Solarbio ABTS 나무 라디칼 소거 활성 분석 키트

제품개요

기인하다	세부
운영장비	분광 광도계
카탈로그 번호	BC4770
크기	50 테스트 / 24 견본

제품 내용:

사용하기 전에 시약 용량이 병 안의 용액 용량과 일치하는지 확인하십시오.. 문의사항, 친절하게 연락주세요 솔라바이오 직원이 즉시.

시약 이름	명세서	보관 조건
솔루션 추출	액체, 60 밀리리터 × 1	4℃에서 보관
시약 I	액체, 80 밀리리터 × 1	4℃에서 보관
시약 II	분말× 1	4℃에서 보관
시약 III	액체, 20 μL × 1	4℃에서 보관
시약 IV	액체, 1.5 밀리리터 × 1	-20℃에 보관
시약 V	분말× 1	4℃에서 보관

용액의 준비:

1. 시약 II: 사용하기 전에, 추가하다 3 mL의 증류수를 넣고 완전히 녹입니다.. 사용하지 않은 시약은 -20℃에서 2주간 보관 가능.
2. 시약 III 작업 용액 준비: 제공된 EP 튜브에 액체를 넣습니다.. 시약 III의 비율에 따라 작업 용액을 준비합니다. (μL) 증류수에 (밀리리터) = 1 μL: 12 밀리리터. 사용하지 않은 시약은 4℃에 보관해야 합니다..
3. 시약 IV 작업 용액 준비: Reagent IV를 -20℃에서 별도로 보관하세요.. 사용하기 전에, 샘플 수와 시약 V와 시약 I의 비율에 따라 작업 용액을 준비합니다. (V: V) = 1:9. 사용하지 않은 시약은 -20℃에 보관해야 합니다..
4. 시약 V: 가루가 들어있는 것을 올려놓고 5 제공된 EP 튜브에 들어 있는 비타민 C mg. 추가하다 2.8 사용 전 추출액 1mL, 그리고 잘 흔들어서 녹여주세요. 준비하다 10 양성 대조군으로 사용하기 위한 mmol/L 비타민 C 용액. 4℃에서 일주일간 보관.
5. ABTS 작업 솔루션 준비: 사용하기 전에, 테스트에 필요한 양에 따라 ABTS 작업 용액을 준비합니다.. 시약 I의 비율: 시약 II: 시약 III 작업 솔루션 (V:V:V) = 76:5:4. 준비하여 실온의 어두운 방에 보관하세요. 이내에서 사용 30 분.

제품 설명:

1. 항산화 능력 평가: ABTS 방법은 친수성 및 친유성 물질의 항산화 능력을 평가하는 데 널리 사용됩니다..
2. ABTS 라디칼의 형성: ABTS는 산화되어 안정한 청록색 양이온 ABTS 라디칼을 형성하며 흡수 피크는 다음과 같습니다. 405 nm 또는 734 nm.
3. 흡광도 감소: 테스트 물질을 ABTS 라디칼 용액에 첨가하면, 항산화 성분이 반응하여, 흡광도를 감소시키는 원인이 됩니다. 405 nm.
4. 비례 청소: 흡광도의 변화는 특정 범위 내에서 자유라디칼 소거 정도에 정비례합니다..
5. 청소의 정량화: 이 키트는 흡광도 감소를 정량화하여 ABTS 라디칼을 제거하는 시료의 능력을 측정합니다..

메모: 테스트하기 전에, 상당한 예상 차이를 보이는 2~3개의 샘플을 사용하여 예비 실험을 수행합니다.. 시료의 흡광도가 측정 범위를 벗어나는 경우, 테스트를 위해 샘플 크기를 희석하거나 늘리는 것을 고려하십시오..

필요하지만 제공되지 않는 시약 및 장비:

항온 수조, 분광 광도계, 1 mL 유리 큐벳, 데스크탑 원심분리기, 모르타르/그라인더, 건조 상자, 30~50 메쉬 체, 그리고 증류수.

절차:

나. 샘플 추출: (샘플 수는 그에 따라 조정될 수 있습니다., 특정 비율에 대해서는 문헌을 참조하십시오.)

1. 식물 조직 샘플 준비: 새로운 샘플을 일정한 무게가 될 때까지 60℃에서 건조, 절구에 갈다 (아니면 그라인더), 30~50메쉬 체로 걸러냅니다.. 대략 무게를 잰다 0.05 g의 샘플, 추가하다 1 mL의 추출 용액, 그리고 40℃ 수조에서 배양합니다. 30 분. 원심분리기 10000 rpm 10 실온에서 분, 상등액을 수집하고 테스트를 위해 얼음 위에 보관하십시오..
2. 적포도주, 과일 주스, 및 기타 액체 샘플: 가져가다 100 μL의 샘플 용액을 추가하고 900 추출 용액의 μL. 소용돌이 혼합, 실온에서 원심분리기, 10000 rpm 10 분, 상등액을 수집하고 테스트를 위해 얼음 위에 보관하십시오..
3. 추출 또는 약물: Extract Solution으로 특정 농도를 준비합니다., ~와 같은 5 mg/mL.

메모: ABTS 자유 라디칼을 제거하는 다양한 샘플의 능력은 크게 다를 수 있습니다.. 정확성을 보장하기 위해, 예비 결과에 따라 샘플 조정.

II. 결정 단계:

1. 분광 광도계를 1시간 이상 예열하세요. 30 분, 파장을 로 설정하다 405 nm, 증류수로 제로화.
2. 양성 대조군의 준비: 준비하다 10 mmol/L 비타민 C 용액(추출 용액 포함). 선형 관계의 경우, 준비하다 1, 0.8, 0.6, 0.4, 0.2, 그리고 0.1 mg/mL 비타민 C 용액. 제거율이 약인 양성 대조군의 경우 90%, 보다 큰 비타민 C 용액을 준비하십시오. 1.5 mmol/L.
3. 운영 테이블: 96웰 플레이트 또는 EP 튜브에 다음 시약을 추가합니다., 각기:

시약 이름	빈 튜브 (비)	시험관 (티)	컨트롤 튜브 (씨)	양성 대조 튜브 (PC)
상청액	50	50		50
VC 솔루션				50
증류수	50		50
시약 IV 용액	100	100	100	100
ABTS 작업 솔루션	850	850	850	850
시약 I	950

잘 섞은 후, 어둠 속에 품다 6 실온에서 분. 에서 흡광도를 측정합니다. 405 nm. 빈 튜브의 흡광도 값 기록, 제어 튜브, 양성 대조 튜브, 시험관은 AB로, 교류, APC, 그리고 각각 AT. 빈 튜브를 테스트해야 합니다. 1-2 타임스.

III. ABTS 자유 라디칼 소거율 계산:

1. 표준곡선의 확립: 양성대조군의 활성산소 소거율 공식: ABTS 유리기 소거율 DVC% = [(AB-APC) ¼ AB] × 100%
2. 시료의 활성산소 소거율 계산식: ABTS 유리기 소거율 D% = [AB – (AT-AC)] ¼ AB] × 100%.

메모:

1. 다양한 샘플의 소거 능력을 비교하려면, 동일한 배치에 동일한 양의 샘플을 추가하는 것이 좋습니다., 사전 실험 결과에 따라 조정. 비교 중, 결과에 따라 샘플을 조정, 동일한 농도에서 제거율 비교 (희석비율).
2. 당일 검체 채취 및 검사를 진행해야 합니다..

실험예:

가져가다 0.05 칠리 g을 넣고 1 균질화를 위한 추출 용액 mL. 원심분리 후, 상층액을 수집하고 결정 단계에 따라 진행합니다.. 통관율 계산: D% = [AB – (AT-AC)] ¶AB] × 100% = [1.330-(0.468-0.022)]¼ 1.330×100% = 66.466%

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