Introduction
Acides nucléiques en libre circulation, tels que des fragments d'ADN extracellulaire spécifiques à une tumeur et des ARNm dans le sang ou des acides nucléiques fœtaux dans le sang maternel, sont présents dans le sérum ou le plasma généralement sous forme de courts fragments, <1000pb (ADN). Le kit HiPure Circulated DNA Midi permet une purification efficace de ces acides nucléiques circulants à partir du plasma humain, sérum, ou de l'urine. Les produits extraits peuvent être utilisés pour la détection clinique in vitro.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolement de l'ADN circulant à partir de 1 à 5 ml de plasma, sérum, fluides corporels utilisant le protocole sous vide |
| Applications | qPCR, analyse de copeaux liquides ou solides, hybridation et détection de SNP, etc.. |
| Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (vide) |
| Échantillon type | Sérum, plasma et autres échantillons de fluides acellulaires |
| Montant de l'échantillon | 1-5ml |
| Volume d'élution | ≥50μl |
| Temps par course | ≤60 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 4ml |
| Rendement de liaison de la colonne | 1mg |
Principe
Ce produit est basé sur la purification sur colonne de silice. L'échantillon est lysé et digéré avec du lysat et de la protéase, L'ADN est libéré dans le lysat. Transfert vers une colonne d'adsorption. L'acide nucléique est adsorbé sur la membrane, tandis que les protéines ne sont pas adsorbées et sont éliminées par filtration. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, L'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel.
Avantages
- Haut rendement – processus le plus optimal, ADN libre (>50pb) peut être obtenu dans la mesure maximale
- Haute concentration – faible volume d'élution, assurer une concentration élevée d’acide nucléique
- Haute pureté – méthode à faible liaison alcoolique, éliminant complètement la pollution par les inhibiteurs et les protéines
- Récupération élevée – L'ADN peut être récupéré au niveau du PG par purification sur colonne de gel de silice
Contenu du kit
| Contenu | DIV3182 |
| Temps de purification | 50 |
| Liste de contrôle d'accès tampon | 250 ml |
| Tampon ACB* | 300 ml |
| Tampon DCW1* | 22 ml |
| Tampon DCW2* | 10 ml |
| Protéinase K | 540 mg |
| Tampon de dissolution de protéase | 30 ml |
| ARN porteur | 110 µg |
| Eau sans nucléase | 20 ml |
| Mini-colonnes HiPure CFDNA | 50 |
| 2 Tubes de prélèvement ml | 100 |
| Tube d'extension | 50 |
| Connecteur Vac | 50 |
Stockage et stabilité
Protéinase K, L'ARN porteur doit être conservé entre 2 et 8 °C à l'arrivée. Cependant, stockage à court terme (jusqu'à 12 semaines) à température ambiante (15-25°C) n'affecte pas leurs performances. Les composants restants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. L'ensemble du kit peut être conservé entre 2 et 8°C, mais dans ce cas, les tampons doivent être redissous avant utilisation. Assurez-vous que tous les tampons sont à température ambiante lorsqu'ils sont utilisés.
Données d'expérimentation
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