистиллированной воды и полностью растворить. Любой неиспользованный реагент можно хранить при температуре -20℃ в течение двух недель..
2. Приготовление рабочего раствора реагента III: Поместите жидкость в прилагаемую EP-пробирку.. Приготовьте рабочий раствор в соответствии с соотношением Реагента III. (мкл) в дистиллированную воду (мл) "=" 1 мкл: 12 мл. Неиспользованные реагенты следует хранить при температуре 4 ℃..
3. Приготовление рабочего раствора реагента IV: Храните Реагент IV отдельно при температуре -20℃.. Перед использованием, приготовьте рабочий раствор в соответствии с номером образца и соотношением реагента V и реагента I. (В: В) "=" 1:9. Неиспользованный реагент следует хранить при температуре -20℃..
4. Реагент V: Поместите порошок, содержащий 5 мг витамина С в прилагаемой EP-пробирке. Добавлять 2.8 мл раствора экстракта перед использованием, и тщательно встряхните, чтобы растворить. Подготовить 10 ммоль/л раствора витамина С для использования в качестве положительного контроля.. Хранить при температуре 4℃ в течение одной недели..
5. Приготовление рабочего раствора АБТС: Перед использованием, приготовить рабочий раствор АБТС в необходимом для испытания количестве. Доля Реагента I: Реагент II: Реагент III Рабочий раствор (В:В:В) "=" 76:5:4. Приготовьте и храните в темном помещении при комнатной температуре.. Использовать внутри 30 минуты.

Описание продукта:

1. Оценка антиоксидантной способности: Метод ABTS широко используется для оценки антиоксидантной способности гидрофильных и липофильных веществ..
2. Образование радикала ABTS: ABTS окисляется с образованием стабильного сине-зеленого катион-радикала ABTS с пиками поглощения при 405 нм или 734 нм.
3. Снижение поглощения: При добавлении испытуемого вещества к радикальному раствору АБТС, антиоксидантный компонент вступает с ним в реакцию, вызывая снижение поглощения при 405 нм.
4. Пропорциональная очистка: Изменение поглощения прямо пропорционально степени поглощения свободных радикалов в определенном диапазоне..
5. Количественная оценка очистки: Этот набор измеряет способность образца удалять радикалы ABTS путем количественного определения снижения поглощения..

Примечание: Перед тестированием, провести предварительные эксперименты с 2–3 образцами, показывающими значительные ожидаемые различия.. Если поглощение образца выходит за пределы диапазона измерения, рассмотрите возможность разбавления или увеличения размера выборки для тестирования.

Требуемые реагенты и оборудование, которые не входят в комплект поставки:

Водяная баня постоянной температуры, спектрофотометр, 1 стеклянная кювета мл, настольная центрифуга, ступка/измельчитель, сушильная камера, 30сито ~50 меш, и дистиллированная вода.

Процедура:

я. Извлечение образца: (Количество образцов можно соответствующим образом отрегулировать., и обратитесь к литературе за конкретными пропорциями)

1. Подготовка образцов растительных тканей: Свежие образцы сушите при 60 ℃ до постоянного веса., растереть в ступке (или шлифовальная машина), и просеять через сито 30-50 ячеек.. Вес примерно 0.05 г образцов, добавлять 1 мл раствора экстракта, и инкубируйте на водяной бане при температуре 40℃ в течение 30 мин. Центрифуга в 10000 об/мин для 10 мин при комнатной температуре, соберите супернатант и храните его на льду для тестирования.
2. Красное вино, Фруктовый сок, и другие жидкие образцы: Брать 100 мкл раствора образца и добавьте 900 мкл раствора экстракта. Вихревая смесь, центрифуга при комнатной температуре, 10000 об/мин для 10 мин, соберите супернатант и храните его на льду для тестирования.
3. Экстракция или наркотик: Приготовьте раствор экстракта определенной концентрации., такой как 5 мг/мл.

Примечание: Способность различных образцов удалять свободные радикалы ABTS может значительно различаться.. Чтобы обеспечить точность, корректировка образцов по предварительным результатам.

II. Этапы определения:

1. Предварительно нагрейте спектрофотометр более 30 минуты, установите длину волны на 405 нм, и ноль дистиллированной водой.
2. Подготовка положительного контроля: Подготовить 10 ммоль/л раствор витамина С с раствором экстракта. Для линейной зависимости, подготовить 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, и 0.1 растворы витамина С мг/мл. Для положительного контроля со скоростью клиренса около 90%, приготовьте растворы витамина С большего размера, чем 1.5 ммоль/л.
3. Операционный стол: Добавьте следующие реагенты в 96-луночный планшет или EP-пробирку., соответственно:

После тщательного перемешивания, инкубировать в темноте для 6 мин при комнатной температуре. Измерьте поглощение при 405 нм. Запишите значения поглощения для пустой пробирки., контрольная трубка, пробирка с положительным контролем, и пробирка как AB, переменного тока, БТР, и АТ соответственно. Пустую пробирку необходимо протестировать. 1-2 раз.

III. Расчет скорости удаления свободных радикалов ABTS:

1. Установление стандартной кривой: Формула скорости удаления свободных радикалов положительного контроля: Скорость удаления свободных радикалов ABTS DVC% = [(АБ-АПК) ÷ АБ] × 100%
2. Формула расчета скорости удаления свободных радикалов образцом: Скорость удаления свободных радикалов ABTS D% = [АБ — (АТ-АС)] ÷ АБ] × 100%.

Примечание:

1. Сравнить очищающую способность различных образцов., рекомендуется добавлять в одну партию одинаковый объем образцов, корректировка в соответствии с предэкспериментальными результатами. Во время сравнения, корректировать образцы в соответствии с результатами, сравнение скорости клиренса при одной и той же концентрации (коэффициент разбавления).
2. Пробы должны быть взяты и протестированы в тот же день..

Экспериментальный пример:

Брать 0.05 г перца чили и добавьте 1 мл раствора экстракта для гомогенизации. После центрифугирования, соберите супернатант и действуйте в соответствии с этапами определения. Рассчитать процент оформления: Д% = [АБ — (АТ-АС)] ÷AB] × 100% "=" [1.330-(0.468-0.022)]÷ 1,330×100% = 66.466%

сопутствующие товары:

• BC4750/BC4755: Набор для анализа способности улавливать свободные радикалы DPPH
• BC1310/BC1315: Общая антиоксидантная способность (Т-АОС) Набор для анализа
• BC1320/BC1325: Набор для анализа способности улавливать гидроксильные радикалы