- Beispielsammlung:
- Sammeln 0.1-1 ML Blutprobe.
- Probenvorbereitung:
- Für Blutproben, hinzufügen 2-3 mal das Volumen von 1x Erythrozyten -Lysat.
- Vollständig umdrehen und gut mischen.
- Zentrifuge bei 12,000 U/min für 1 Minute.
- Entfernen Sie den Überstand vorsichtig. Der Niederschlag sollte weiß oder hellrot sein.
- Hinzufügen 400 μl Reagenzpuffer I und 10 μl Proteinase K (10 mg/ml) zum Niederschlag.
- Wirbel und mischen für 15 Sekunden, Dann lassen Sie es bei Raumtemperatur für sitzen 2 Protokoll.
- Sonderfall: Low-Level-Organismen:
- Bei Verarbeitung von Blut aus Geflügel, Vögel, oder andere Organismen auf niedrigem Niveau, bei denen rote Blutkörperchen Kerne enthalten:
- Überspringen Sie 1x rotes Blutkreislysat hinzu.
- Direkt hinzufügen 200 μl Reagenzpuffer i (Gesamtvolumen nicht überschritten 500 μl).
- Lassen Sie es bei Raumtemperatur sitzen für 2 Protokoll.
- Verdauung:
- Hinzufügen 10 μl Proteinase K (10 mg/ml) zur Mischung.
- Durch Inversion gründlich mischen.
- Verdauen bei 65 ° C für 10 Protokoll.
- Invertieren und mischen 6-7 Zeiten während der Verdauung bis abgeschlossen.
- Übertragung auf Reagenzplatte:
- Fügen Sie das Lysat aus dem vorherigen Schritt zur 96-Well-Reagenzplatte hinzu.
- Befolgen Sie die im automatischen Extraktionsprotokoll beschriebenen spezifischen Schritte zur weiteren Verarbeitung.
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Vorverarbeitung der DNA-Extraktion aus tierischem Gewebe 48 Proben
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