Le kit permet une purification rapide de l'ARN de haute qualité à partir du sang total, cellules, et tissus utilisant des colonnes de centrifugation à membrane de silice avec une capacité de liaison de 100 μg d'ARN. Il n'est pas nécessaire d'effectuer des extractions au phénol/chloroforme ni des étapes fastidieuses telles que l'ultracentrifugation sur gradient de CsCl ou la précipitation de l'isopropanol.. L'ARN purifié peut être utilisé pour des applications telles que la RT-RAP, Transfert du Nord, ARN poly A+ (ARNm) purification, protection contre les nucléases, et traduction in vitro.
Détails
Caractéristiques
Caractéristiques | Caractéristiques |
Fonctions principales | Isolement de l'ARN total à partir de 1 à 1,5 ml de sang total |
Applications | qPCR / RT-PCR, analyse de copeaux en phase liquide ou solide, hybridation, et détection SNP |
Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
Technologie de purification | Technologie de la silice, phénol acide/guanidine technologie d'extraction (Technologie de prétraitement MagZol) |
Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
Échantillon type | Sang frais ou congelé, sang de mammifère |
Montant de l'échantillon | ≤1,5 ml de sang total |
Rendement | 2-100µg |
Volume d'élution | ≥20μl |
Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
Rendement de liaison de la colonne | 100µg |
Principe
Le kit simplifie l'isolement de l'ARN du sang grâce à une procédure rapide sur colonne rotative. Les globules rouges sont lysés sélectivement et les globules blancs sont collectés par centrifugation. Les globules blancs sont ensuite lysés dans des conditions hautement dénaturantes qui inactivent immédiatement les RNases.. Après homogénéisation à l'aide de la colonne DNA spin, l'échantillon est appliqué à la colonne d'ARN. L'ARN total se lie à la membrane et les contaminants sont éliminés, laissant l'ARN pur être élué dans 30 à 100 µl d'eau sans RNase (fourni avec le kit) pour une utilisation directe dans toute application en aval.
Avantages
- Haute qualité – l'ARN total de haute pureté peut être directement utilisé dans diverses applications sensibles en aval
- Rapide – l'isolement de plusieurs échantillons peut être réalisé en 20 minutes en utilisant la méthode de purification sur colonne
- Sensible – L'ARN peut être purifié au niveau du PG
Contenu du kit
Contenu | R416102 | R416103 |
Temps de purification | 50 Préparations | 250 Préparations |
Mini-colonnes HiPure DNA | 50 | 250 |
Mini-colonnes HiPure RNA I | 50 | 250 |
2Tubes de prélèvement ml | 100 | 500 |
10 x Tampon RBC | 50 ml | 3 X 100 ml |
Tampon de lyse RTL | 50 ml | 250 ml |
Tampon RW1 | 50 ml | 250 ml |
Tampon RW2* | 20 ml | 2 X 50 ml |
Eau sans RNase | 10 ml | 30 ml |
Stockage et stabilité
Les composants du mini kit HiPure Blood RNA peuvent être conservés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. Assurez-vous que tous les tampons sont à température ambiante lorsqu'ils sont utilisés. Pendant l'expédition, des cristaux ou des précipitations peuvent se former dans le tampon de lyse RTL. Dissoudre en réchauffant le tampon à 37°C.
Commentaires
Il n'y a pas encore de critiques.