Blood Total RNA Extraction Kit (Genomic DNA Removal)

1. Componenti del kit di reagenti

2. Magazzinaggio

Questo kit di reagenti deve essere conservato a temperatura ambiente (15-25℃) in a dry environment and can be preserved for 12 mesi.

3. Istruzioni per l'uso del kit di reagenti

3.1 Questo kit è destinato a scopi di ricerca in biologia molecolare e non deve essere utilizzato per la diagnosi o il trattamento di malattie.

3.2 Alcuni componenti del kit contengono sostanze irritanti; è opportuno prendere le dovute precauzioni (come indossare indumenti protettivi e occhiali protettivi).

3.3 L'utilizzo di questo kit richiede apparecchiature aggiuntive come una centrifuga ad alta velocità, bagnomaria (bagno di metallo), miscelatore a vortice, etanolo anidro, azoto liquido, cloroformio, acqua deionizzata sterile, e tubi EP.

4. Introduzione al kit di reagenti

The RNA purification kit provides a fast and efficient method for purifying RNA from blood and other fluid tissues. It is suitable for most biological fluids and tissues. This RNA purification kit can be applied to blood samples exceeding 0.5 ml, and through DNA removal technology, the extracted RNA is virtually free of genomic DNA.

The RNA Fast Purification Kit allows for the extraction of total RNA (including nuclear RNA and cytoplasmic RNA) dal sangue all'interno 2 ore. The purified RNA can be directly used for applications such as RT-PCR, Northern blotting, eccetera. L'intero processo di purificazione non richiede reagenti tossici come il fenolo-cloroformio, making the RNA purification kit well-suited for various other sample types.

5. Principi e procedure sperimentali

6. Processo di estrazione

Precauzioni prima di iniziare l'esperimento:

UN. Prima dell'uso, add the specified amount of ethanol to Wash Buffer 1 as indicated on the reagent bottle label, and mark a check on the label to indicate the addition of ethanol.

B.Elution Buffer is a 0.1x TE solution containing a minimal amount of EDTA. Se l'EDTA influisce sugli esperimenti successivi, it is recommended to use sterile deionized water as a substitute for the Elution Buffer.

1. Elaborazione del campione: Take 200μL of blood into an EP tube, aggiungere 80μL of Red Blood Cell Lysis Buffer 10x, and mix thoroughly by pipetting.
2. Aggiungere 500μL RNA Extraction Buffer 1 più, vigorously shake to mix, centrifuge at 12000rpm for 3 minuti.
3. Transfer the supernatant to a Purificazione del DNA column, centrifuge at 12000rpm for 1 minuto.
4. Aggiungere 250μL of ethanol to the supernatant, pipette and mix, transfer the liquid to the RNA purification column, centrifuge at 12000rpm for 30 secondi, scartare il surnatante.
5. Aggiungere 600μL Inhibitor Removal Buffer to the RNA purification column, centrifuge at 12000rpm for 30 secondi, scartare il surnatante.
6. Aggiungere 600μL Wash Buffer 1 to the RNA purification column, centrifuge at 12000rpm for 30 secondi, scartare il surnatante.

(Nota: Confirm that ethanol has been added to Wash Buffer 1. Ethanol presence significantly affects subsequent experiments. Perciò, membrane drying is crucial. Dopo la centrifugazione, ensure no ethanol remains before elution, then discard the waste and collection tube. After using Wash Buffer 1, the membrane on the RNA purification column should have a slight color. Dopo la centrifugazione, carefully remove the RNA purification column, ensuring it does not touch the collection tube to prevent ethanol interference.)

7. Ripeti il ​​passaggio 6.
8. Centrifuge the empty tube at 12000rpm for 2 minuti (to evaporate residual ethanol).
9. Place the RNA purification column in a new centrifuge tube, drip 100μL Elution Buffer onto the membrane, incubate at room temperature for 5 minuti (15℃~25℃), centrifuge at 12000rpm for 1 minuto.

(Nota: Eluting RNA with 50μL Elution Buffer can increase RNA concentration but reduce total RNA yield.)