Solution de coloration de Gram de Solarbio Weigert(Connexion modifiée)

spécification: 4*50Ml

Stockage: Température ambiante, éviter la lumière

Description du produit:

• Coloration à gramme:
  • Invention:
    • Inventé par le médecin danois Christian Gram 1884.
  • Méthode:
    • Méthode de coloration différentielle largement utilisée en bactériologie.
    • Forme de contre-étage.
  • But:
    • Différencie les bactéries en deux classes grandes:
      • Gram-positif (G *)
      • Gram-négatif (g)
  • Mécanisme:
    • Coloration différentielle basée sur les différences en:
      • Perméabilité de la paroi cellulaire à l'éthanol
      • Capacité à résister à la décoloration
      • Épaisseur et structure de la couche peptidoglycane
  • Processus de coloration:
    • Cellules colorées avec du cristal violet puis traitées avec de l'iode forment des complexes insolubles.
    • Décolorisé par l'éthanol.
  • Points isoélectriques:
    • Bactéries à Gram positif: points isoélectriques à pH 2.0-3.0
    • Bactéries à Gram négatif: points isoélectriques à pH 4.0-5.0
  • Propriétés de liaison:
    • Les bactéries à Gram positif portent plus de charges négatives.
    • Se lier plus étroitement aux colorants de base tels que Crystal Violet.
  • Formation de complexe:
    • Après l'ajout de mordant (iode) dans les cellules bactériennes:
      • Crystal Violet-iodine-protéine complexe insoluble dans l'eau se forme.
      • Se lie aux sels de magnésium à l'acide ribonucléique à l'intérieur des bactéries gram-positives.
  • Résultat:
    • Bactéries tachées moins sujettes à la décoloration.

Étapes de fonctionnement (pour référence seulement):

1. Fixation des tissus dans 10% formol, déshydratation de routine.
2. Couper les sections à une épaisseur de 4 μm, et dewax régulièrement à l'eau.
3. Des tranches de coloration de dépose dans une solution de coloration en cristal violet pour 5 minutes, puis jetez le colorant.
4. Différencier la solution de différenciation de l'éthanol acide pour 2-5 secondes.
5. Rincer avec de l'eau qui coule pour 3-5 secondes.
6. Des tranches de coloration à tomber dans une solution de coloration à la violette de cristal d'oxalate d'ammonium pour 5 minutes, puis jetez le colorant. Utilisez du papier pour absorber doucement l'excès de liquide autour des tranches.
7. Traiter les tranches avec la solution d'iode de Weigert pour 1 minute, puis jetez la solution d'iode. Absorber à plusieurs reprises l'humidité à l'intérieur des tranches avec du papier filtre.
8. Différencier avec la solution ortho-toluidine-xylène jusqu'à ce qu'il n'y ait pas de lixiviation de couleur violette hors des tranches. Laver immédiatement avec du xylène, et observer au microscope. Répétez le lavage avec du xylène frais plusieurs fois pour éliminer soigneusement l'orthotoluidine. Sceller avec de la résine neutre.

Résultats de la coloration:

• Bactéries à Gram positif et cellulose: Bleu-violet
• Bactéries à Gram négatif: Rouge
• Noyau cellulaire: Rouge