ADN polimerasa taq
Artículo No:E001A Especificación:500U/1000U/5000U Storage: Conservar a -20°C
Introducción del producto:
This product is Taq DNA Polymerase, commonly referred to as Taq enzyme, which is one of the most widely used DNA polymerases. It is expressed in Escherichia coli with the cloned gene of Thermus aquaticus DNA Polymerase and then purified through multiple steps. El PCR products amplified using this product have an added A base at the 3′ fin, allowing for cloning into T vectors.
Contenido del producto:
Componentes | E001A-01(500U) | E001A-02(1000U) | E001A-03(5000U) |
Taq DNA Polymerase(5U/µL) | 100µL | 200µL | 1mililitros |
dNTP Mixture (10mm cada uno) | 100µL | 200µL | 1mililitros |
10× PCR Buffer (Mg2+ más)
|
1mililitros | 2× 1mL | 10× 1mL |
Almacenamiento:
Conservar a -20°C, con una vida útil mínima de 12 meses.
Activity Definition:
Using activated largemouth bass sperm DNA as a template/primer, the intake of 10 nmol of total nucleotides as acid-insoluble material within 30 minutes at 74°C is defined as 1 unit of activity (Ud.).
Control de calidad:
Este producto ha sufrido pruebas de calidad y está libre de actividad de endonucleasa, actividad de exonucleasa, y contaminación por ribonucleasa. El ADN genómico del huésped residual está debajo 10 copias.
Uso de productos:
Amplificación de ADN utilizando el método de PCR; Determinación de la secuencia de ADN.
Instrucciones de uso:
- Dissolve and mix all required solutions for the PCR reaction and place them on an ice bath or in a cooler. It is recommended to aliquot the PCR reaction mixture to avoid repeated freeze-thaw cycles.
- It is advisable to set up the PCR reaction system on an ice bath or in a cooler, Siguiendo el sistema de reacción recomendado como referencia.
- Excessive template DNA can lead to nonspecific PCR products. Recommended template amounts for different types of templates in a 50µL reaction volume are as follows:
Genomic DNA from Animals and Plants: 0.1-1µg;
Genomic DNA from Escherichia coli: 10-100ng;
ADN plásmido: 0.1-10ng.
Sistema de reacción recomendado:
Reactivos | 50µL de volumen del sistema | Concentración final |
ADN polimerasa taq | 1µL | 0.1Ud. |
10× PCR Buffer (Mg2+ más) | 5µL | 1× |
dNTP Mixture (10mm cada uno) | 1µL | 0.2mm cada uno |
Primer yo (10µm) | 1µL | 0.2µm |
Primer II (10µm) | 1µL | 0.2µm |
Plantilla ADN | 1µL | - |
Ddh2oh | To 50µL | - |
Nota: The amounts of each component in the reaction system can be adjusted according to actual requirements.
- Pipeta a fondo y mezcle el sistema de reacción preparado con una pipeta, Selle los tubos de PCR con tapas, etiquetarlos apropiadamente, y centrifugarse brevemente a temperatura ambiente.
- Coloque los tubos de PCR preparados en el máquina de PCR, Establecer las condiciones de reacción, e iniciar la reacción de PCR.
Condiciones de reacción:
Método/pasos | Ajuste de tiempo | Ciclos |
95℃ (Preenaturación) | 2-5mín. | 1 |
95℃ (Desnaturalización) | 30segundo | 25-35 Ciclos |
55℃ -60 ℃ (Recocido) | 30segundo | |
72℃ (Extensión) | 1mín. | |
72℃ (Extensión final) | 10mín. | 1 |
4℃ (Hold) | ∞ | - |
Nota: Las condiciones de reacción se pueden ajustar y optimizar de acuerdo con los requisitos reales.
Precauciones:
- El tiempo de extensión se puede ajustar según factores como la longitud y el contenido de GC del producto PCR. El tiempo de extensión por kb del producto está estrechamente relacionado con la complejidad de la plantilla: Las plantillas simples requieren 20 segundos, Las plantillas típicas requieren 30 segundos, y las plantillas complejas requieren 1 minuto.
- La configuración de la reacción de PCR debe adaptarse a diferentes condiciones, como la plantilla., cebadores, Longitud del producto PCR, y contenido de GC. The final concentration of primers typically falls within the range of 0.1-1.0μM. La concentración de la plantilla de ADN se puede ajustar en consecuencia. Para plantillas complejas o alto contenido de GC, Se recomienda prolongar los tiempos de denaturación/desnaturalización o extensión y aumentar las temperaturas de desnaturalización/recocido.
- Use áreas y pipetas designados antes y después de la amplificación, usar guantes, y cámbalos con frecuencia. Después de completar la reacción de PCR, No abra los tubos de reacción inmediatamente. Permita que se enfríen lo suficiente a 4 ° C o -20 ° C antes de abrir para minimizar el riesgo de contaminación del producto de PCR al entorno de laboratorio.
Reseñas
Aún no hay reseñas.