Kit de prueba de ácido nucleico para el virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) (Método de sonda fluorescente de PCR) 24t

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Llegará dentro 7-10 días. Los gastos de envío están incluidos en el precio del producto..

Introducción del producto：

Este kit de prueba ofrece un método rápido y preciso para detectar el virus del síndrome de la mancha blanca. (WSSV) en camarones.

• Tecnología: Emplea fluorescencia cuantitativa en tiempo real PCR (Método de sonda TaqMan) para una detección sensible y específica.
• Objetivos: Utiliza cebadores específicos y sondas fluorescentes diseñadas para apuntar a la secuencia única de ácido nucleico del WSSV..
• Aplicaciones: Detecta WSSV en varias muestras de camarón, incluido:
  • Tejidos animales
  • Alimentar
  • Otros tipos de muestra (consultar especificaciones del kit)
• Detección dual: Proporciona resultados cualitativos y cuantitativos.:
  • Cualitativo: Determina la presencia o ausencia de WSSV.
  • Cuantitativo: Mide la cantidad de ácido nucleico de WSSV presente, permitiendo la evaluación de la carga viral.
• Monitoreo en tiempo real: Utiliza PCR en tiempo real para un seguimiento continuo de la amplificación durante toda la reacción., permitiendo resultados rápidos.

Este kit de prueba fácil de usar proporciona una herramienta valiosa para los productores de camarón, investigadores, y laboratorios de diagnóstico para la detección y gestión eficaz del WSSV.

Contenido del producto：

Componentes	WP2101005-01 (24T)
Solución de reacción de WSSV	23µL por pocillo × 8 pocillos por tira × 3 tiras
Control positivo de WSSV	100µL
control negativo	100µL

Almacenamiento:

Conservar a -20°C, con una vida útil de al menos 12 meses.

Instrumento aplicable：

Serie ABI (ABI 7300/ABI 7500/Paso uno, etc.), Serie Roche LightCycler, Bio-Rad CFX 96, SanshiBio Q162D, y otros instrumentos de PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real

Procesamiento de muestras：

Procese las muestras de acuerdo con los estándares pertinentes., y almacenar las muestras procesadas para su uso posterior.

Procedimientos experimentales：

• Preparación de la muestra (Área de preparación de muestras)

Consulte el manual de instrucciones del total DNA/kit de extracción de ARN, o utilice el instrumento de purificación y extracción de ácidos nucleicos totalmente automatizado ES08 con un kit de extracción rápida de ácidos nucleicos correspondiente. (método de cuentas magnéticas), u otros kits/métodos de extracción de ácido nucleico que cumplan con los estándares pertinentes para extraer ácido nucleico de las muestras procesadas. La muestra de ácido nucleico extraída debe analizarse lo antes posible y almacenarse en una nevera., o bien almacenado a -20°C.

• Preparación del sistema de reacción (Agregar área)

2.1 Saque el tubo de control positivo de WSSV, tubo de control negativo, y tubos de reacción que contienen la solución de reacción de WSSV necesaria para el experimento. (n+2) (es decir., n muestras a analizar + control positivo + control negativo), Descongelar completamente los reactivos a temperatura ambiente., centrífuga para 10 segundos, Centrifugar el líquido desde la pared del tubo y la tapa hasta el fondo del tubo., y guárdelo en una nevera para su uso posterior..

2.2 Luego agregue 2 μL de control negativo extraído., muestra de ácido nucleico, y control positivo de WSSV al tubo de reacción en la tira de ocho filas, cerrar la tapa del tubo, grabar un disco, y hacer que el volumen total de cada reacción sea 25μL. Mezclar bien, centrífuga para 30 segundos, y realizar el experimento de amplificación en el instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real.

• Amplificación por PCR fluorescente (Área de Amplificación y Análisis de Productos)

Predesnaturalización a 95°C para 3 minutos; desnaturalización a 95°C para 5 segundos, recocido y extensión a 60°C para 30 segundos, para 40 ciclos, recoger la señal de fluorescencia a 60°C. Elija FAM como grupo de fluorescencia, y Ninguno como grupo extintor (para usar con instrumentos de PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real de la serie ABI, si necesario, Póngase en contacto con el fabricante con antelación o agregue el tinte de calibración ROX usted mismo., y seleccione ROX como grupo extintor; de lo contrario, seguir el procedimiento normal).

• Determinación de resultados

4.1 Valor Ct del control positivo. < 30 y un “S” Aparece una curva de amplificación con forma., el resultado de la prueba es válido. Si no, el experimento debe repetirse. Si la nueva prueba aún no es válida, por favor contacte al personal técnico.

4.2 Resultado de la detección de muestra: Valor CT ≤ 38 y un “S” Aparece una curva de amplificación con forma., indicando un resultado positivo, lo que significa que la muestra contiene el virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV).

4.3 Resultado de la detección de muestra: 38 < Connecticut < 40, se considera sospechoso. La muestra debe ser analizada nuevamente.. Si el valor Ct de nueva prueba < 40 y hay una curva de amplificación clara, se considera positivo; de lo contrario, se considera negativo.

4.4 Resultado de la detección de muestra: Sin valor Ct o valor Ct ≥ 40 y no “S” curva de amplificación en forma, se considera negativo, indicando que el virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) no se detectó en la muestra.

Precauciones：

• Este kit de prueba tiene alta sensibilidad.. Para prevenir la contaminación, el experimento debe estar estrictamente dividido, y se recomienda el aislamiento físico entre particiones para evitar la contaminación cruzada causada por factores humanos..
• Use batas de laboratorio y guantes de látex durante el experimento.. Utilice herramientas separadas en diferentes áreas, y recuerda cambiarte de guantes y batas de laboratorio..
• Los componentes de la solución de reacción son sensibles a la luz y deben almacenarse lejos de la luz.. Descongelar completamente los reactivos antes de su uso., pero evite congelar y descongelar repetidamente.
• Siga estrictamente las instrucciones para pasos como la preparación de reactivos y la adición de muestras.. Desinfectar el banco de trabajo, centrífugo, y pipeta usando regularmente desinfectantes con cloro, etanol, agentes de descontaminación de ácidos nucleicos, o luz ultravioleta.
• Después de la reacción, Coloque los tubos de reacción de PCR en bolsas selladas para su eliminación.. No abrir los tubos para evitar la contaminación por aerosoles..
• No mezcle reactivos de diferentes lotes. Usar dentro de la fecha de vencimiento. Los consumibles deben tratarse sin enzimas y ser estériles..
• Un resultado negativo de la prueba no indica completamente un estado no infectado; Está estrechamente relacionado con la calidad del ácido nucleico obtenido.. “Negativo” Los resultados pueden deberse a una calidad no calificada de la muestra de ácido nucleico., carga baja de ácido nucleico de muestra, o extracción fallida de ácido nucleico (detección). Las consideraciones clínicas veterinarias son necesarias para diagnósticos específicos..
• Posibles causas de falsos positivos: Contaminación cruzada durante la recogida de muestras., transporte, y extracción de ácidos nucleicos.
• Para cualquier otra pregunta, Póngase en contacto con el personal técnico del fabricante lo antes posible.. Este producto es solo para uso en investigación científica y no está destinado al diagnóstico clínico ni a otros fines..