| Atributo | Detalles |
|---|---|
| Gato | G2572 |
| Tamaño | 3 x 20 ml / 3 x 100ml |
| Almacenamiento | RT, evitar la luz, valido para 1 año |
Componentes del kit
| Reactivo | Volumen | Almacenamiento |
|---|---|---|
| Reactivo(A): | ||
| Fijador diff-cicatriz | 20mililitros | 100mililitros |
| Reactivo(B): | ||
| Diff-cick i | 20mililitros | 100mililitros |
| Reactivo(C): | ||
| Diff-cick II | 20mililitros | 100mililitros |
Antes de usar, reactivo de mezcla (A):(B):(C) en una proporción de 1:1:1 para formar solución de tinción diff-cicatriz. Úselo inmediatamente; No guarde por mucho tiempo.
Introducción
La tinción diff-cick es un método de tinción rápida basado en mejoras en la técnica de tinción de Wright. Se usa comúnmente en pruebas de citología. La solución de tinte se prepara utilizando un método de tinción rápida recomendado por la OMS. Similar a la tinción de Wright, Se basa en los principios de la tecnología Romanowsky Stain.. Los resultados de la tinción son muy similares a los de Wright Stain, Pero la mancha diferente de la tinción toma un tiempo muy corto, generalmente dentro 90 segundos. Se puede utilizar la mancha diferente para evaluar la morfología de los espermatozoides.
Mancha de morfología de esperma (Método diff-cicatriz) es una solución de tinción de morfología de esperma recomendada por la OMS. Su principio de teñido se basa en el hecho de que los espermatozoides y las proteínas con diferentes puntos isoeléctricos en las células tienen diferentes cargas bajo la misma acidez. Pueden combinar selectivamente con los tintes correspondientes para manchar. El tinte se usa principalmente para esperma (celúla) Evaluación de la morfología y solo está destinado a la investigación científica, no diagnóstico clínico u otros fines.
Materiales proporcionados por uno mismo
Deslizar, Agua destilada, Microscopio.
Protocolo (Solo por referencia)
- Prepare un frotis lavando dos diapositivas a fondo, luego lavar con 70% etanol y secado. Agregue 5-20 μl en la diapositiva, Arrastre una gota de semen en la superficie del portaobjetos limpio con el borde del segundo portaobjetos, y haz una mancha. Si la densidad del esperma es demasiado alta, se puede diluir con solución salina fisiológica.
- Coloque el frotis en un fijador diferente o déjelo secar naturalmente, y arreglar para 15-20 segundos.
- Coloque el frotis verticalmente sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido.
- Mancha con diff-cick i para 10-20 segundos y coloque el frotis verticalmente sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido.
- Mancha con diff-cick II para 5-10 segundos y coloque el frotis verticalmente sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido.
- Lavar con agua corriente 10-15 Times para eliminar la solución de tinte en exceso.
- Coloque la mancha verticalmente sobre papel absorbente para eliminar el exceso de líquido y deje que se seque por completo. Ver bajo el microscopio.
Resultado
- Región acrosoma de cabeza de esperma: Azul claro
- Región posacrosomal: Azul profundo
- Parte media: Tal vez rojo leve
- Parte trasera: Azul o rojo leve
Nota
- Ajuste el volumen de la muestra de esperma según la densidad.
- Se recomienda un fijador diff-cicking, Pero el metanol se puede usar como sustituto.
- Use muestras de esperma frescas y asegúrese de un frotis uniforme y grueso para una mancha óptima.
- Evite eliminar la solución de tinte directamente o lavar la mancha vigorosamente para evitar asentarse.
- Reutilizar la solución de tinte con cautela y filtrar si se produce sedimento.
- Decolorizar con metanol si es necesario, evitar volver a teñir.
- Ajuste el tiempo de tinción o la concentración si los colores son demasiado profundos o superficiales.
- Asegúrese de diapositivas limpias para evitar afectar las manchas debido a las alteraciones del pH.
- Use atuendo de seguridad y guantes desechables apropiados.
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