Einführung
Hipure viral RNA kit is suitable for purifying viral RNA from samples such as cell-free body fluid or culture medium. The kit is based on silica gel column purification technology. It requires no toxic phenol chloroform extraction and time-consuming alcohol precipitation in the extraction. The whole extraction process takes only 25 Protokoll. The kit is suitable for extracting viral RNA from 1-140µl cell-free fluid samples such as serum, Plasma, cell-free body fluid or culture medium. The product has successfully extracted hepatitis B A/C, hepatitis C RNA, SARS and HIV. The obtained RNA can be directly used for RT-PCR, Northern hybridization and virus detection.
Einzelheiten
Spezifikationen
| Merkmale | Spezifikationen |
| Hauptfunktionen | Extract viral RNA from 140μl cell-free samples |
| Anwendungen | RT-PCR, Nordhybridisierung, and various virus detection |
| Reinigungsmethode | Mini Spin-Säule |
| Reinigungstechnologie | Silica-Technologie |
| Prozessmethode | Handbuch (Zentrifugation oder Vakuum) |
| Beispielstyp | Cell-free body fluid or culture medium |
| Probenmenge | 140μl |
| Elutionsvolumen | ≥15μ |
| Zeit pro Lauf | ≤25 minutes |
| Flüssigkeitstransportvolumen pro Säule | 800μl |
| Bindungsausbeute der Säule | 100μg |
Prinzip
Die Hipure -Kiesel -Gelsäule basiert auf Glasfaserfiltermembran mit hoher Bindungskraft. Unter dem Zustand einer hohen Konzentration an ionisierender Wirkstoff (wie zum Beispiel Guanidin Hydrochlorid oder Guanidinisothiocyanat), Die Filtermembran kann Nukleinsäure durch Wasserstoffbrückenbindung und elektrostatisch adsorbieren, während Protein und andere Verunreinigungen nicht adsorbiert und entfernt werden. Die mit Nukleinsäure adsorbierte Filtermembran wird gewaschen, um das Restprotein und Salz zu entfernen. Endlich, Die auf der Filtermembran adsorbierte Nukleinsäure kann mit niedrigem Salzpuffer ausgewaschen werden (wie Puffer te) oder Wasser. Die erhaltene Nukleinsäure hat eine hohe Reinheit und kann direkt in verschiedenen nachgeschalteten Experimenten verwendet werden.
The sample is homogenized and lysed in the lysate, and RNA is released into the lysate. The high concentration of guanidine isothiocyanate contained in the lysate denatured and inactivated endogenous or exogenous RNase, while RNA is protected from degradation. The lysate is centrifuged to remove insoluble impurities. After adding ethanol to adjust the binding conditions, it is transferred to the column for filtration. RNA is adsorbed on the membrane of the column, while protein is removed without adsorption. The column is washed with buffer VHB to remove protein and other impurities, washed with buffer RW2 to remove salt. Finally the RNA is eluted by RNase free water. The eluted RNA can be directly used in RT-PCR, Northern Blot, poly-A purification, in vitro translation, usw.
Vorteile
- Schnell – Es können mehrere Proben entnommen werden 20 minutes by column method
- Gute Qualität – high purity total RNA can be directly used in various sensitive downstream applications
- Sicher – keine Phenol-Chloroform-Extraktion erforderlich
- Sensitive – RNA kann auf der Ebene von PG wiederhergestellt werden
- Hohe Ausbeute – carrier RNA contained in the product maximize the recovery of trace nucleic acid
Inhalt des Kits
| Inhalt | R417102 | R417103 |
| Reinigungszeiten | 50 Vorbereitungen | 250 Vorbereitungen |
| HiPure Viral Micro Columns | 50 | 250 |
| 2ml-Sammelröhrchen | 100 | 500 |
| Buffer VRL | 50 ml | 200 ml |
| Träger-RNA | 310 µg | 3 X 310 µg |
| Buffer VHB* | 13 ml | 110 ml |
| Puffer RW2* | 20 ml | 2 X 50 ml |
| Nuklease freies Wasser | 10 ml | 30 ml |
Lagerung und Stabilität
Carrier RNA should be stored at 2–8°C upon arrival. Jedoch, kurzfristige Lagerung (bis zu 12 Wochen) bei Raumtemperatur (15–25°C) hat keinen Einfluss auf ihre Leistung. Die restlichen Kit-Komponenten können bei Raumtemperatur gelagert werden (15–25°C) und sind mindestens stabil 18 months under theseconditions
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