DNase セット

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導入

ウシ膵臓デオキシリボヌクレアーゼ (DNase I)

1. 自然と機能:
   • DNase Iは、ウシ膵臓から抽出されたエンドヌクレアーゼ酵素です.
   • 主にDNAに作用します, ホスホジエステルの結合を切断します, 特にピリミジンヌクレオシドに隣接するもの.
   • 切断は、5でリン酸塩基で終わるオリゴヌクレオチドをもたらします′ 3のエンドとヒドロキシル基′ 終わり.
2. 最適な条件と安定化:
   • DNase Iアクティビティの最適なpHです 7.8.
   • 活性化には、二用の金属イオンが必要です; 一般的な活性化因子には、マグネシウムイオンとカルシウムイオンが含まれます.
   • 5 MMカルシウムイオンは、DNase Iを安定化するために特に使用されます, プロテアーゼによる分解からそれを保護します.
3. 阻害:
   • DNase I活性は、EDTAなどのキレート剤によって阻害される可能性があります, その活動に不可欠な二重の陽イオンを結合して除去する.
   • ドデシル硫酸ナトリウム (SDS) また、その活動を阻害します, おそらく、酵素とDNAとの相互作用との干渉を介して.
4. 精製:
   • 酵素は、汚染物質を除去するためにクロマトグラフィー技術を通じて精製されます, 特に他のヒドロラーゼ.

RNaseフリーDNase Iセット (RNA精製用)

1. 目的:
   • このキットは、カラムまたは磁気ビーズベースのRNA製剤からのDNAを除去するために設計されています RNA抽出 プロトコル.
2. 手順:
   • 生物学的サンプルは最初に溶解しています, エタノールは、カラムまたは磁気ビーズへのRNA結合の条件を最適化するために追加されます.
   • 結合後, サンプルは、不純物を除去するための洗浄ステップを受けます.
3. DNA消化:
   • DNase I, 特定のバッファとともに, RNA結合膜またはビーズに適用されます.
   • 混合物を室温でインキュベートします (25-37 ℃) についてのために 15 分, DNaseIが存在するDNAを消化して除去できるようにする.
4. 消化後処理:
   • 消化後, 列, またはビーズを洗浄してDNaseと分解DNAフラグメントを除去します.
   • ついに, RNAは、DEPC処理水を使用して溶出して、RNase汚染を防ぎます.

詳細

仕様

利点

• 純粋な天然タンパク質, ウシ膵臓から
• 高い活動と純度, >10 Kunitzユニット/μl
• 高コストのパフォーマンス
• RNase汚染を完全に除去します
• 液体タイプを使用する準備ができました
• 超高用量 (10μl/時間,100m/時間) より多くのゲノムDNAを除去するため

注文情報

保管と安定性

Magen RNaseを含まないDNase Iは、まで安定しています 1 保管したときの配達後の年 -20 ℃.