Introduction
The MagPure Plasmid purification system uses the paramagnetic bead technology for high-throughput preparation of high-copy or low-copy ADN plasmidique from E. coli cells. This kit also can be used with fosmid and BAC vector-based constructs. The system uses alkaline lysis followed by a MagPure purification to differentially bind plasmid DNA to paramagnetic beads. While the DNA is bound to the beads, contaminants can be rinsed away using a simple washing procedure. Because MagPure uses magnetic separation technology, the protocol does not require vacuum filtration. This makes kit extremely amenable to automation. Plasmid DNA purified with this system is most commonly used in Sanger Sequencing and RAP amplification.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolation up to 15μg endotoxin free plasmid DNA from 1-5ml bacterial culture |
| Applications | Enzyme digestion, séquençage, PCR and labeling, etc.. |
| Technologie de purification | Technologie des billes magnétiques |
| Méthode de processus | Manuel ou automatique |
| Échantillon type | Conventional plasmid, plasmid≤30KB |
| Montant de l'échantillon | 1-5ml |
| Volume d'élution | ≥50μl |
| Temps par course | ≤80 minutes |
Principe
Ce produit est basé sur la méthode de purification de particules magnétiques à forte liaison. The sample is lysed and digested under the action of lysate and Lysozyme. L'ADN est libéré dans le lysat. Après avoir ajouté des particules magnétiques et une solution de liaison, L'ADN sera adsorbé à la surface des particules magnétiques, et les impuretés telles que les protéines seront éliminées sans adsorption. Les particules adsorbées ont été lavées avec une solution de lavage pour éliminer les protéines et les impuretés., lavé avec de l'éthanol pour éliminer les sels, et enfin, DNA was eluted with an Elution Buffer.
Avantages
- Haute pureté – purified plasmid can be directly used in sequencing, enzyme digestion PCR, etc..
- Rapide – it takes only 80 minutes to complete the isolation
- Haut rendement – up to 15μg plasmid can be bound in one column
- Economic – excellent cost-effectiveness performance
Contenu du kit
| Contenu | P181402 | P181403 | P181404 |
| Temps de purification | 100 Préparations | 500 Préparations | 5000 Préparations |
| RNase A | 10 mg | 30 mg | 2 X 160 mg |
| Buffer P1 | 30 ml | 150 ml | 2 X 800 ml |
| Buffer P2 | 30 ml | 150 ml | 2 X 800 ml |
| Buffer LEN3 | 20 ml | 80 ml | 800 ml |
| Buffer LN4 | 90 ml | 400 ml | 4 X 980 ml |
| Particules MagPure | 3.5 ml | 17 ml | 3 X 60 ml |
Stockage et stabilité
RNase A and MagPure Particles should be stored at 2–8°C upon arrival. Cependant, stockage à court terme (jusqu'à 12 semaines) à température ambiante (15–25°C) does not affect its performance. Les composants restants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15–25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. L'ensemble du kit peut être conservé entre 2 et 8°C, mais dans ce cas, les tampons doivent être redissous avant utilisation. Assurez-vous que tous les tampons sont à température ambiante lorsqu'ils sont utilisés. If any precipitates form in the buffers, warm at 37℃ to dissolve. After the addition of RNase A, Buffer P1 is stable for 6 months when stored at
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