Introduction
Le sang est une source précieuse d'ADN pour diverses applications cliniques et études de recherche. Cependant, L'extraction de l'ADN des échantillons de sang présente plusieurs défis:
Problèmes de sécurité:
- Les échantillons de sang peuvent héberger des agents pathogènes, Posant un risque d'infection pour les chercheurs et contaminant l'environnement de laboratoire.
- Les méthodes traditionnelles impliquent souvent des produits chimiques dangereux comme le phénol-chloroforme.
Perte d'ADN:
- Élimination des globules rouges, Une étape de prétraitement courante peut entraîner la perte de fractions d'ADN souhaitées comme l'ADN viral, ADN en circulation, et ADN microbien.
Impuretés et inhibiteurs:
- Le sang contient divers composants qui peuvent interférer avec des analyses en aval comme RAP et Southern blot.
Nouvelles technologies pour améliorer l'extraction de l'ADN sanguine:
Ce produit offre une nouvelle approche pour relever ces défis:
- Sûr et efficace: La méthode élimine le besoin d'élimination des globules rouges, minimiser les déchets infectieux et la contamination potentielle.
- Récupération complète d'ADN: Le protocole permet la purification de l'ADN total, y compris génomique, mitochondriale, viral, et ADN en circulation, fournir une image plus complète pour l'analyse.
- Compatibilité des échantillons larges: La méthode purifie efficacement l'ADN de divers composants sanguins comme le sang total (frais ou surgelé), plasma, sérum, couche leucocyto-plaquettaire, et plus.
- Applications en aval: L'ADN extrait de haute qualité convient aux analyses fiables de PCR et de transfert de Southern.
Cette solution innovante simplifie l'extraction de l'ADN sanguin tout en assurant la sécurité, efficacité, et récupération complète de l'ADN. Il représente une progression importante pour les chercheurs travaillant dans divers domaines comme le diagnostic, médico-légal, et recherche médicale.
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | ADN total d'isolement de 200Ul sang total |
| Applications | RAP, boulon du sud et détection de virus, etc. |
| Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Sang total (frais ou surgelé), sérum, plasma, lait, salive, et d'autres échantillons de liquide et cellules cultivées |
| Montant de l'échantillon | <200μl sang total ou autres échantillons de liquide, <5*106 lymphocytes ou cellules de culture animaux non mammifères qui ont un noyau dans les globules rouges (riche en ADN, comme les oiseaux et les poissons): 5~ 20 μl de sang total à la fois. |
| Volume d'élution | ≥20μl |
| Temps par course | ≤ 30 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
| Rendement de liaison de la colonne | 100µg |
Principe
Cette méthode fournit une solution fiable et pratique pour les chercheurs travaillant dans divers domaines qui nécessitent de l'ADN purifié pour l'analyse, comme PCR, Southern Blot, et séquençage de nouvelle génération.
Purification ADN efficace avec technologie de colonne de silice
Ce produit utilise une méthode basée sur une colonne de silice pour une purification ADN rapide et efficace. Voici une ventilation du processus:
- Échantillon de lyse et de digestion: L'échantillon est traité avec une solution de lysat et une protéase pour décomposer les membranes cellulaires et dégrader les protéines. Cela libère l'ADN dans la solution.
- Liaison à la membrane de silice: Le lysat contenant l'ADN est transféré dans une colonne de silice. La membrane de silice dans la colonne se lie spécifiquement aux molécules d'ADN par des interactions favorables. Les protéines et autres impuretés restent non liées.
- Lavage: Les tampons de lavage sont passés à travers la colonne, Élimination des protéines non liées et des débris cellulaires qui n'adhéraient pas à la membrane de silice.
- Élution: Enfin, un tampon à faible sel (typiquement 10 MM Tris, pH 9.0, et 0.5 mMEDTA) est utilisé pour éluer l'ADN purifié de la membrane de silice. Ce tampon perturbe l'interaction entre l'ADN et la silice, Permettre la collecte de l'ADN purifié dans un tube séparé.
Avantages
- ADN de haute qualité – rencontre une variété d'applications en aval, y compris PCR, qPCR, digestion enzymatique, hybridation, etc..
- Rapide – sans séparation des leucocytes, extraction organique, ou précipitations à l'éthanol
- Simple – Tous les acides nucléiques peuvent être obtenus par digestion directe
- Large applicabilité- gérer une variété d'échantillons de liquide
Contenu du kit
| Contenu | D311102 | D311103 |
| Temps de purification | 50 | 250 |
| Mini-colonnes HiPure DNA I | 50 | 2 X 125 |
| 2Tubes de prélèvement ml | 100 | 5 X 100 |
| Tampon AL | 15 ml | 60 ml |
| Buffer DW1 | 30 ml | 150 ml |
| Tampon GW2* | 12 ml | 50 ml |
| Protéinase K | 24 mg | 120 mg |
| Tampon de dissolution de protéase | 1.8 ml | 10 ml |
| Tampon AE | 15 ml | 60 ml |
Stockage et stabilité
Pour des performances optimales:
- Stocker la protéinase K à 2-8 ° C (réfrigérateur) à l'arrivée.
Stockage à court terme acceptable:
- La protéinase k peut être stockée pour jusqu'à 12 semaines à température ambiante (15-25°C) sans affecter ses performances.
Composants du kit restant:
- Stockez tous les autres composants du kit à sec à température ambiante (15-25°C).
- Ils sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions.
Note importante:
- Si vous stockez le kit entier à température ambiante, Assurez-vous que les tampons sont redéllés avant utilisation et réchauffez toujours tous les tampons à température ambiante avant de les utiliser.
