血液トータルRNA抽出キット (ゲノム DNA の除去)

1. 試薬キットのコンポーネント

2. ストレージ

この試薬キットは、室温で保管する必要があります (15-25℃) in a dry environment and can be preserved for 12 月.

3. 試薬キットを使用するための指示

3.1 このキットは分子生物学の研究目的を目的としており、疾患の診断や治療に使用すべきではありません.

3.2 キットの一部のコンポーネントには刺激物が含まれています; 必要な予防策を講じることをお勧めします (保護服やゴーグルを着用するなど).

3.3 このキットを使用するには、高速遠心分離機などの追加の機器が必要です, 水浴 (メタルバス), 渦ミキサー, 無水エタノール, 液体窒素, クロロホルム, 滅菌脱イオン水, およびEPチューブ.

4. 試薬キットの紹介

The RNA purification kit provides a fast and efficient method for purifying RNA from blood and other fluid tissues. It is suitable for most biological fluids and tissues. This RNA purification kit can be applied to blood samples exceeding 0.5 ミリリットル, and through DNA removal technology, the extracted RNA is virtually free of genomic DNA.

The RNA Fast Purification Kit allows for the extraction of total RNA (核RNAおよび細胞質RNAを含む) 体内の血液から 2 時間. The purified RNA can be directly used for applications such as RT-PCR, ノーザンブロット, 等. 精製プロセス全体では、フェノールクロロホルムなどの有毒試薬は必要ありません, making the RNA purification kit well-suited for various other sample types.

5. 実験原則と手順

6. 抽出プロセス

実験を開始する前の注意事項:

あ. ご使用の前に, add the specified amount of ethanol to Wash Buffer 1 as indicated on the reagent bottle label, and mark a check on the label to indicate the addition of ethanol.

B.Elution Buffer is a 0.1x TE solution containing a minimal amount of EDTA. EDTAがその後の実験に影響を与える場合, it is recommended to use sterile deionized water as a substitute for the Elution Buffer.

1. サンプル処理: Take 200μL of blood into an EP tube, 追加 80μL of Red Blood Cell Lysis Buffer 10x, and mix thoroughly by pipetting.
2. 追加 500μL RNA Extraction Buffer 1 プラス, vigorously shake to mix, centrifuge at 12000rpm for 3 分.
3. Transfer the supernatant to a DNA精製 カラム, centrifuge at 12000rpm for 1 分.
4. 追加 250μL of ethanol to the supernatant, pipette and mix, transfer the liquid to the RNA purification column, centrifuge at 12000rpm for 30 秒, 上清を捨てる.
5. 追加 600μL Inhibitor Removal Buffer RNA精製カラムに, centrifuge at 12000rpm for 30 秒, 上清を捨てる.
6. 追加 600μL Wash Buffer 1 RNA精製カラムに, centrifuge at 12000rpm for 30 秒, 上清を捨てる.

(注記: Confirm that ethanol has been added to Wash Buffer 1. Ethanol presence significantly affects subsequent experiments. したがって, membrane drying is crucial. 遠心分離後, ensure no ethanol remains before elution, 次に、廃棄物と収集チューブを廃棄します. After using Wash Buffer 1, the membrane on the RNA purification column should have a slight color. 遠心分離後, RNA精製カラムを慎重に取り外します, ensuring it does not touch the collection tube to prevent ethanol interference.)

7. ステップを繰り返します 6.
8. Centrifuge the empty tube at 12000rpm for 2 分 (to evaporate residual ethanol).
9. Place the RNA purification column in a new centrifuge tube, drip 100μL Elution Buffer onto the membrane, 室温でインキュベートします 5 分 (15℃~25℃), centrifuge at 12000rpm for 1 分.

(注記: Eluting RNA with 50μL Elution Buffer can increase RNA concentration but reduce total RNA yield.)