The Kit provides fast purification of high-quality RNA from paxigene Blood RNA Tube using silica-membrane spin columns. RNA purified using the HiPure System is ready for applications such as RT-PCR, Northern blotting, poly A+ RNA (mRNA) purificazione, nuclease protection, e traduzione in vitro.
Dettagli
Specifiche
| Caratteristiche | Specifiche |
| Funzioni principali | Isolation of total RNA from Paxgene RNA Tubes |
| Applicazioni | RT-PCR, qPCR, Northern hybridization, NGS, protezione degli acidi nucleici, in vitro translation |
| Metodo di purificazione | Mini colonna rotante |
| Tecnologia di purificazione | Tecnologia della silice, DNA filtration technology |
| Metodo di processo | Manuale (centrifugazione o vuoto) |
| Tipo di campione | Blood in the preservation tube |
| Importo del campione | 2.5ml |
| Volume di eluizione | ≥30ml |
| Volume di trasporto del liquido per colonna | 800ml |
| Resa legante della colonna | 100μg |
Principio
The Kit is for the purification of total RNA from 2.5 ml human whole blood collected in a PAXgene Blood RNA Tube. Purification begins with a centrifugation step to pellet nucleic acids in the PAXgene Blood RNA Tube. The pellet is washed and resuspended, and incubated in optimized buffers together with proteinase K. DNA wash The lysate is passed through a DNA Mini column. Ethanol is added to adjust binding conditions, and the lysate is applied to a column.RNA is selectively bound to the silica membrane as contaminants pass through. The remaining contaminants are removed in several efficient wash steps. Between the first and second wash steps, the membrane is treated with DNase I to remove trace amounts of bound DNA. After the wash steps, RNA is eluted in elution buffer and heat-denatured.
Vantaggi
- Alta qualità – L'RNA totale ad elevata purezza può essere utilizzato direttamente in varie applicazioni sensibili a valle
- Veloce – isolation of several samples can be completed in 40 minutes by using the column purification method
- Safety – no phenol-chloroform extraction is required
- Sensibile – direct lysis of blood, plasma, and other samples without separation of leukocytes
Contenuto del kit
| Contenuti | R416802 | R416803 |
| Tempi di purificazione | 10 Preparativi | 50 Preparativi |
| HiPure RNA Mini Columns I | 10 | 50 |
| gDNA Filter Mini Columns | 10 | 50 |
| 2ml Provette di raccolta | 30 | 150 |
| Acqua libera da RNasi | 60 ml | 250 ml |
| Buffer MBR1 | 10 ml | 30 ml |
| Buffer MBR2 | 5 ml | 15 ml |
| Buffer RW1 | 15 ml | 60 ml |
| Buffer RW2* | 6 ml | 20 ml |
| Proteinasi K | 12 mg | 50 mg |
| Tampone di dissoluzione della proteasi | 1.8 ml | 5 ml |
| DNasi I | 120 ml | 600 ml |
| Tampone dnase | 6 ml | 30 ml |
Conservazione e stabilità
Proteinase K should be stored at 2–8°C upon arrival. Dnase dovrei essere immagazzinato a -20 ° C. Tuttavia, conservazione a breve termine (Dnase i fino a 1 settimane, Proteinase K up to 8 settimane) a temperatura ambiente (15–25°C) non influisce sulle loro prestazioni. I restanti componenti del kit possono essere conservati a temperatura ambiente (15–25°C) e sono stabili almeno per 18 mesi in queste condizioni.
Dati dell'esperimento
Recensioni
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