Ce produit doit être emballé avec des sacs de glace et expédié via FedEx ou UPS.
Il arrivera dans 7-10 jours. Les frais d'expédition sont inclus dans le prix du produit.
Présentation du produit：
Ce kit de test offre une méthode rapide et précise pour détecter le virus du syndrome de la tache blanche (WSSV) en crevettes.
- Technologie: Emploie le quantitatif fluorescent en temps réel RAP (Méthode de la sonde Taqman) pour une détection sensible et spécifique.
- Cibles: Utilise des amorces spécifiques et des sondes fluorescentes conçues pour cibler la séquence d'acide nucléique unique de WSSV.
- Applications: Détecte le WSSV dans divers échantillons de crevettes, y compris:
- Tissus animaux
- Alimentation
- Autres types d'échantillons (Consulter les spécifications du kit)
- Double détection: Fournit des résultats qualitatifs et quantitatifs:
- Qualitatif: Détermine la présence ou l'absence de WSSV.
- Quantitatif: Mesure la quantité d'acide nucléique WSSV présent, permettant une évaluation de la charge virale.
- Surveillance en temps réel: Utilise la PCR en temps réel pour une surveillance continue de l'amplification tout au long de la réaction, Permettre des résultats rapides.
Ce kit de test convivial fournit un outil précieux pour les producteurs de crevettes, chercheurs, et des laboratoires de diagnostic pour une détection et une gestion efficaces du WSSV.
Contenu du produit：
| Composants | WP2101005-01 （24T） |
| Solution de réaction WSSV | 23μl par puits × 8 puits par bande × 3 bandes |
| Contrôle positif WSSV | 100µL |
| contrôle négatif | 100µL |
Stockage:
Stocker à -20 ° C, avec une durée de conservation d'au moins 12 mois.
Instrument applicable：
Série ABI (ABI 7300 / ABI 7500 / étape un, etc.), Série Roche LightCycler, Bio-Rad CFX 96, Sishibibio Q162D, et d'autres instruments de PCR quantitatifs de fluorescence en temps réel
Traitement des échantillons：
Traiter les échantillons selon les normes pertinentes, et stocker les échantillons traités pour une utilisation ultérieure.
Procédures expérimentales：
- La préparation des échantillons (Zone de préparation des échantillons)
Veuillez vous référer au manuel d'instructions de l'ADN total /Kit d'extraction d'ARN, ou utilisez l'instrument d'extraction et de purification d'acide nucléique entièrement automatisé ES08 avec un kit d'extraction d'acide nucléique rapide correspondant (Méthode de perle magnétique), ou d'autres kits / méthodes d'extraction d'acide nucléique conformes aux normes pertinentes pour extraire l'acide nucléique des échantillons traités. L'acide nucléique échantillon extrait doit être testé dès que possible et stocké dans une boîte à glace, ou bien stocké à -20 ° C.
- Préparation du système de réaction (Ajout de zone)
2.1 Sortez le tube de contrôle positif WSSV, tube de contrôle négatif, et tubes de réaction contenant la solution de réaction WSSV requise pour l'expérience (n+2) (c'est-à-dire, n échantillons à tester + contrôle positif + contrôle négatif), décongeler complètement les réactifs à température ambiante, centrifugeuse pour 10 secondes, centrifuger le liquide de la paroi du tube et du couvercle au bas du tube, et stocker dans une glace pour une utilisation ultérieure.
2.2 Puis ajouter 2 μl de contrôle négatif extrait, échantillon d'acide nucléique, et contrôle positif WSSV au tube de réaction dans la bande de huit rangées, Fermez le couvercle du tube, faire un enregistrement, et faire le volume total de chaque réaction 25 μl. Bien mélanger, centrifugeuse pour 30 secondes, et effectuer l'expérience d'amplification sur l'instrument de PCR quantitatif de fluorescence en temps réel.
- Amplification par PCR fluorescente (Domaine d'amplification et d'analyse de produits)
Pré-dénaturation à 95°C pour 3 minutes; dénaturation à 95 ° C pour 5 secondes, recuit et extension à 60°C pour 30 secondes, pour 40 cycles, recueillir le signal de fluorescence à 60 ° C. Choisissez Fam comme groupe de fluorescence, Et aucun comme groupe exhabiteux (Pour une utilisation avec la série ABI en temps réel, les instruments de PCR quantitatifs en temps réel, si nécessaire, Contactez le fabricant à l'avance ou ajoutez un colorant d'étalonnage ROX par vous-même, et sélectionnez Rox comme groupe exhabiteux; sinon, suivre la procédure normale).
- Détermination du résultat
4.1 Valeur CT du contrôle positif < 30 Et un “S” La courbe d'amplification en forme apparaît, Le résultat du test est valide. Sinon, l'expérience devrait être répétée. Si le retest n'est toujours pas valide, veuillez contacter le personnel technique.
4.2 Résultat de détection des échantillons: Valeur CT ≤ 38 Et un “S” La courbe d'amplification en forme apparaît, indiquant un résultat positif, ce qui signifie que l'échantillon contient le virus du syndrome de la tache blanche (WSSV).
4.3 Résultat de détection des échantillons: 38 < CT < 40, c'est considéré comme suspect. L'échantillon doit être retesté. Si la valeur CT reteste < 40 Et il y a une courbe d'amplification claire, c'est considéré comme positif; sinon, c'est considéré comme négatif.
4.4 Résultat de détection des échantillons: Aucune valeur Ct ou valeur Ct ≥ 40 et non “S” courbe d'amplification en forme, c'est considéré comme négatif, indiquant que le virus du syndrome des points blancs (WSSV) n'a pas été détecté dans l'échantillon.
Précautions：
- Ce kit de test a une sensibilité élevée. Pour éviter les contaminations, L'expérience doit être strictement partitionnée, et l'isolement physique entre les partitions est recommandé pour éviter la contamination croisée causée par des facteurs humains.
- Portez des blouses de laboratoire et des gants en latex pendant l'expérience. Utilisez des outils séparés dans différents domaines, Et n'oubliez pas de changer les gants et les blouses de laboratoire.
- Les composants de la solution de réaction sont sensibles à la lumière et doivent être stockés loin de la lumière. Décongeler complètement les réactifs avant utilisation, mais évitez les congélations et décongélations répétées.
- Suivez les instructions strictement pour des étapes telles que la préparation des réactifs et l'ajout d'échantillon. Désinfecter l'ouchette, centrifuger, et pipettor régulièrement en utilisant des désinfectants de chlore, éthanol, agents de décontamination des acides nucléiques, ou lumière ultraviolette.
- Après la réaction, Placer les tubes de réaction de PCR dans des sacs scellés pour l'élimination. N'ouvrez pas les tubes pour éviter la contamination des aérosols.
- Ne mélangez pas les réactifs de différents lots. Utiliser dans la date d'expiration. Les consommables doivent être traités sans enzymes et stériles.
- Un résultat de test négatif n'indique pas complètement un état non infecté; Il est étroitement lié à la qualité de l'acide nucléique obtenu. “Négatif” Les résultats peuvent être dus à une qualité d'échantillon d'acide nucléique non qualifié, Faible charge d'acide nucléique échantillon, ou extraction infructueuse d'acide nucléique (détection). Des considérations cliniques vétérinaires sont nécessaires pour des diagnostics spécifiques.
- Causes possibles de faux positifs: Contamination croisée pendant la collecte des échantillons, transport, et extraction d'acide nucléique.
- Pour toute autre question, Veuillez contacter rapidement le personnel technique du fabricant. Ce produit est destiné uniquement à la recherche scientifique et n'est pas destiné au diagnostic clinique ou à d'autres fins..
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