Introduction
L'ARN liquide HiPure & Le kit miARN intègre du phénol/guanidine-basé sur la lyse d'échantillons et la purification de l'ARN total sur membrane de silice. Réactif MagZol LS, inclus dans les kits, est une solution monophasique de phénol et de thiocyanate de guanidine conçue pour faciliter la lyse de l'échantillon liquide et inhiber la RNase. L'efficacité de lyse élevée du réactif et l'élimination ultérieure des contaminants par extraction en phase organique permettent d'utiliser jusqu'à 0,25 ml d'échantillon liquide par mini colonne de rotation.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolement de l'ARN total à partir de 0,25 ml de liquides corporels à l'aide d'une colonne et du réactif MagZol LS |
| Applications | qPCR / RT-RAP, analyse de copeaux en phase liquide ou solide, hybridation, et détection SNP |
| Méthode de purification | Mini colonne d'essorage |
| Technologie de purification | Technologie de la silice, technologie d'extraction acide phénol/guanidine (Technologie de prétraitement MagZol) |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Sang, sérum, plasma |
| Montant de l'échantillon | 250µl |
| Volume d'élution | ≥20µl |
| Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
| Rendement de liaison de la colonne | 100µg |
Principe
0.25ml d'échantillons de liquide sont homogénéisés dans 0,75 ml de réactif MagZol LS. Après addition de chloroforme, l'homogénat est séparé en phases aqueuse et organique par centrifugation. Le supérieur, la phase aqueuse est extraite, et de l'éthanol est ajouté pour fournir des conditions de liaison appropriées. L'échantillon est ensuite appliqué à la colonne de centrifugation, où l'ARN total (jusqu'à 100 µg) se lie à la membrane et le phénol et les autres contaminants sont efficacement éliminés. L'ARN de haute qualité est ensuite élué dans 30 à 100 µl d'eau sans RNase..
Avantages
- Haute qualité – l'ARN total de haute pureté peut être directement utilisé dans diverses applications sensibles en aval
- Rapide – l’isolement de plusieurs échantillons peut être réalisé en 40 minutes en utilisant la méthode de purification sur colonne
- Sécurité – aucune extraction au phénol-chloroforme n'est requise
- Sensible – lyse directe du sang, plasma, et autres échantillons sans séparation des leucocytes
Contenu du kit
| Contenu | R416302 | R416303 |
| Temps de purification | 50 Préparations | 250 Préparations |
| Mini-colonnes HiPure ARN | 50 | 250 |
| 2Tubes de prélèvement ml | 50 | 2 X 125 |
| Réactif MagZol LS | 60 ml | 270 ml |
| Tampon RWC | 20 ml | 60 ml |
| Tampon RW2* | 20 ml | 2 X 50 ml |
| Eau sans RNase | 10 ml | 30 ml |
Stockage et stabilité
Le réactif MagZol LS doit être conservé entre 2 et 8 °C à son arrivée.. Cependant, stockage à court terme (jusqu'à 24 semaines) à température ambiante (15-25°C) n'affecte pas leurs performances. Les composants restants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions.
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