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Introduction
RNase A is an endoribonuclease that specifically degrades single-stranded RNA at C and U residues. Il coupe la liaison phosphodiester entre les 5′-ribose d'un nucléotide et le groupe phosphate attaché au 3′-ribose d'un nucléotide pyrimidine adjacent. Le résultat 2′,3′-le phosphate cyclique est hydrolysé en 3 correspondants′-phosphate de nucléoside. L'activité la plus élevée est présentée avec l'ARN simple brin. La RNase A est un polypeptide à chaîne unique contenant 4 ponts disulfure.
A major application for RNase A is the removal of RNA from preparations of ADN plasmidique. L'enzyme est active dans un large éventail de conditions de réaction. À de faibles concentrations de sel (0 à 100 mMNaCl), La RNase A clive l'ARN simple brin et double brin ainsi que le brin d'ARN dans les hybrides ARN-ADN. Cependant, à des concentrations de NaCl de 0.3 M ou supérieur, La RNase A clive spécifiquement l'ARN simple brin.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Pureté | ≥60% RNase A basis (FDS-PAGE) |
| Enzymatic activity | >50 Unités Kunitz/mg de protéine |
| Optimum reaction temperature | 60°C (effective active temperature is 15-70°C) |
| Conditions de transport | Normal temperature transportation |
| Conditions de conservation | -20-8°C, stockage à sec, le stockage à long terme doit être placé à -20°C. |
| Application 1: adding in the extraction process | 1. Plasmid Extraction: add RNase A (25mg/ml) to buffer P1 with a final concentration of 100-300μg/ml.
2. Extraction d'ADN: add RNase A (25mg/ml) to the digestion solution with a final concentration is 100-400μg/ml, mix well and place at room temperature for 10-15 minutes. when SDS/CTAB in lysate exceeds 2%, RNase activity will be significantly inhibited; Guanidine salt(>4M guanidine hydrochloride or >3M guanidine isothiocyanate) also significantly inhibited RNase A. When RNase A is added to the lysate, the RNase digestion effect can be extracted by appropriately diluting to reduce the concentration of SDS, CTAB and guanidine salt. |
| Application 2: | 1. Remove RNA contamination from crude genomic DNA products: add DNase free RNase A (10mg/ml) to crude DNA products with a final concentration of 10-100μg/ml. Après avoir mélangé, placer à température ambiante pendant 10 minutes.
2. Remove RNA contamination from plasmid DNA products: add DNase free RNase A (10mg/ml) to crude DNA products with a final concentration of 10μg/ml. Après avoir mélangé, it can be directly used for sequencing at room temperature for 10 minutes. |
Informations de commande
| Contenu | C12123 | C12124 | C12128 | C12129 |
| RNase A Solution (25mg/ml) | 10 ml | 100 ml | ||
| DNase Free RNase A Solution (10mg/ml) | 10 ml | 100 ml |
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