Сложная растительная тотальная РНК (плюс) Набор для извлечения небольшого количества

1. Компоненты набора реагентов

Технические характеристики	50Т	100Т
Кот. Нет.	SN0305PD	SN0306PD
Колонки для экстракции РНК (набор)	50 (набор)	100 (набор)
Колонки для очистки ДНК (набор)	50 (набор)	100 (набор)
Inhibitor Removal Purification Columns (набор)	50 (набор)	100 (набор)
Экстракция РНК Буфер I	30 мл	2×30 мл
Буфер удаления ингибитора	30 мл	2×30 мл
Промывной буфер 1	15 мл	2×15 мл
Элюирующий буфер	20 мл	20 мл
Инструкция по эксплуатации	1	1

2. Хранилище

This reagent kit can be stored at room temperature (15-25℃) в сухой среде и устойчиво для 12 месяцы.

3. Инструкции по использованию набора реагентов

3.1 Этот набор предназначен для исследовательских целей в области молекулярной биологии и не должен использоваться для диагностики или лечения заболеваний..

3.2 Некоторые компоненты набора содержат раздражители.; желательно принять необходимые меры предосторожности (например, носить защитную одежду и очки).

3.3 Для использования этого комплекта требуется дополнительное оборудование, такое как высокоскоростная центрифуга., водяная баня (металлическая ванна), вихревой смеситель, безводный этанол, жидкий азот, хлороформ, стерильная деионизированная вода, и EP трубки.

4. Знакомство с набором реагентов

This RNA purification reagent kit provides a fast and effective purification of plant total RNA containing polysaccharides, липиды, polyphenols, and other components. It is suitable for most complex plant tissues. В общем, lipid-rich plant tissues contain a high content of lipid compounds, which significantly affect RNA extraction efficiency. This kit utilizes exclusive inhibitor removal columns to effectively eliminate lipids from plant samples, as well as to remove DNA contamination. If the experiment is sensitive to DNA, it is recommended to use intron-spanning primers for downstream experiments.

 

The RNA rapid purification reagent kit can extract plant total RNA (включая ядерную РНК и цитоплазматическую РНК) в пределах 1 час. Экстрагированную РНК можно напрямую использовать для RT.-ПЦР, Нозерн-блоттинг, и т. д.. The entire purification process does not require toxic reagents such as chloroform, making the RNA purification reagent kit suitable for various other samples.

5. Экспериментальные принципы и процедуры

6. Процесс экстракции

Меры предосторожности перед началом эксперимента:

А. Стирать Буфер 1: Перед использованием, add the specified amount of absolute ethanol as indicated on the reagent bottle label. Check the label to confirm the addition of absolute ethanol.

Б. Элюирующий буфер представляет собой 0.1х ТЕ решение с минимальным количеством ЭДТА. If EDTA may affect subsequent experiments, it is recommended to replace the elution buffer with sterile deionized water.

С. RNA Extraction Buffer I contains a small amount of phenol, which may precipitate. Перед использованием, mix thoroughly by warming in a water bath; after use, store away from light.

 

1. Образец обработки:

А. Сбор и хранение материалов:

If freshly collected materials cannot be immediately used, place them in liquid nitrogen and store them at -80℃.

Б. Whenever possible, collect fresh materials as they contain fewer polysaccharides and polyphenols.

2. Grind approximately 100 mg of fresh samples or not more than 20 mg of dry material with liquid nitrogen.

3. Добавлять 600μl of RNA Extraction Buffer I, ensuring there are no tissue clumps in the ground sample. Tissue clumps are difficult to lyse and can reduce RNA yield.

4. Вортекс для 30 с.

5. Transfer the lysate to aninhibitor removal purification column, центрифуга в 12,000 об/мин для 5 мин.

(Примечание: Lipid-rich plant materials may contain many lipid compounds at this step, which can affect RNA extraction. Remove these substances during this step. If buffer residue remains in the inhibitor removal purification column during centrifugation, extend centrifugation time appropriately.)

6. Transfer the obtained supernatant to a DNA removal column, центрифуга в 12,000 rpm for 30s, and collect the filtrate (Примечание: РНК присутствует в фильтрате).
7. Добавлять 250мкл абсолютного этанола, Смешайте с помощью пипетки. If there is a small amount of precipitation, это не влияет на последующие эксперименты. Transfer the liquid to an RNA purification column, центрифуга в 12,000 rpm for 30s, discard the flow-through.
8. Добавлять 700μl of inhibitor removal buffer, центрифуга в 12,000 rpm for 30s, discard the flow-through.
9. Добавлять 700мкл стиратьбуфер 1 к колонке очистки РНК, центрифуга в 12,000 rpm for 30s, discard the flow-through.
10. Добавлять 500мкл стирать буфер 1 к колонке очистки РНК, центрифуга в 12,000 об/мин для 3 мин, discard the flow-through.
11. Place the RNA purification column into a new 1.5ml centrifuge tube, air-dry the membrane at room temperature for 2 минуты.

(Примечание: Confirm that absolute ethanol has been added to стирать буфер 1. Присутствие этанола серьезно влияет на последующие эксперименты., so drying the membrane is crucial. После центрифугирования, Убедитесь, что этанол не присутствует до элюирования, then discard the waste and collection tube. After washing with wash buffer 1, the membrane on the RNA purification column should have only a slight color. После центрифугирования, Осторожно удалить колонку очищения РНК, ensuring it does not touch the collection tube to avoid ethanol interference.)

12. Aerially pipette 50-100мкл буфера для элюирования на мембрану, центрифуга в 12,000 об/мин для 1 мин, and collect the RNA solution.

(Примечание: Элюирование РНК с помощью 50 μl of elution buffer can increase RNA concentration but reduces total RNA yield.)