Набор обеспечивает быструю очистку высококачественной РНК из пробирки для РНК крови paxigene с использованием спин-колонок с кремнеземной мембраной.. РНК, очищенная с помощью системы HiPure, готова для таких применений, как RT-ПЦР, Нозерн-блоттинг, поли А+ РНК (мРНК) очищение, нуклеазная защита, и перевод in vitro.
Подробности
Технические характеристики
| Функции | Технические характеристики |
| Основные функции | Выделение тотальной РНК из пробирок с РНК Paxgene |
| Приложения | ОТ-ПЦР, кПЦР, Северная гибридизация, НГС, защита нуклеиновой кислоты, перевод in vitro |
| Метод очистки | Мини спин-колонка |
| Технология очистки | Кремнеземная технология, Технология фильтрации ДНК |
| Метод процесса | Руководство (центрифугирование или вакуум) |
| Тип образца | Кровь в пробирке для консервации |
| Сумма образца | 2.5мл |
| Объем элюирования | ≥30мкл |
| Объем переносимой жидкости на колонку | 800мкл |
| Привязка выхода колонки | 100мкг |
Принцип
Набор предназначен для очистки тотальной РНК от 2.5 мл цельной крови человека, собранной в пробирку для РНК крови PAXgene. Очистка начинается со стадии центрифугирования для осаждения нуклеиновых кислот в пробирке для РНК крови PAXgene.. Осадок промывают и ресуспендируют., и инкубировали в оптимизированных буферах вместе с протеиназой К.. Промывка ДНК. Лизат пропускают через мини-колонку ДНК.. Этанол добавляется для корректировки условий связывания., и лизат наносится на колонку. РНК избирательно связывается с кремнеземной мембраной, когда загрязняющие вещества проходят через нее.. Оставшиеся загрязнения удаляются за несколько эффективных этапов промывки.. Между первым и вторым этапами стирки, мембрана обрабатывается ДНКазой I для удаления следовых количеств связанной ДНК.. После этапов стирки, РНК элюируется в элюирующем буфере и денатурируется нагреванием..
Преимущества
- Высокое качество — Тотальную РНК высокой чистоты можно напрямую использовать в различных чувствительных последующих приложениях.
- Быстрый — выделение нескольких образцов может быть завершено в 40 минут с использованием метода очистки колонки
- Безопасность — не требуется фенол-хлороформной экстракции
- Чувствительный — прямой лизис крови, плазма, и другие пробы без отделения лейкоцитов
Содержимое комплекта
| Содержание | Р416802 | Р416803 |
| Время очистки | 10 Приготовления | 50 Приготовления |
| Мини-колонки HiPure RNA I | 10 | 50 |
| Мини-колонки с фильтром гДНК | 10 | 50 |
| 2Пробирки для сбора мл | 30 | 150 |
| Вода, не содержащая РНКазы | 60 мл | 250 мл |
| Буфер MBR1 | 10 мл | 30 мл |
| Буфер MBR2 | 5 мл | 15 мл |
| Буфер RW1 | 15 мл | 60 мл |
| Буфер RW2* | 6 мл | 20 мл |
| Протеиназа К | 12 мг | 50 мг |
| Буфер для растворения протеазы | 1.8 мл | 5 мл |
| ДНКаза I | 120 мкл | 600 мкл |
| ДНКазный буфер | 6 мл | 30 мл |
Хранение и стабильность
Протеиназу К следует хранить при температуре 2–8°C по прибытии.. ДНКазу I следует хранить при температуре -20°С.. Однако, кратковременное хранение (ДНКаза я до 1 недели, Протеиназа К до 8 недели) при комнатной температуре (15–25°С) не влияет на их работоспособность. Остальные компоненты набора можно хранить при комнатной температуре. (15–25°С) и стабильны по крайней мере 18 месяцев в таких условиях.
Данные эксперимента
Отзывы
Отзывов пока нет.