Code produit: C0030
spécification: 10ml / 50ml
Stockage: Stocker dans l'obscurité à -20 ° C, Valable pour un an.
Présentation du produit:
- Hoechst 33342, également connu sous le nom de bisbenzimide h 33342 ou hoe33342, est un colorant fluorescent bleu capable de pénétrer les membranes cellulaires avec une faible toxicité pour les cellules.
- Il est couramment utilisé pour détecter l'apoptose cellulaire, Et après une coloration, Les observations peuvent être faites à l'aide de la microscopie à fluorescence ou de la cytométrie en flux.
- Hoechst 33342 est également utilisé pour la coloration nucléaire ou la coloration à l'ADN de routine. Sa longueur d'onde d'excitation maximale est de 346 nm, et la longueur d'onde d'émission maximale est de 460 nm. Lorsqu'il est lié à l'ADN double brin, La longueur d'onde d'excitation passe à 350 nm et la longueur d'onde d'émission à 461 nm.
- Ce Hoechst 33342 La solution de coloration est prête à utiliser et adaptée à la coloration nucléaire des cellules fixes ou vivantes.
Mode d'emploi:
Pour les cellules ou les tissus fixes:
un. Après la fixation, laver pour retirer le fixateur. Si une coloration à l'immunofluorescence est requise, Effectuez-le d'abord avant Hoechst 33342 tasage. Si aucune autre coloration n'est nécessaire, Continuez directement à Hoechst 33342 tasage.
b. Pour les cellules adhérentes ou les sections de tissu, Ajouter une petite quantité de Hoechst 33342 Solution de coloration pour couvrir l'échantillon. Pour les cellules en suspension, Ajouter trois fois le volume de l'échantillon à colorer, bien mélanger, et incuber à température ambiante pendant 3-5 minutes.
c. Retirez la solution de coloration, et laver 2-3 fois avec tbst, PBS, ou solution saline physiologique pour 3-5 minutes à chaque fois.
d. Observez directement au microscope à fluorescence ou après avoir scellé la diapositive. Les noyaux de cellules apoptotiques semblent densément colorées ou fragmentées.
Pour les cellules vivantes ou les tissus:
un. Ajouter une quantité appropriée de Hoechst 33342 solution de coloration, Assurer la couverture complète de l'échantillon à colorer. Ajouter 1 ml pour chaque puits d'une plaque à six puits ou 100 μl pour chaque puits d'une plaque à 96 puits.
b. Incuber à une température appropriée pour la culture cellulaire pour 20-30 minutes. Jeter la solution, laver 2-3 temps avec du PBS ou du milieu de culture, puis procéder à la détection de fluorescence.
Précautions:
Les colorants fluorescents sont susceptibles de tremper; Il est recommandé d'utiliser un milieu de montage anti-frade. Essayez de terminer la détection le même jour après la coloration, et observer les cellules ou les tissus vivants immédiatement après la coloration. Pour votre sécurité et votre santé, Veuillez porter des vêtements de laboratoire et des gants jetables pendant l'opération.
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