Taq DNA 중합효소
제품 번호:E001A 사양:500U/1000U/5000U Storage: -20°C에서 보관
제품소개:
이 생성물은 Taq DNA 폴리머 라제입니다, 일반적으로 TAQ 효소라고합니다, 가장 널리 사용되는 DNA 폴리머 라제 중 하나입니다.. 그것은 Thermus aq. 그만큼 PCR 이 제품을 사용하여 증폭 된 제품에는 3에베이스가 추가되었습니다.′ 끝, t 벡터로 클로닝 할 수 있습니다.
상품 내용:
구성요소 | E001A-01(500U) | E001A-02(1000U) | E001A-03(5000U) |
TAQ DNA 폴리머 라제 (5U/µL) | 100µL | 200µL | 1밀리리터 |
DNTP 혼합물 (10각각 mM) | 100µL | 200µL | 1밀리리터 |
10× PCR 완충액 (마그네슘2+ ...을 더한)
|
1밀리리터 | 2× 1ml | 10× 1ml |
저장:
-20°C에서 보관, 최소 유효 기간이 있습니다 12 개월.
활동 정의:
템플릿/프라이머로 활성화 된 대규모베이스 정자 DNA를 사용합니다, 섭취 10 산 불용성 물질로서 총 뉴클레오티드의 NMOL 30 74 ° C에서 분은 다음과 같이 정의됩니다 1 활동 단위 (유).
품질 관리:
이 제품은 품질 테스트를 거쳤으며 엔도 뉴 클레아 제 활동이 없습니다., 엑소 뉴 클레아 제 활성, 리보 뉴 클레아 제 오염. 잔류 숙주 게놈 DNA는 다음과 같습니다 10 사본.
제품 사용:
PCR 방법을 사용한 DNA의 증폭; DNA 서열 결정.
사용 지침:
- PCR 반응에 필요한 모든 솔루션을 녹이고 혼합하여 얼음 욕조 또는 냉각기에 넣습니다.. 반복적 인 동결-해동 사이클을 피하기 위해 PCR 반응 혼합물을 분취하는 것이 좋습니다..
- 얼음 욕조 또는 냉각기에 PCR 반응 시스템을 설정하는 것이 좋습니다., 참조를 위해 권장 반응 시스템을 따릅니다.
- 과도한 템플릿 DNA는 비특이적 PCR 생성물로 이어질 수 있습니다. 50μl 반응 부피의 다른 유형의 템플릿에 대한 권장 템플릿 금액은 다음과 같습니다.:
동물과 식물의 게놈 DNA: 0.1-1µg;
대장균의 게놈 DNA: 10-100~의;
플라스미드 DNA: 0.1-10~의.
권장 반응 시스템:
시약 | 50µL 시스템 볼륨 | 최종 농도 |
Taq DNA 중합효소 | 1µL | 0.1유 |
10× PCR 완충액 (마그네슘2+ ...을 더한) | 5µL | 1× |
DNTP 혼합물 (10각각 mM) | 1µL | 0.2각각 mM |
프라이머 i (10µm) | 1µL | 0.2µm |
프라이머 II (10µm) | 1µL | 0.2µm |
템플릿 DNA | 1µL | - |
DDH2영형 | 50μl로 | - |
메모: 반응 시스템의 각 구성 요소의 양은 실제 요구 사항에 따라 조정할 수 있습니다..
- 피펫을 사용하여 준비된 반응 시스템을 철저히 피펫으로 섞습니다., 캡으로 PCR 튜브를 밀봉하십시오, 적절하게 레이블을 지정하십시오, 실온에서 간단히 원심 분리.
- 준비된 PCR 튜브를 PCR 기계, 반응 조건을 설정하십시오, PCR 반응을 시작합니다.
반응 조건:
방법/단계 | 시간 설정 | 사이클 |
95℃ (사전 결연) | 2-5분 | 1 |
95℃ (변성) | 30비서 | 25-35 사이클 |
55℃ -60 0 (가열 냉각) | 30비서 | |
72℃ (확대) | 1분 | |
72℃ (최종 확장) | 10분 | 1 |
4℃ (Hold) | ∞ | - |
메모: 실제 요구 사항에 따라 반응 조건을 조정하고 최적화 할 수 있습니다..
지침:
- 연장 시간은 PCR 제품의 길이 및 GC 함량과 같은 요소에 따라 조정할 수 있습니다.. 제품의 KB 당 연장 시간은 템플릿의 복잡성과 밀접한 관련이 있습니다.: 간단한 템플릿이 필요합니다 20 초, 일반적인 템플릿이 필요합니다 30 초, 복잡한 템플릿이 필요합니다 1 분.
- PCR 반응의 설정은 템플릿과 같은 다른 조건에 맞게 조정되어야합니다., 프라이머, PCR 제품의 길이, 및 GC 컨텐츠. 프라이머의 최종 농도는 일반적으로 0.1-1.0μm 범위 내에 있습니다.. DNA 주형 농도는 그에 따라 조정될 수 있습니다. 복잡한 템플릿 또는 높은 GC 컨텐츠의 경우, 사전-감염/변성 또는 연장 시간을 연장하고 변성/어닐링 온도를 증가시키는 것이 좋습니다..
- 증폭 전후에 지정된 영역과 피펫을 사용하십시오, 장갑을 착용하십시오, 그리고 자주 바꾸십시오. PCR 반응을 완료 한 후, 반응 튜브를 즉시 열지 마십시오. 실험실 환경에 대한 PCR 제품 오염 위험을 최소화하기 위해 열기 전에 4 ° C 또는 -20 ° C에서 충분히 식히도록하십시오..
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